微生物基础知识培训---20180422.ppt

n n 2017.42017.4 主要内容主要内容 微生物知识概况微生物知识概况 l l 什么是微生物什么是微生物 l l 微生物与人类的关系微生物与人类的关系 l l 微生物的特点微生物的特点 洁净车间微生物污染途径洁净车间微生物污染途径 常见消毒和灭菌常见消毒和灭菌 一一、什么是微生物、什么是微生物？ n n 一切肉眼看不见或看不清的微小生物一切肉眼看不见或看不清的微小生物 的总的总 称。它们都是一些体积微小，结构简单的称。它们都是一些体积微小，结构简单的 低等生物。低等生物。 广泛广泛存在于自然界的一群体形微小（直径存在于自然界的一群体形微小（直径 小于小于0.1mm0.1mm）、结构简单、肉眼看不见，必）、结构简单、肉眼看不见，必 须藉助光学或电子显微镜放大数百至数万须藉助光学或电子显微镜放大数百至数万 倍才能观察到的生物。倍才能观察到的生物。 2 2、微生物的种类微生物的种类 按其结构、化学组成及分化程度可分为按其结构、化学组成及分化程度可分为: : 原核类原核类: : 仅有原始核质，无核仁或核膜，细胞器仅有原始核质，无核仁或核膜，细胞器 很不完善。（细菌很不完善。（细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、放线菌、蓝细菌、支原体 、衣原体、立克次氏体、衣原体、立克次氏体） 真核类真核类: : 细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁 和染色体，细胞器完整。（和染色体，细胞器完整。（酵母、酵母、霉菌）霉菌） 非细胞类非细胞类: : 体积微小，能通过除菌过滤器。（体积微小，能通过除菌过滤器。（病病 毒毒） 3 3、微生物的形态、微生物的形态 n n 葡萄球菌葡萄球菌 链球菌棒状杆菌 大肠杆菌 弧状菌酵母菌(芽痕) 微生物的显微状态 微生物的显微状态 铜绿假单孢菌 沙门菌沙门菌 生孢梭菌枯草芽孢杆菌 个体小个体小, ,面积大：面积大：小于小于0.1mm0.1mm。肉眼不可见。肉眼不可见。 分布广分布广, ,种类多（种类多（1010万多种）万多种） ：自然界中到处都有自然界中到处都有 ，如水、空气、土壤等，如水、空气、土壤等, , 土壤中的数量最多。土壤中的数量最多。 代谢强，转化快：代谢强，转化快：发酵乳糖的细菌在发酵乳糖的细菌在1 1小时内可分小时内可分 解其自重解其自重100010001000010000倍的乳糖；产朊假丝酵母合倍的乳糖；产朊假丝酵母合 成蛋白质的能力比食用公牛强成蛋白质的能力比食用公牛强1010万倍。万倍。 生长旺，繁殖快：生长旺，繁殖快：微生物有惊人的繁殖速度，大多微生物有惊人的繁殖速度，大多 数微生物几十分钟内就可以繁殖一代。数微生物几十分钟内就可以繁殖一代。 适应性强，易变异适应性强，易变异（耐药性产生的原因）（耐药性产生的原因） 二、二、微生物的特点微生物的特点 三、三、微生物与人类的关系微生物与人类的关系 微生物无处不在，我们无时不生活微生物无处不在，我们无时不生活 在在“ “微生物的海洋微生物的海洋” ”中。中。 微生物在哪里微生物在哪里? ? n n 土壤数亿土壤数亿/g/g细菌细菌，土壤中的细菌总重量估计为：，土壤中的细菌总重量估计为： 10034 10 10034 10 12 12 吨； 吨； n n 每张纸币带细菌：每张纸币带细菌：900900万万 n n 人体体表及体内存在大量的微生物：人体体表及体内存在大量的微生物： 皮肤表面：平均皮肤表面：平均1010万个细菌万个细菌/ /平方厘米；平方厘米； 口腔：细菌种类超过口腔：细菌种类超过500500种；种； 肠道：微生物总量达肠道：微生物总量达100100万亿，万亿， 粪便干重的粪便干重的1/31/3是细菌，每克粪便的细菌总数为：是细菌，每克粪便的细菌总数为： 10001000亿个；亿个； n n 每个喷嚏的飞沫含每个喷嚏的飞沫含4500-1500004500-150000个细菌，个细菌， n n 重感冒患者为重感冒患者为85008500万。万。 时时刻刻与微生物时时刻刻与微生物“ “共舞共舞” ” 是是 祸祸？是是 福福？ 微生物既是人类的敌人，也是人类的朋友！ n n 微生物是人类的朋友！微生物是人类的朋友！ n n 微生物是自然界物质循环的关键环节；微生物是自然界物质循环的关键环节； n n 体内的正常菌群是人及动物健康的基本保证体内的正常菌群是人及动物健康的基本保证 ； 帮助消化、提供必需的营养物质、组成生理屏障帮助消化、提供必需的营养物质、组成生理屏障 n n 微生物可以为我们提供很多有用的物质；微生物可以为我们提供很多有用的物质； 醋、酶、各种药物、疫苗、面包、奶酪、啤酒、醋、酶、各种药物、疫苗、面包、奶酪、啤酒、 酱油等酱油等 n n 基因工程为代表的现代生物技术；基因工程为代表的现代生物技术； n n 微生物是人类的敌人微生物是人类的敌人！ 鼠疫 天花 艾滋病 狂犬病 埃博拉病毒 二、微生物与人类的关系二、微生物与人类的关系 n n 可以说，微生物与人类关系的重要性，怎可以说，微生物与人类关系的重要性，怎 么强调都不过分么强调都不过分. . n n 微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在 给人类带来巨大利益的同时也带来给人类带来巨大利益的同时也带来“残忍残忍 ”的破坏。