血栓与止血验验医学课件

血栓与止血检验 f 史记载： 公元前犹太人的法典中即有有关血友病的记载。近代欧洲王室之间相互通婚，造成各国王室中血友病患者高发。 血友病患者肿胀的膝关节 止凝血在各种常见病中的重要性 目前发现：除血液系统疾病外，心血管疾病、缺血性脑血管病、糖尿病、肾脏疾病、呼吸系统疾病、妇产科疾病、外科手术、体外循环等常见疾病与凝血功能异常关系密切，这些疾病有凝血因子含量及功能改变、抗凝血物质含量及功能改变等多方面变化。 脑梗死：箭头所指为梗死区 静脉血栓形成 目前发现：体内止血、凝血和纤溶机制相互平衡才能使人体出、凝血保持平衡，包括以下方面： 1血管壁的作用 2血小板的作用 3凝血因子的作用 4抗凝系统的作用 5纤维蛋白溶解（纤溶）系统的作用 6血液流变学改变 1 血管受损后，首先收缩使血流减慢或受阻，内皮细胞及血小板等释放出各种活性物质使血管收缩及血小板活化，组织损伤导致内、外源性凝血系统激活以加强止血作用。 血管的收缩 血小板的激活 凝血系统的激活 局部血粘度的增高 2 静止期 活化期 (1)血小板粘附功能 血小板可直接粘附于血管内皮下成分 ， 如胶原及弹性蛋白等 ， 亦可通过 (2)血小板聚集功能 血小板聚集是血小板参与止血和血栓形成的重要环节，当血小板粘附于血管破损处或受到凝血酶、 化的血小板相互粘附在一起即为血小板聚集。血小板聚集与 维蛋白原、钙离子有关。 血小板的作用 (3)血小板的释放反应 血小板活化剂可以直接引起血小板释放反应并引起二相血小板聚集 (4)促凝作用 成因子 外，血小板内容物中包含有种类较多的凝血因子，血小板活化释放时，因凝血因子的释放而加强局部的凝血作用。 血小板的作用 血小板的作用 （ 5） 血块收缩功能 活化的血小板释放血块收缩蛋白 ， 使血块收缩 ， 有利于创口的缩小和愈合 。 （ 6）维护血管内皮的完整性 血小板能填充受伤内皮细胞所造成的空隙，参与血管内皮细胞的再生和修复过程，能增强血管壁的抗力，减低血管壁的通透性和脆性。 3根据凝血瀑布学说，人体内凝血分为： 内源性凝血途径 外源性凝血途径 凝血共同途径 I：纤维蛋白原 血酶原 织因子、组织凝血活酶 V：易变因子 定因子 血友病球蛋白 浆凝血活酶成分 X： 触因子 血纤维稳定因子 凝血机制 （一）内源凝血途径 （二）外源凝血途径 （三）共同途径 a a a a+ a + a . 内源凝血系统 外源凝血系统 共同途径 to 细胞抗凝：单核 体液抗凝： 抗凝血酶 （ 用：与肝素结合形成复合物，该复合物灭活凝血酶、 蛋白 包括蛋白 C（ 蛋白 S（ 血栓调节蛋白（ 活化蛋白抑制物（ 组织因子途径抑制物 （ 其它抗凝蛋白 ，如 细胞抗凝作用 5溶）系统 6当血液的流动性和粘滞性发生异常。血流缓慢、停滞和阻断，可致血液循环障碍，组织缺氧、缺血，引起一系列病理变化或疾病。因此检测全血粘度、血浆粘度、红细胞变性等有重要意义。 一、血栓与止血常用筛检试验 （一）出血时间 在特定条件下，皮肤小血管被刺破后，血液自行流出到自然停止的时间称为出血时间（ 管壁完整性、某些凝血因子缺乏等有关。 【 检测原理 】 1出血时间测定器法 （ 2 方法 出血器测定法它是双刀片弹簧装置长均为 6入皮肤 1于控制可标准化灵敏度高是目前推荐方法。 【 方法学评价 】 作较为复杂，即使是 准切口”，其应用受到一定限制。因此， 方法学评价见表 2 【 质量保证 】 【 参考区间 】 【 临床意义 】 1 主要涉及血小板和血管壁的一期止血缺陷。 血小板数量异常，如血小板减少症、原发性血小板增多症。 血小板功能缺陷，如血小板无力症、巨大血小板综合征。 某些凝血因子缺乏，如血管性血友病（ 低（无）纤维蛋白原血症和 2 某些严重的血栓性疾病。 