生物化学 第6章 生物氧化1 ppt课件

第9章 生物氧化与氧化磷酸化,维持生命活动的能量来源,光能（太阳能）：植物和某些藻类，通过光合作用将光能转变成生物能。 化学能：动物和多数微生物，通过生物氧化作用将有机物质存储的化学能释放出来，并转变成生物能。,代 谢,合成代谢一般是指将简单的小分子物质转变成复杂的大分子物质的过程。 分解代谢则是将复杂的大分子物质转变成小分子物质的过程。 糖、脂和蛋白质的合成代谢途径各不相同，但是它们的分解代谢途径则有共同之处，即糖、脂和蛋白质经过一系列分解反应后都生成了酮酸并进入三羧酸循环，最后被氧化成CO2和H2O。,第1节 生物氧化概述,一、什么是生物氧化?,有机物质在生物体内细胞中氧化成二氧化碳 和水并释放能量的过程。 细胞如何利用分子氧把代谢物分子中的氢氧化为水? 细胞如何在酶的催化下把代谢物分子中的碳氧化为二氧化碳? 细胞如何把氧化时产生的能量收集和储存起来?,（一）生物氧化的特点,.在常温、常压、接近中性的pH和多水环境中 进行。 .在一系列酶、辅酶和中间传递体的作用下逐 步进行。 .物质氧化分阶段进行，能量逐步释放。 .生物氧化释放的能量，通过与ATP合成相偶 联，实现能量的转移与利用。,（1）直接脱羧作用 例如丙酮酸的脱羧 （2）氧化脱羧作用 例如苹果酸的氧化脱羧生成丙酮酸,1生物氧化中CO2的生成,（二）生物氧化的方式,（1）脱氢 催化脱氢反应的是各种类型的脱氢酶。,2生物氧化中H2O的生成,()氧化酶催化水的生成,氧化酶主要催化以氧分子为电子受体的氧化反应，反应产物为水。 O2 + 2 H+ + 2 e- H2O,当体系恒温、恒压下发生变化时, G0时，W0，体系对外作功，该反应可自发进行，放能反应 G = 0时，W =0，该反应处于平衡 G0时，W0，该反应不可自发进行，必须吸收外来能量才能进行（吸能反应），同时，该反应的逆过程可以自发进行。,二、 生物化学反应的自由能变化,偶联化学反应标准自由能变化的可加性,热力学上不利的反应可以由热力学上有利的反应所驱动 G小于0只提示的是反应的方向而不是速率,氧化还原电势,锌片溶解 Zn2+进入溶液,铜沉积 Cu2+得电子,e,提供电子 （还原剂）,得到电子 （氧化剂）,失电子、被氧化、化合价增加 得电子、被还原、化合价减少 还原剂失电子的倾向 氧化剂得电子的倾向 标准氧化还原电势、标准电势、标准还原电势,氧化-还原电势,正值越大，越易得电子 负值越大，越易失电子,三、高能化合物,定义：一般将水解时能够释放21kJ/mol（5千卡/mol) 以上自由能的化合物称为高能化合物。 G -21 kJ / mol,高能基团的传递,ATP “能量中间体”,各种高能化合物的Go有高低之分,ATP断裂成AMP 和焦磷酸,焦磷酸,7.7千卡/摩尔,磷酸肌酸（哺乳类）,磷酸精氨酸（虾、蟹）,磷酸肌酸和磷酸精氨酸 在生物体内起储存能量的作用,H,第节 电子传递链（呼吸链）,真核细胞内的线粒体是生物氧化的主要场所；,一、线粒体,线粒体分为外膜和内膜，之间为膜间空隙 外膜：光滑 内膜：有许多向内折叠的突起， 称嵴 基质：存在内膜以内，胶体， 含 50%以上蛋白质（酶）,线粒体基质：三羧酸循环、脂肪酸氧化、氨基酸分解、蛋白质合成等有关的酶 内膜与嵴：脱氢酶、电子传递体系、偶联磷酸化的酶类,由供氢体、传递体、受氢体以及相应的酶催化系统组成的这种代谢途径一般称为生物氧化还原链，当受氢体是氧时，称为呼吸链。,二、电子传递链,一系列电子载体按对电子亲和力逐渐升高的顺序组成的电子传递系统。 线粒体内膜,黄素蛋白 铁硫蛋白 细胞色素 泛 醌 酰胺脱氢酶类,（一）电子传递链的组成,FMN + 2e + 2H+ FMNH2 FAD + 2e + 2H+ FADH2,1. 黄素蛋白,铁硫蛋白(简写为Fe-S) 是一种与电子传递有关的蛋白质，它与其它蛋白质组分结合成复合物形式存在。,2.铁硫蛋白,铁硫蛋白,(2Fe-2S)含有两个活泼的无机硫和两个铁原子。