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文档简介
实验二 植物病原真菌组织分离培养技术及植物病害症状观察,一、实验目的和要求:,1. 掌握植物病害组织分离、无菌操作及常用病原物的培养和保存方法。 2. 通过观察植物病害的典型症状,初步掌握植物病害的症状特点,并学习植物病害症状的描述方法。,二、材料及用具,(1)植物病害组织体(自备),PDA平板培养基(已做好)。 (2)超净工作台(内有75%酒精(内放脱脂棉球)、解剖刀、手术剪、镊子、酒精灯、培养皿、灭菌纱布(2块5 cm5 cm)、培养皿(9cm)120套(2个班,2皿/人),5%乳酸瓶(60ml),1%漂白粉(0.1%升汞)瓶,无菌水、火柴等。,三、实验内容,操作方法步骤: 1.植物组织体的选择: 选择发病植物体,发病部位病健交界处明显,新鲜的植物组织体作为实验材料。,2、分离过程: 1)实验进行前先把周围环境洒上少许水,地面洁净,把超净台面擦干净,打开超净台的紫外灯照射2030分钟,然后关闭紫外灯,打开鼓风机,点燃酒精灯。,2)培养基在微波炉融化后,在超净台上把培养基倒入灭菌的培养皿内,12 ml/皿(为防止细菌污染,倒平板前每三角瓶内加5%乳酸4-6滴),放置片刻待培养基自然冷却。注意此步操作应在酒精灯附近进行。 3)植物病害标本,用自来水冲洗干净,放入接种箱内;双手用70%酒精棉球擦拭消毒后,伸入接种箱内开始操作。,4)打开3个培养皿(无菌的),依次倒入70%酒精、1%漂白粉、无菌水;取出灭菌解剖刀,蘸70%酒精并过酒精灯火焰后,待刀片冷却后切取所需植物组织体,在病健交界处剪切成3 mm2的大小(保证每人6块,3块/皿),用纱布包好,分别于70酒精中浸5秒后,再在1%漂白粉(0.1升汞溶液)中浸35分钟进行表面充分消毒,而后用灭菌水冲洗3次。,5)用消毒镊子将植物组织块(在干的无菌纱布中吸去多余的水分),移至PDA培养基平板上,3块/皿 。 6)将接种好的平板做好标记,置于25培养箱内培养48小时后观察结果。,棉花 轮纹病,要求:本次实训操作要求细心,规范, 快速,准确 注意 (1) 工作环境的清洁和消毒 (2) 分离用具的消毒 (3) 分离材料的选择,植物病害症状观察,植物病害病状类型 变色 坏死 腐烂 萎蔫 畸形,植物病害症状观察,变色,初始症状 褐色小点,有晕圈,中期症状 褐色斑点,有晕圈,后期症状 叶正面点状物散生排列(分生孢子盘 ),坏死,同心轮纹形病斑,同心轮纹型:发病初期,正面出现黄褐色小点,逐渐扩大成圆形,暗褐色、周围黄色、外有绿色晕的病斑,病斑中出现同心轮纹状排列的黑色小点。叶背面病部为暗褐色,周围浅褐色,无明显边缘。,针芒型: 病斑似针芒向外扩展,无一定边缘,病斑小,但数量多,遍布叶片,后期叶片渐黄,病斑周围及背部保持绿色。, 混合型: 病斑很大,近圆形或不规则形,其上亦有小黑粒点,但不明显地排列成同心轮纹状,病斑暗褐色,后期中心为灰白色,但边缘有的呈绿色。,混合型,形状不规则。病斑较大,在叶边缘及内均发生,梨黑星病,病害发生在主干和大枝上。 (1)在光皮杨树品种上,多围绕皮孔产生直径1厘米左右的水泡状斑; (2)在粗皮杨树品种上,通常并不产生水泡,而是产生小型局部坏死斑; (3)当从干部的伤口、死芽和冻伤处发病时,形成大型的长条形或不规则形坏死班。,桃穿孔病,细菌穿孔病,霉斑穿孔病,褐斑穿孔病,菠菜猝倒病,大白菜软腐病,茄子青枯病,枣疯病,症状:芽不正常萌发与生长所引起的枝叶丛生,以及嫩叶的明脉、黄化和卷成匙形等。病株花器各部分的着生部位不变。花器返祖现象表现为花梗变长,花瓣变成小叶,有时变成小枝条,有时则不发生变态;雌蕊变成小枝条,其腋芽往往萌发,生成短而细的小枝。后来除了雌蕊变成的小枝和萼片腋芽萌发生成的枝条外,其余各部分大都脱落。这样,果实就为小枝所取代,形成结果枝上的丛生症状。,番茄根结线虫病,桃树缩叶病,作业,(1)叙述植物病害组织分离技术的操作 要点及操作过程中注意的事项。 (2)观察分离培养的结果,分析成败原 因。 (3)植物病害症状观察表:,(五种病状类型各选一代表),后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用,主要经营:网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户,做到让客户满意!,致力于数据挖掘,合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面,打造全网一站式需求,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a pro
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