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文档简介
第二章 抗原抗体 反应 第一节 抗原抗体反应的原理 一、抗原抗体结合力 二、抗原抗体的亲和性和亲和力 三、亲水胶体转化为疏水胶体 第二节 抗原抗体反应的特点 一、特异性 二、可逆性 三、比例性 四、阶段性 第三节 影响抗原抗体反应的因 素 一、反应物自身因素 二、环境因素 第四节 免疫学检测技术的类型 思考题 小结 第一节 抗原抗体反应的原理 抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生 的特异性结合反应。 物质基础: 抗原表位与抗体高变区间的互补结合 抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合 抗原抗体之间的结合力 亲水胶体转化为疏水胶体 静电引力 (electrostatic forces) 范德华引力:作用最小 (van der Waals interactions) 氢键:最具特异性 (hydrogen bond ) 疏水作用力:作用最大 ( hydrophobic interactions) 抗原抗体结合力示意图 一、抗原抗体结合力 抗体分子上一个抗 原结合点与对应的 抗原决定簇之间相 适应而存在着的引 力,是抗原抗体间 固有的结合力 亲和力(affinity) 抗原抗体亲和力示意图 二、抗原抗体的亲和力和亲合力 抗体结合部位 与抗原表位之 间结合的强度 亲合力(avidity) 抗原抗体亲合力示意图 可见反应抗原抗体复合物 (疏水胶体) 电解质 抗原 (亲水胶体) 抗体 (亲水胶体) + 三、亲水胶体转化为疏水胶体 第二节 抗原抗体反应的特点 特异性 可逆性 比例性 阶段性 特异性:抗原与抗 体结合反应的专一 性 抗原抗体反应特异性示意图 分子基础:抗原表位与抗体分 子高变区之间空间构型的互 补性 一、特异性 两种不同的抗原 分子具有部分相 同或类似结构的 抗原表位,可与 彼此相应的抗血 清发生反应 交叉反应(cross reactions) 抗原抗体交叉反应示意图 二、可逆性 可逆性:抗原与相应抗体结合成复合物后,在一定条 件下又可解离为游离抗原与抗体的特性 影响因素: 抗体对相应抗原的亲合力亲合力越高,结 合越牢固,越不易解离 环境因素对复合物的影响pH、离子强度 前带(prezone):抗体过量 后带(postzone):抗原过量 等价带(equivalence zone): 抗原抗体比例合适 抗原抗体反应比例性示意图 比例性:抗原与抗体发生 可见反应需遵循一定的量 比关系 三、比例性 第一阶段:特异性结合阶段,反应快,不可见 第二阶段:反应可见阶段,反应慢,出现凝集 、 沉淀和细胞溶解等现象 四、阶段性 第三节 影响抗原抗体反应的因素 抗原、抗体反应物的自身因素 环境因素 一、反应物自身因素 抗原:理化性状、表位种类和数目 抗体:来源、特异性、亲和性、效价 电解质: 生理盐水或缓冲液 酸碱度: pH6pH9 温 度: 1540,37最 适 二、环境因素 反应类型实验技术结果判断 凝集反应 直接凝集试验观察凝集现象 间接凝集试验同上 抗球蛋白试验同上 沉淀反应 液相沉淀试验观察沉淀,检测浊度 免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧 补体参与 的反应 补体溶血试验观察测定溶血现象 补体结合试验同上 第四节 免疫学检测技术的类型 反应类型实验技术结果判断 中和反应病毒中和试验检测病毒感染性 毒素中和试验检测外毒素毒性 标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象 放射免疫技术检测放射性强度 酶免疫技术检测酶底物显色 发光免疫技术检测发光强度 金免疫技术检测金颗粒沉淀 按实际用途分为: 免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique,IHCT) 免疫测定(immunoassay) 按检测现象分为: 放射免疫技术 荧光免疫技术 酶免疫技术 化学发光免疫技术 金免疫技术 按测定反应体系的物理状态分为: 均相免疫测定(homogenous immunoassay) 非均相免疫测定(heterogenous immunoassay) 标记免疫技术:用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物 质等标记抗原或抗体,进行抗原抗体反应后,通过检测标记 物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析 1什么是抗原抗体反应? 抗原抗体反应的原理是什么? 2抗原抗体的结合力有哪些? 3抗原抗体反应有哪些特点? 4如何理解抗原抗体反应的特异性和交叉反应? 5什么是抗原抗体反应的可逆性?有何应用? 6如何理解抗原抗体反应的亲和力和亲合力? 7抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例 ? 8抗原抗体反应有哪些影响因素? 9基于抗原抗体反应的免疫学检测技术有哪些? 10什么是标记免疫技术?标记免疫技术有哪些类型? 思考题 小结 抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生 的特异性结合反应。 抗原抗体之间的结合力涉及静电引力、范德华 引力、氢键和疏水作用力。 抗原抗体反应的特点是特
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