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分光光度法测定火腿肠中亚硝酸盐的含量引言:亚硝酸盐作为一种食品添加剂,能够保持眼肉制品等的色香味,并具有一定的防腐性。但同时也具有较强的致癌作用,过量食用会对人体产生危害。因此,食品加工中需严格控制亚硝酸盐的加入量。实验原理:样品经沉淀蛋白质,除脂肪后,在弱酸性溶液中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应,生成的重氮化合物与盐酸萘乙二胺偶联成紫色的偶氮染料,可用分光光度法测定,仪器:小型多用食品粉碎机,分析天平,烧杯,玻璃棒,250mL容量瓶,50mL容量瓶(7只),漏斗,滤纸,滴管,2.00mL移液管试剂:饱和硼砂溶液,150亚铁氰化钾水溶液,蒸馏水材料:火腿肠样品(双汇王中王骨香风味)实验步骤u 试样预处理1)取样,在分析天平上称取一定量火腿肠样品,样品质量为5.0984g,将称得的样品放入粉碎机中,加入一定量水后将样品绞碎。2)将绞碎后的试样倒入烧杯中,加入12.5mL硼砂饱和溶液搅拌均匀。3)将烧杯中的试样用玻璃棒全部转移到250mL容量瓶中,并用少量水洗涤玻璃棒和烧杯12次,并将容量瓶放在沸水浴中加热15min.4)取出容量瓶,在轻轻摇动下慢慢滴加2.5mLZnSO4溶液沉淀出蛋白质,冷却至室温后,用蒸馏水稀释至刻度,定容,摇匀。5)放置10min中左右,撇去上层油脂,将清液在小漏斗上过滤,需去除最初的10mL滤液,剩下的留测定用。u 标准曲线的绘制1) 准确移取NaNO2溶液0,0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2.0mL分别置于50mL的容量瓶中,再各加入30mL水,然后分别加入2mL对氨基苯磺酸溶液,摇匀,静置3min.2) 分别加入1mL盐酸萘乙二胺溶液,加水稀释至刻度,摇匀。3) 放置15min分钟后用1cm吸收池,以试剂空白为参比,于波长540nm处测定各试液的吸光度。4) 以NaNO2溶液的加入量为横坐标,相应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。u 试样的测定准确移取经过处理的试样滤液40mL于50mL容量瓶中,并按上述标准曲线绘制的操作步骤测出吸光度,从标准曲线上查出相应的NaNO2的质量。数据记录与处理:溶液序号123456试样吸光度A0.0000.0630.1250.1760.2360.2920.269NaN02的含量ug04.08.012.016.020.0X-40mL样品处理液中亚硝酸钠的含量(ug)M-火腿肠的质量(g)结论:国家标准规定火腿肠中亚硝酸钠

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