铁硫蛋白通过Fe3+ Fe2+ 变化起传递电子的作用,（简写为Q）或辅酶-Q（CoQ）：它是电子传递链中唯一的非蛋白电子载体。 一种脂溶性醌类化合物。,3. 泛醌,辅酶-Q的功能,Q 很容易接受电子和质子，还原成QH2（还原型）；QH2也容易给出电子和质子，重新氧化成Q。 它在线粒体呼吸链中作为电子和质子的传递体。,4.细胞色素类(Cyt),是含铁的Pr 以血红素为辅基 电子传递蛋白 通过Fe3+ Fe2+ 互变起传递电子的作用,Cyta：辅基是血红素A Cytb：-B Cytc： -C 卟啉的侧链基团不同,Cytaa3复合体(细胞色素c氧化酶) 除含2个铁卟啉，还含2个铜原子(Cu+ Cu2+),（二）呼吸链中的复合物,电子传递链组分除泛醌和细胞色素c外，其余组分形成个复合物镶嵌于内膜。,(1) NADH脱氢酶,即复合物I， 作用：是催化NADH的氧化脱氢以及Q的还原。既是一种脱氢酶，也是一种还原酶。 包括：以FMN为辅基的黄素蛋白、多种铁硫蛋白。 NADHQ还原酶 NADH + Q + H+ = NAD+ + QH2,即复合物， 包括：以FAD为辅基的黄素蛋白、铁硫蛋白、细胞色素b558。 作用：催化琥珀酸的脱氢和Q的还原。,（）琥珀酸脱氢酶,() 细胞色素C还原酶,即复合物III, 也称细胞色素bC1复合体。 包括：细胞色素b 和c1以及铁硫蛋白（2Fe-2S）。 作用：催化电子从还原型QH2转移到细胞色素c。 Cytc 还原酶 QH2 + 2 Cytc (Fe3+) = Q + 2 Cytc (Fe2+) + 2H+,() 细胞色素c氧化酶,即复合物IV 包括：Cytaa3和含铜蛋白。 作用：催化电子从还原型细胞色素c传递给分子氧。,复合体 复合体 复合体 复合体 复合体,酶名称 NADH脱氢酶 琥珀酸脱氢酶 Cytb、C1复合体 Cyt氧化酶,辅基 FMN，Fe-S FAD， Fe-S 血红素，Fe-S 血红素，Cu,2e,FMN FeS,b FeS C1,FAD FeS (b),Q,2e,2e,复合物I,复合物II,琥珀酸,复合物III,2e,2e,C C,aa3 Cu,2e,1/2O2,复合物,琥珀酸脱氢酶,NADH脱氢酶,细胞色素b、C1复合体,细胞色素氧化酶,NADH,2条线粒体呼吸链,NADH呼吸链 FADH2呼吸链,（三）电子传递链的排列顺序,呼吸链的排列原则： 电子从还原性强的化合物到氧化性强的化合物，自由能降低，放出能量。,还原态,氧化态,自由能降低 放能,电子传递顺序的实验证据 1. 测定呼吸链各组分的氧化还原电位 FADH2 -0.18 NADH FMN CoQ Cytb CytC1 CytC Cytaa3 O2 E0 0.32 -0.3 +0.1 +0.07 +0.22 +0.25 +0.29 (v) +0.82 2.测定呼吸链各组分在氧化还原状态的特有的光谱吸收 3. 用各种呼吸链特异抑制剂分析各组分的氧化还原状态,三、电子传递链的抑制剂,阻断呼吸链中某部位电子传递的物质； 鱼藤酮、安密妥、杀粉蝶菌素 阻断电子由NADH向CoQ的传递； 抗霉素A 抑制电子从Cytb到Cytc1的传递； 氰化物、叠氮化物、CO等 阻断电子由Cytaa3传递到氧,2、离子载体抑制剂 与氢离子外的其他一价阳离子K+、Na+结 合形成脂溶性复合物，使其跨膜转移。例如： 颉氨霉素，形成复合物过程耗去了能量，不能 用于ATP 的形成。 3、氧化磷酸化抑制剂 既抑制氧的利用，又抑制ATP的形成； 但不抑制电子传递过程。 寡霉素,第节 氧化磷酸化,一、ATP合成反应,氧化磷酸化 底物水平磷酸化 光合磷酸化 氧化磷酸化电子从NADH或FADH2经电子传递链传递到分子氧形成水，同时偶联ADP磷酸化生成ATP的过程。 底物水平磷酸化在底物氧化过程中，形成了某些高能中间代谢物，再通过酶促磷酸基团转移反应，直接偶联ATP的形成过程。