血小板计数 （ 血小板光镜结构 血小板电镜结构 （一）、计数方法 显微镜手工计数法 血细胞分析仪计数 流式细胞仪分析 （ 100 300） 109/L （二）、参考范围 20 109/L 可引起自发性出血 危险 低于 5 109/L，可致严重出血 （三）、临床意义 1、 生理性 正常人血小板数 1% 10%的变化 ，表现为早晨较低 ， 午后较高；春季较低 ，冬季略高；平原较低 ， 高原较高；月经前较低 ， 月经后较高；妊娠中晚期升高 ， 分娩后即降低；运动饱餐后升高 ， 休息后恢复；静脉血比毛细血管血高 10%。 2、 病理性 血小板减少： 血小板数量低于 100 109/起血小板数减少的原因： 生成障碍：白血病、再障、放射性损伤 破坏过多：脾功能亢进、血小板减少性紫癜 消耗过多： 栓性血小板减少性紫癜 分布异常：脾肿大、血液稀释 先天性：新生儿血小板减少症、巨大血小板综合症 血小板减少性紫癜患者皮肤表面的淤癍 血小板增多： 血小板数量超过 400 109/ 。 引起血小板数增多的原因： 骨髓增生性疾病 急性大出血 、 急性溶血 脾切除后 感染及炎症性疾病 肿瘤 2、病理性 血小板 形态检查 呈双凸圆盘状，大小不一 ,直径 细胞核，血涂片上多呈圆形、椭圆形及不规则形 ,成簇分布 ,。血小板中央部有紫红色的颗粒，称颗粒区；周围部呈均质浅蓝色，称透明区。 血小板大小形态异常 大小的变化： 血小板明显大小不均，大血小板直径 47型的常为 720 形态的变化 : 血小板颗粒减少 ，见于骨髓增生异常综合征。 血小板卫星现象，血小板黏附、围绕于中性粒细胞周围的现象，有时可见血小板吞噬现象 血小板聚集性和分布异常 功能正常的血小板在外周血涂片上常可聚集成团成簇。 血小板增多 ，呈大片聚集 。 血小板减少 ，聚集成团情况明显减少。 血小板功能异常 ，散在分布，无聚集成团现象。 发的血小板减少的个体的外周血涂片。左侧图片显示聚集的血小板 (色 , 放大 100 x). 右侧显示为围绕中性粒细胞周围所形成的血小板卫星 (色 , 放大 1000 x)。 （二）凝血酶原时间 凝血酶原时间（ 在体外模拟体内外源性凝血的全部条件，测定血浆凝固所需的时间。 【 检测原理 】 凝血酶原时间检测原理（图 2 图 2内源性凝血途径 外源性凝血途径 + + + + 共 同 + + 径 目前， 是通过仪器连续记录血浆凝固过程中的一系列变化，并将这些变化信号转变成数据，用计算机收集、处理数据后得出检测结果。血液凝固仪对种方法与检测原理见表 2 【 方法学评价 】 【 质量保证 】 血液标本采集和处理、仪器和试剂、检测温度等各种因素都对 此，全面质量控制对保证 1检测前 包括患者准备、血液标本采集、转运和处理等，其要求见表 2 2检测中 （ 1）测定：无论是手工法还是仪器法，都要严格按照规程规范操作。 （ 2）组织凝血活酶的质量： 须使用标有国际敏感指数（ （ 3） 示其灵敏度越高。 （ 4）正常对照值：商品化参考血浆常用 100名健康男女各半的混合血浆作为正常对照用的标准血浆。 （ 5） 映测定结果的准确性。 3检测后 （ 1） s）、 血酶原比率（ 凝血酶原活动度（ 其评价见表 2 （ 2） 该结合标本质量和临床诊断等对结果作出综合判断后，才能发出正确的检验报告。重视异常结果的复查，必要时重新采集标本进行复查，并加强与临床沟通，及时掌握反馈信息。 【 参考区间 】 每个实验室必须建立相应的参考区间。 人 11 13s，超过正常对照值 3 人 70 130。 临床意义 】 （三）活化部分凝血活酶时间（ 定血浆凝固所需的时间。以反映内源性凝血因子、共同途径是否异常和血液中是否存在抗凝血物质， 【 检测原理 】 图 2内源性凝血途径 外源性凝血途径 + + + + 共 同 + + 径 【 方法学评价 】 与 【 质量保证 】 1检测前 与 应注意冷冻血浆可降低 F 、 F 等缺乏的灵敏度。 