的破坏。 n n 它给人类带来的利益不仅是享受，而且实它给人类带来的利益不仅是享受，而且实 际上涉及到人类的生存。际上涉及到人类的生存。 四、四、微生物生长的影响因素微生物生长的影响因素 1 1营养物营养物：水源、碳源、氮源等：水源、碳源、氮源等 2 2pHpH值值：各种微生物都有其最适宜的：各种微生物都有其最适宜的pHpH值，大多数细菌值，大多数细菌 最适最适pHpH为为6.87.46.87.4，但一般有较大的容忍度，在，但一般有较大的容忍度，在4949也可存也可存 活和生长，少数细菌能在极端活和生长，少数细菌能在极端pHpH值范围内生长。真菌适于值范围内生长。真菌适于 pHpH值值3636的微酸性环境，但在的微酸性环境，但在210210也可生长。也可生长。 3 3温度温度：微生物适于生长繁殖要有适宜的温度，当超过：微生物适于生长繁殖要有适宜的温度，当超过 其最低或最高可耐受的温度时，即停止生长或死亡。一般其最低或最高可耐受的温度时，即停止生长或死亡。一般 细菌最适温度为细菌最适温度为30403040，真菌为，真菌为20302030。 4 4氧气氧气：大多数细菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧环境：大多数细菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧环境 中才能生长），少数细菌是厌氧菌（在无氧环境中才能生长中才能生长），少数细菌是厌氧菌（在无氧环境中才能生长 ），有些细菌和酵母菌是兼性需氧厌氧的，在有氧或无氧环），有些细菌和酵母菌是兼性需氧厌氧的，在有氧或无氧环 境中都能生长繁殖。境中都能生长繁殖。 5 5渗透压渗透压：微生物细胞膜和所有生物膜一样是一种半透膜：微生物细胞膜和所有生物膜一样是一种半透膜 ，可让水自由通过，对溶质则有选择性。由于细胞壁的保护，可让水自由通过，对溶质则有选择性。由于细胞壁的保护 ，微生物能存活在低渗透压的水中。而在高渗溶液（如高浓，微生物能存活在低渗透压的水中。而在高渗溶液（如高浓 度的盐溶液或糖溶液、度的盐溶液或糖溶液、40%40%甘油）中，细胞会脱水并停止生甘油）中，细胞会脱水并停止生 长繁殖。但也有一些专性耐高盐细菌只有在高盐（长繁殖。但也有一些专性耐高盐细菌只有在高盐（1015%1015%） 条件下才生长。条件下才生长。 二、洁净车间微生物污染途径二、洁净车间微生物污染途径 n n 空气空气 n n 水水 n n 人员人员 n n 器具器具 n n 物料物料 空气中的微生物空气中的微生物 空气：空气并不是产生污染的介质，但它是污染的危险携带空气：空气并不是产生污染的介质，但它是污染的危险携带 者。充满微生物的尘埃和水滴就是通过空气作为侵袭我们产者。充满微生物的尘埃和水滴就是通过空气作为侵袭我们产 品的媒介而成为重要的污染源的。品的媒介而成为重要的污染源的。 洁净室缓冲间的作用：洁净室缓冲间的作用： 必须保持缓冲间门的关闭，不得同时开启；必须保持缓冲间门的关闭，不得同时开启； 控制空气对流，减少外界脏空气中的微粒、灰尘进入车间控制空气对流，减少外界脏空气中的微粒、灰尘进入车间 。 （GMPGMP要求要求空气洁净级别不同的洁净室（区）之间的静压空气洁净级别不同的洁净室（区）之间的静压 差应大于差应大于5 5帕，洁净室（区）与室外大气的静压差应大于帕，洁净室（区）与室外大气的静压差应大于 1010帕，并应有指示压差的装置。必要时，相同洁净级别的帕，并应有指示压差的装置。必要时，相同洁净级别的 不同功能区域（操作间）之间也应当保持适当的压差梯度不同功能区域（操作间）之间也应当保持适当的压差梯度 。 ） 水水 生产过程中水是一个重要的环节，用作产品的清洗。生产过程中水是一个重要的环节，用作产品的清洗。 消化道产品清洗一般为纯化水；消化道产品清洗一般为纯化水； 血管类产品清洗一般为注射用水；血管类产品清洗一般为注射用水； GMPGMP要求要求应当制定工艺用水的管理文件，工艺用水的储罐应当制定工艺用水的管理文件，工艺用水的储罐 和输送管道应当满足产品要求，并定期清洗、消毒和输送管道应当满足产品要求，并定期清洗、消毒。 药典明确规定了纯化水、注射用水的微生物限度。药典明确规定了纯化水、注射用水的微生物限度。 人人 人是洁净室最大的污染源，占人是洁净室最大的污染源，占90%90%左右。左右。 一般男性每人每分钟向周围排放一般男性每人每分钟向周围排放10001000个以上的含菌粒子，个以上的含菌粒子， 女性为女性为750750个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为 1030010300个个/min/min，一般活动时发菌量为，一般活动时发菌量为15010001501000个个/min/min，行，行 走时发菌量为走时发菌量为90025009002500个个/min/min。咳嗽一次发菌量为。咳嗽一次发菌量为7070070700 个个/min/min，喷嚏一次，喷嚏一次为为4500-1500004500-150000个个/min/min。所以在洁净室。所以在洁净室 中，人的数量和活动应有特别严格的限制。中，人的数量和活动应有特别严格的限制。 