,丙酮酸,琥珀酰-CoA合成酶 （琥珀酰硫激酶）,NADH氧化过程中有三个反应的G -30.5 kJ / mol。 NADHFMNH2 CytbCytc Cytaa3O2 -55.6kJ/mol -34.7kJ/mol -102.1kJ/mol 这三个反应分别与ADP的磷酸化反应偶联，产生2.5个ATP。这些反应称为呼吸链的偶联部位。,氧化磷酸化,复合物 Cytc氧化酶,复合物 Cytc还原酶,复合物 NADH脱氢酶,NADH,2e,FMN FeS,b FeS C1 b,FAD FeS (b),Q,2e,2e,琥珀酸,2e,2e,C C,aa3 Cu,2e,1/2O2,ADP +Pi ATP,ADP +Pi ATP,ADP +Pi ATP,从NADH O2产生2.5个ATP 从FADH2 O2产生1.5个ATP,消耗一个氧原子所产生的ATP分子数 反映氧化磷酸化的效率,二、P/O比值,NADH完全氧化PO：2.5 FADH2完全氧化PO ：1.5,1961年，英国生物化学家Peter Mitchell(1920-1992),三、氧化磷酸化偶联机制,ATP酶复合体,线粒体内膜表面有一层规则地间隔排列着的球状颗粒，称为ATP酶复合体，是ATP合成的场所。 结构： 头部：ATP合酶（偶联因子F1） 柄部：棒状Pr，对寡霉素敏感（OSCP） 基底部：疏水Pr，与内膜连接,（FO）,线粒体偶联因子F1-F0 F1-F0-ATPase复合物 ATP合酶,化学渗透假说的要点是： a. 氧化磷酸化偶联依赖线粒体内膜的完整性 b. 线粒体内膜的电子传递链是一个质子泵； c. 在电子传递链中，电子由高能状态传递到低能状态时释放出来的能量，用于驱动膜内侧的H+迁移到膜外侧（膜对H+是不通透的）。这样，在膜的内侧与外侧就产生了跨膜质子梯度 (pH) 和电位梯度（）；,d. 在膜内外势能差的驱动下，膜外高能质子沿着一个特殊通道（ATP酶的组成部分），跨膜回到膜内侧。质子跨膜过程中释放的能量，直接驱动ADP和磷酸合成ATP。,1、解偶联剂（uncoupler） 使电子传递和ATP形成两个过程分离； 不抑制电子传递，只抑制ATP形成； 使电子传递所产生的自由能变为热能； 对底物水平磷酸化没有影响 如：2,4-二硝基苯酚、双香豆素,四、氧化磷酸化的解偶联和抑制,、氧化磷酸化抑制剂 既抑制氧的利用，又抑制ATP的形成 但不抑制电子传递过程 寡霉素 、离子载体抑制剂 与氢离子外的其他一价阳离子结合 形成脂溶性复合物，使其跨膜转移。 缬氨霉素（K+）、短杆菌肽（K+ /Na+等）,1.磷酸甘油穿梭作用 2.苹果酸穿梭作用,五、线粒体的穿梭系统,胞液,线粒体内膜,基质,磷酸二羟丙酮,-磷酸甘油,磷酸二羟丙酮,-磷酸甘油,NADH + H+,NAD+,FADH2,FAD+,-磷酸甘油脱氢酶 以NAD+为辅酶,-磷酸甘油脱氢酶 以FAD+为辅酶,呼吸链 1.5ATP,磷酸甘油穿梭作用,胞液,线粒体内膜,基质,天冬氨酸,-酮戊二酸,天冬氨酸,NADH + H+,NAD+,NADH + H+,NAD+,苹果酸脱氢酶 以NAD+为辅酶,苹果酸脱氢酶 以NAD+为辅酶,呼吸链 2.5ATP,-酮戊二酸,苹果酸,苹果酸,草酰乙酸,草酰乙酸,谷氨酸,谷氨酸,苹果酸穿梭作用,七、能荷,能 荷 =,ATP+0.5ADP,ATP+ADP +AMP,通常：0.8,ATP、ADP、AMP统称为腺苷酸库,能荷高：促进合成代谢 能荷低：促进分解代谢,其他末端氧化酶系统（自学）,1.能作为递氢体的物质是 A. Cyt aa3 B. Cyt b C. Cyt c D. FAD E. 铁硫蛋白 2.下列哪种酶属于氧化酶 A. NADH脱氢酶 B. CoQ C. Cyt aa3 D.铁硫蛋白 E. 琥珀酸脱氢酶,3.生物氧化中 A. CO2为有机酸脱羧生成 B. 能量全部以热能的形式散发 C. 水是有机物脱水生成 D. 主要在胞液中进行 4. CoQ能将电子传递给 A. Cyt a