2检测中 其室内质量控制与 其来源及制备方法不同，可影响 3检测后 与 【 参考区间 】 25 35s，超过正常对照值 10每个实验室必须建立相应的参考区间。 【 临床意义 】 2而且检测 F 、F 的灵敏度比 F 、 F 和共同途径中凝血因子更高，能检出 F 5的轻型血友病，故已替代试管法凝血时间（ 但是，单一因子（如F ）活性增高可使 结果则可能掩盖其他凝血因子缺乏。 （四）纤维蛋白原 纤维蛋白原（ 由肝脏合成，是血浆浓度最高的凝血因子。 此， 的准确性较差，已趋向淘汰。目前常用的方法有 【 检测原理 】 【 方法学评价 】 【 质量保证 】 【 参考区间 】 成人： 。新生儿：。 【 临床意义 】 （ 五）凝血酶时间 凝血酶时间（ 反映血浆中纤维蛋白原转变为纤维蛋白的筛检指标之一。 素、类肝素等）。 【 检测原理 】 37 条件下，在待检血浆中加入“标准化”凝血酶后，直接将血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白，使乏血小板血浆凝固，其凝固时间即为 【 方法学评价 】 与 【 质量保证 】 与 【 参考区间 】 16 18s，超过正常对照值 3于试剂中凝血酶浓度不同，其检测结果存在差异。因此，每个实验室必须建立相应的参考区间。 【 临床意义 】 1 低（无）纤维蛋白原血症和异常纤维蛋白原血症，其中更多见于获得性低纤维蛋白原血症。肝素或类肝素抗凝物质，如肝素治疗、肿瘤和 原发性或继发性纤溶亢进时（如 由于 导致 2 一般无临床意义。 （六）纤维蛋白（原）降解产物 纤维蛋白原、可溶性纤维蛋白、纤维蛋白多聚体和交联纤维蛋白均可被纤溶酶降解，生成纤维蛋白（原）降解产物（ 血液 不能鉴别原发性纤溶亢进与继发性纤溶亢进。 、 Y、 等片段具有纤维蛋白原的抗原决定簇，用其免疫动物可获得抗 此，通过免疫学方法可检测血浆 【 检测原理 】 【 方法学评价 】 【 质量保证 】 【 参考区间 】 阴性（ 5）。 【 临床意义 】 继发性纤溶亢进，如栓塞、深静脉血栓形成、恶性肿瘤、肝脏疾病、器官移植排斥反应和溶栓治疗等。 （七） 交联纤维蛋白的降解产物之一。因为继发性纤溶中纤溶酶的主要作用底物是纤维蛋白，生成特异性 以 此，通过免疫学方法检测血浆 【 检测原理 】 【 方法学评价 】 与 【 质量保证 】 【 参考区间 】 阴性（ 250 g/L）。 【 临床意义 】 健康人血液 在血栓形成与继发性纤溶时 此， 在排除血栓形成中有重要价值。 静脉血栓等。 继发性纤溶亢进 在原发性纤溶亢进早期 作为两者的鉴别指标之一。 二、血栓与止血常用筛检试验的临床应用 （一）止血缺陷筛检 1一期止血缺陷筛检试验的临床应用 一期止血缺陷是指血管壁和血小板缺陷所致的出血性疾病，常用筛检试验有 临床应用见表 2 2二期止血缺陷筛检试验的临床应用 二期止血缺陷是指凝血因子缺陷或存在病理性抗凝物质所致的出血性疾病，常用筛检指标有 临床应用见表 2 另外， 进一步选用 多见于继发性纤维蛋白原减少，少见于原发性纤维蛋白原减少或结构异常。 3纤溶亢进性出血筛检试验的临床应用 纤溶亢进性出血是指纤维蛋白（原）等被纤溶酶降解所引起的出血，常用筛检指标有 临床应用见表 2 另外，也可选用 维蛋白原降低、 要排除存在肝素或类肝素抗凝物质的可能。 （ 二）手术前止凝血功能筛检 手术前止凝血功能主要是根据患者的病史（出血史和家族史）、体格检查和实验室检查 3方面资料进行综合判断的。其中，实验室检查一般要联合应用 临床有出血史时，另加出血时间测定器法进行 （三） 是治疗 T