人员污染的途径和方式人员污染的途径和方式 l l 人员卫生人员卫生 l l 人员进出洁净区的程序人员进出洁净区的程序 l l 人员在洁净区的活动人员在洁净区的活动 人员卫生人员卫生 人人的头发和皮肤：的头发和皮肤：人的头皮上有人的头皮上有140140万个万个/cm2/cm2，两手上约有，两手上约有 440440万个，万个，1g1g指甲污垢有指甲污垢有3838亿个，亿个，1g1g粪便可达粪便可达101000101000亿个。亿个。 可以说微生物是无处不在，无处不有。可以说微生物是无处不在，无处不有。 人员进出洁净区的程序人员进出洁净区的程序 更更鞋、更衣、洗手、手消毒要严格遵守制度规定；鞋、更衣、洗手、手消毒要严格遵守制度规定； 手的消毒方式严格遵守规程进行，必要时应进行消毒方式手的消毒方式严格遵守规程进行，必要时应进行消毒方式 的验证；的验证； 洁净服和一般工作服、洁净鞋和一般工作鞋应分开、分柜洁净服和一般工作服、洁净鞋和一般工作鞋应分开、分柜 存放，以免交叉污染；存放，以免交叉污染； 不能不更换洁净服就进入洁净区；不能不更换洁净服就进入洁净区； 有效地遮盖内衣、毛发。有效地遮盖内衣、毛发。 对于无菌工作服还能包盖脚部，并能阻留人体脱对于无菌工作服还能包盖脚部，并能阻留人体脱 落物。落物。 不同洁净度级别洁净区使用的洁净工作服分别不同洁净度级别洁净区使用的洁净工作服分别/ /并定期并定期 在在 不同级别洁净环境中清洗、干燥和整理并区别使用。不同级别洁净环境中清洗、干燥和整理并区别使用。 人员在洁净区的活动人员在洁净区的活动 不不携带个人物品进入洁净区，不在生产区吃东西；携带个人物品进入洁净区，不在生产区吃东西； 工作时，不要快速走动，操作的动作要轻，幅度要小，讲话要少，尽量工作时，不要快速走动，操作的动作要轻，幅度要小，讲话要少，尽量 避免不必要的走动，尽量不要频繁进出洁净室。避免不必要的走动，尽量不要频繁进出洁净室。 具体依据具体依据洁净室卫生管理制度洁净室卫生管理制度 n n 器具器具 洁净室器具定期消毒（洁净室器具定期消毒（75%75%酒精）。具体依据酒精）。具体依据洁净室卫生管理制度洁净室卫生管理制度 l l 物料物料 原材料、包装材料入厂必须符合标准；原材料、包装材料入厂必须符合标准； 物料进出洁净区需按照物料进出洁净区需按照洁净室卫生管理制度洁净室卫生管理制度 无需清洗的双层密封包装物料无需清洗的双层密封包装物料 无需清洗的单层密封包装且不可脱去包装的物料无需清洗的单层密封包装且不可脱去包装的物料 需清洗的物料需清洗的物料 不能接触紫外灯关照的特殊物料不能接触紫外灯关照的特殊物料 三消毒与灭菌三消毒与灭菌 消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操 作，从事药品生产和检验的人员都应当了解作，从事药品生产和检验的人员都应当了解 消毒与灭菌的方法及其意义，严格遵守操作消毒与灭菌的方法及其意义，严格遵守操作 规程，否则会影响产品质量，危害患者安全规程，否则会影响产品质量，危害患者安全 。 n n 1 1概念概念 无菌无菌：不存在活的生物。：不存在活的生物。防止细菌进入人体或其他物品的操防止细菌进入人体或其他物品的操 作技术，称为无菌操作。作技术，称为无菌操作。 n n 灭菌灭菌：使达到无菌状态的方法（：使达到无菌状态的方法（GMPGMP指南）。指南）。 用物理或用物理或 化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌（化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌（ GBGB）。通常是指杀灭或除去全部活的微生物（包括繁殖体）。通常是指杀灭或除去全部活的微生物（包括繁殖体 和芽孢）。和芽孢）。 n n 消毒消毒：用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生：用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生 物，使其达到无害化（物，使其达到无害化（GBGB）。通常是指杀死病原微生物的）。通常是指杀死病原微生物的 繁殖体，但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的，不能代繁殖体，但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的，不能代 替灭菌。替灭菌。 n n 抑菌抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖，常用抑菌剂为各种：抑制体内或体外细菌的生长繁殖，常用抑菌剂为各种 抗生素，可抑制细菌的繁殖。抗生素，可抑制细菌的繁殖。 n n 防腐防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死 亡。同一种化学试剂在高浓度时为消毒剂，低浓度时为防腐亡。同一种化学试剂在高浓度时为消毒剂，低浓度时为防腐 剂。剂。 2 2常用消毒剂常用消毒剂 消毒剂消毒剂 乙醇乙醇： 70%75%70%75%水溶液水溶液 供洗手用消毒供洗手用消毒 异丙醇异丙醇： 75%75%水溶液水溶液 用于皮肤、器具等消毒用于皮肤、器具等消毒 甲醛甲醛： 37%40%37%40%甲醛液甲醛液89ml89ml，再加入，再加入45g45g高锰酸钾高锰酸钾 每每mm 3 3 熏蒸量，密闭熏蒸量，密闭1224h1224h。