平皿计数法水中细菌总数的测定.pdf

水中细菌总数的测定水中细菌总数的测定 平皿数法平皿数法 stt-ynzk 2013年年6月月 水与废水检测分析方法水与废水检测分析方法 第四版增补版第四版增补版 目目 录录 测定方法、方法依据以及测定范围测定方法、方法依据以及测定范围 测定原理测定原理 检测剂、仪器备检测剂、仪器备 分析步分析步 结果算结果算 一一. .测定方法平皿数法测定方法平皿数法 二二. .方法依据水与废水检测分析方方法依据水与废水检测分析方 法第四版增补版法第四版增补版 三三. .测定范围测定范围 水中细菌总数的测水中细菌总数的测 定。定。 四四.测测定原理定原理 细细总总数数测测定是定是测测定水中定水中氧氧、兼性、兼性 厌氧厌氧和和异样异样密度的方法。因密度的方法。因为细为细 以以单单独个体独个体、成、成双双成成对对、状状、成、成 形式存在且形式存在且没没有任何有任何单单独独一一种种培培 养养基基满满一一个个水水样样中所有中所有细细的生理的生理 求。所以由此法所得的可求。所以由此法所得的可 低于低于真真正存活的正存活的细细总总数数。 五五.剂剂 营养琼营养琼 成分白成分白胨胨10g牛牛3g氯氯化化 5g琼琼10-20g水水1000ml 制法制法将将上成分混合后加上成分混合后加热热溶溶 整整ph值为值为7.4-7.6滤滤分分装装于于玻玻璃容器璃容器 中中经经121、103.42pa压压汽汽灭灭20min 存于冷暗存于冷暗处备处备用。用。 六六.仪仪器器备备 1.压压汽汽灭灭器器 2. 干干热灭热灭 3.培培养养361 4.电电炉炉 5.天平天平 6.冰冰 7、放大、放大或或数数器器 8、ph或密或密ph纸纸 9、灭灭、平皿直、平皿直径径9cm、刻度吸、刻度吸、样样 瓶瓶 细菌总数测定细菌总数测定 器材器材 一览一览 七七.分析步分析步 1.水水样样的的 1以无操作方法吸取以无操作方法吸取1ml充分混充分混匀匀的水的水样样 注入盛有注入盛有9ml灭灭生理生理盐盐水的水的中混中混匀匀成成1:10 液。液。 2吸取吸取1:10的的液液1ml注入盛有注入盛有9ml灭灭生生 理理盐盐水的水的中混中混匀匀成成1:100液。按同法依次液。按同法依次 成成1:10001:10000液液备备用。如此用。如此增增 一次必一次必更更换换一支一支1 ml灭灭吸。吸。 2.操作方法操作方法 1以无操作方法用以无操作方法用灭灭吸吸取吸吸取1ml 充分混充分混匀匀的水的水样样注入注入灭灭平皿中平皿中倾倾注注 约约15ml已化已化并并冷却到冷却到45左右的左右的营养琼营养琼 培培养养基基并并即即旋旋摇摇平皿使水平皿使水样样与与培培养养 基充分混基充分混匀匀。每次。每次检时应检时应做一平接做一平接种种 同同时另时另用一用一个个平皿只平皿只倾倾注注营养琼营养琼培培养养基作基作 为为白白对对照照 倾注培养倾注培养 2待冷却凝固后待冷却凝固后翻翻平皿使底平皿使底 向上于向上于361培培养养内内培培 养养24h数数即即为为水水样样1ml 中的中的细细总总数数。 培养结果培养结果 3如果如果测测定水源水定水源水 用用灭灭吸取吸取23个个宜宜度的水度的水 样样1ml分分别别注入注入灭灭平皿平皿内内。以下。以下 操作同生活操作同生活用水的用水的检检步步。 八八. 1.数数及及报报告方法告方法 作平皿作平皿数数时时可用眼睛直接可用眼睛直接观观察必察必 时时用放大用放大检查检查以以漏。在漏。在下各平下各平 皿的皿的数数后后应应求出同求出同度的平均度的平均 数数供下一步供下一步时应时应用。用。 在求同在求同度的平均度的平均数数时时其中一其中一个个平皿平皿 有有大片大片状状生生时时则则不宜用不宜用应应 以无片以无片状状生生的平皿作的平皿作为为度的平度的平 均均数数。片。片状状不到平皿的一半不到平皿的一半 其余一半中其余一半中数数分布又分布又很很均均匀匀则则可可将将此此 半皿半皿数数后乘后乘2以代全皿以代全皿数数。然后再。然后再 求求度的平均度的平均数数。 2.不同不同度的度的择择及及报报告方法告方法 先先择择平均平均数数在在30300之之 只有一只有一个个度的平度的平 均均数数合此合此围时围时则则将将 数数乘以乘以倍倍数数报报告之告之 有有两两个个度其生度其生的的数数 均在均在30300之之则视则视二之比二之比值值来来 决决定其比定其比值值小于小于2应报应报告告两两的平的平 均均数数。 大于大于2则报则报告其中告其中度度小的小的 总总数数。 于于2亦亦报报告其中告其中度度小的小的 数数。 所有所有度的平均度的平均数数均大均大 于于300则应则应按按度最的平均度最的平均 数数乘以乘以倍倍数数报报告之。告之。 所有所有度的平均度的平均数数均小均小 于于30则应则应以按以按度最低的平均度最低的平均 数数乘以乘以倍倍数数报报告之。告之。 所有所有度的平均度的平均数数均不均不 在在30300之之则应则应以最接以最接30或或300 的平均的平均数数乘以乘以倍倍数数报报告之。告之。 所有所有度的均无生度的均无生则则 以以1乘以乘以倍倍数数报报告之。告之。 数数的的报报告告数数在在100以以内内 时时按按实实有有数数报报告大于告大于100时时用二用二 位有效位有效数数字在二位有效字在二位有效数数字后的字后的 数数值值以四五入方