刺激性强。刺激性强 戊二醛戊二醛：2%2%水溶液水溶液 ，用于空气、器具等消毒。广谱、高，用于空气、器具等消毒。广谱、高 效、低毒，可杀芽孢和病毒。刺激性较轻。效、低毒，可杀芽孢和病毒。刺激性较轻。 新洁尔灭（苯扎溴铵）新洁尔灭（苯扎溴铵）：0.1%0.1%水溶液水溶液 用于皮肤、粘膜用于皮肤、粘膜 、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效。抗菌谱较窄。、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效。抗菌谱较窄。 杜杜灭芬（消毒宁）：灭芬（消毒宁）：0.05%0.1%0.05%0.1%水溶液水溶液 用于皮肤、器具等用于皮肤、器具等 消毒消毒 过氧乙酸过氧乙酸 ： 0.2%0.5%0.2%0.5%水溶液，用于器具等消毒水溶液，用于器具等消毒 新配新配0.5%0.5%水溶液，抗菌谱广，可用于皮肤消毒，杀灭某些病水溶液，抗菌谱广，可用于皮肤消毒，杀灭某些病 毒，但性质不稳定毒，但性质不稳定 1g/m3 1g/m3 熏蒸 熏蒸 乳酸：乳酸： 0.331mol/L0.331mol/L熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸 11.5ml/m3 11.5ml/m3 ， 喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用 熏蒸，密闭熏蒸，密闭12h12h以上以上 麝香草酚：麝香草酚：5%5%麝香草酚溶于麝香草酚溶于50%50%乙醇，乙醇， 喷洒墙面、地面，杀喷洒墙面、地面，杀 霉菌霉菌 n n 3 3常用灭菌法常用灭菌法 1 1）干热灭菌法干热灭菌法 常见的有火焰烧灼、干烤和红外线灭菌等。 常见的有火焰烧灼、干烤和红外线灭菌等。 火焰烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材火焰烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材 料制成的器具的灭菌。料制成的器具的灭菌。 干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般 135145135145需需35h35h，160170160170需需2h2h以上，以上，170180170180需需1h1h以上以上 ，180200180200需需0.51h0.51h。除热原则需。除热原则需25030min25030min，或，或 20045min20045min，1802h1802h。 空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时 烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温 度不均，部分物品灭菌不彻底。度不均，部分物品灭菌不彻底。 n n 2 2）湿热灭菌法湿热灭菌法 通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭 通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭 微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。 煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的温度是煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的温度是 100100，一般处理，一般处理3060min3060min可杀死细菌繁殖体，但不能完可杀死细菌繁殖体，但不能完 全杀灭芽孢。此法适用于不能高压蒸汽灭菌的物品。全杀灭芽孢。此法适用于不能高压蒸汽灭菌的物品。 低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先用低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先用60806080 加热（或煮沸）加热（或煮沸）1h1h，然后置，然后置20252025保存保存24h24h（或常温过夜（或常温过夜 ），使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌），使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌 ，如此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易变质的，如此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易变质的 物品，但很费时。物品，但很费时。 高压蒸汽灭菌（热压灭菌法）：超过一个大气压时，水高压蒸汽灭菌（热压灭菌法）：超过一个大气压时，水 的沸点高于的沸点高于100100，反之亦然。，反之亦然。 n n 高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、 经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高 温和潮湿的物品。常用条件为：温和潮湿的物品。常用条件为： 115.5 30min 121.5 20min 115.5 30min 121.5 20min 注意事项：注意事项： a. a. 必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度达到规定的必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度达到规定的 要求。要求。 b. b. 注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度一般是一注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度一般是一 致的，但在蒸汽输入过快时，后者可能低于前者，所以升温时要有一定致的，但在蒸汽输入过快时，后者可能低于前者，所以升温时要有一定 的预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因此，对于一种灭菌产的预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因此，对于一种灭菌产 品，应制定一固定的灭菌曲线（象冻干曲线一样）。品，应制定一固定的灭菌曲线（象冻干曲线一样）。 n n c. c. 定期检查灭菌器内温度的准确性。定期检查灭菌器内温度的准确性。 3 3）化学灭菌法化学灭菌法 利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物 利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物 的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷（又称氧化乙烯）。的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷（又称氧化乙烯）。环环 氧乙烷氧乙烷是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多种病毒，还是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多种病毒，还 能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有毒（有能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有毒（有 致变异性），用于药品方面极有限，多用于医疗器械、塑致变异性），用于药品方面极有限，多用于医疗器械、塑 料制品等灭菌。（不能用于橡胶和乳胶手套，能将其溶解料制品等灭菌。（不能用于橡胶和乳胶手套，能将其溶解 。）。） 4 4）滤过除菌法滤过除菌法 利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理 利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理 ，除去对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌的方法，除去对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌的方法 。过滤法一般只能除菌，不能除去支原体和病毒。过滤法一般只能除菌，不能除去支原体和病毒。 n n 过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜 的厚度等因素有关。的厚度等因素有关。 滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为0.22m0.22m。由于各厂。由于各厂 家生产的相同规格的滤膜质量并不一致，为了保证除菌效家生产的相同规格的滤膜质量并不一致，为了保证除菌效 果，在使用前后应检查滤器的完好性（如压力维持试验或果，在使用前后应检查滤器的完好性（如压力维持试验或 起泡点试验）。起泡点试验）。 一个过滤器的使用时间应根据品种验证后确定，一般不应一个过滤器的使用时间应根据品种验证后确定，一般不应 超过超过8 8小时。小时。 5 5）辐射灭菌法辐射灭菌法 辐射有两种类型：一种是电磁波辐射， 辐射有两种类型：一种是电磁波辐射， 如紫外线、红外线、微波；一种是电离辐射，如可引起被如紫外线、红外线、微波；一种是电离辐射，如可引起被 照射物电离的照射物电离的X X射线、射线、 射线。射线。 紫外线：紫外光波长在紫外线：紫外光波长在136390nm136390nm之间，其中之间，其中260nm260nm左右左右 能破坏核酸，杀菌作用最强。能破坏核酸，杀菌作用最强。 另外，空气中的氧受紫外线照射后，可微量转变为臭氧共同另外，空气中的氧受紫外线照射后，可微量转变为臭氧共同 起杀菌作