课件：新城疫OK 2学时.ppt

鸡新城疫(ND),概述 病原 流行病学特点 临床症状 病理变化 诊断 防 制,概述： 新城疫又名亚洲鸡瘟、伪鸡瘟，它是由新城疫病毒引起的鸡和火鸡的一种急性、高度接触性传染病，常呈败血症经过。自1926年首次发现于英国新城发现，故名； 为A类传染病； 发病死亡率可达90%以上； 主要特征是呼吸困难、下痢、神经机能紊乱，粘膜和浆膜出血。,鸡新城疫,三次大流行： 1、东南亚经亚洲向欧洲，1926年英国爆发为偶然，经30年传播各地。 2、60年，由中东至1973年波及多个国家，起源于鹦鹉 3、1981年，鸽子和野鸽。 在我国新城疫仍然是养鸡业最重要的直接危害。 非典型ND增多，近年流行基因型。,一、病 原,1、分类地位：NDV是副粘病毒科、腮腺炎病毒属的代表病毒，120300nm、单股负链RNA病毒，有囊膜。属于APMV-1，与其他禽类分离的APMV-3有交叉反应。,病毒模式图 基因组,2、主要蛋白质及其功能 纤突有两种糖蛋白：血凝素神经氨酸酶（HN）和融合蛋白（F）。 2.1 HN蛋白的功能： 介导病毒颗粒吸附于靶细胞表面含有唾液酸的受体，启动感染过程； 神经氨酸酶活性是病毒复制中加强病毒颗粒的移动和促进从感染的细胞中释放出来的重要因素； HN的另一个重要功能是促进F蛋白的细胞融合作用。,2.2 F蛋白的主要功能及作用有： 直接参与了NDV致病过程，在HN的协同作用下使病毒囊膜与宿主细胞膜的融合，病毒穿过细胞膜进入胞内，使红细胞溶解。 F蛋白与病毒的毒力有关强毒株为RRQK/RR F，而弱毒株为GK/RQGR L； F蛋白是主要的保护性抗原 F基因是用于遗传学分析的主要基因。,3、分型（血清型和基因型） 3.1 只有一个血清型，但毒力差异大，毒力测定很重要。 NDV致病力强弱依据指标： 1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI），6周龄鸡静脉接种致病指数（IVPI）和最小致死剂量致死鸡胚平均数时间（MDT）； F蛋白裂解部位的氨基酸基序(强毒的F1蛋白的N端即117残基为苯丙氨酸，而F2蛋白的C端是多个碱性氨基酸),表：不同类型的新城疫病毒的主要区别, “观察8天，累计结果，死亡者记为2，有症状者记为1，健康者记为0，累记数字除以试验雏鸡数。,3.2 NDV的基因型：从分子流行病学角度可分为9个基因型。 我国发生的 NDV 多属基因有、型。 其中、型与疫苗株类似 基因型、型、型(青海)毒株导致的 ND 零星发生和局部流行 基因型毒株为我国特有毒株 基因型毒株为我国当前主要流行毒株,3、分型（血清型和基因型）,我国NDV的主要基因型,3.3 NDV的毒力分型,按毒力大小不同，可分为5型： 速发性嗜内脏型（Doyle型，VVNDV）（又称亚洲型，胃肠炎型）：大多数高度强毒力株常是嗜内脏型，引起各种年龄鸡急性死亡，消化道出血。 速发性嗜肺脑型（Beach型，NVNDV）又称美洲型肺脑炎，以神经和呼吸系统紊乱为特征，消化系统症状不明显且没有出血性病变。,3、分型（血清型和基因型）,中发型（Beaudette氏型，MND）为成年鸡呼吸系统病，咳嗽，产蛋减少或停止，脑内接种（严重发病和死亡），其它途径（轻微症状）。 缓发型（ Hitchner型，LND）只引起鸡只轻度呼吸系统症状，成年鸡产蛋下降，各种年龄鸡只很少死亡，但幼龄鸡并发其它感染，死亡率可高达30%。,无症状肠道传染型 无临诊症状和病变，但可从肠道或粪便分离病毒或通过特异性抗体检查来证实。 我国各地分离的毒株一般毒力都有很强，近年有人从鸭、鹅中分离出弱毒株。 最近发现NDV对鸭和鹅也有很强的致病性。,4、NDV的其它生物学特性,4.1 培养：鸡胚(SPF)911日龄尿囊腔（强毒30-60h致死，弱毒3-6d致死，全身出血，肢体末端严重）或鸡胚成纤维细胞（强毒有CPE，而弱毒无）。 4.2 重要特性：血凝性，可用HA或HI鉴定病毒 4.3 病毒抵抗力：本病毒对外界环境，对热和光等物理因素的抵抗力较其他病毒稍强。常用消毒药如2氢氧化钠、1来苏儿、10碘酊、70酒精等在30min内即可将病毒杀死。,NDV infected Embryo 48 hours postinoculation (Strain Cal.11914),二、流行病学特点,流行区域：Asia, the Middle East, Africa, Central and South America 自然宿主是鸡、火鸡、鹅、鸭等，各种年龄均可发病，以雏鸡和中鸡较多。 本病为高度接触性传染病，消化道、呼吸道为主要途径。 传染源为病鸡、带毒鸡和其它鸟类。 本病不受季节影响，各种年龄的鸡均可感染发病，传播快，发病率和死亡率与鸡的抵抗力和病毒的毒力有关。,传播途径多样,三、临 床 症 状,1、鸡新城疫 潜伏期2-18天，自然感染多为4-5天 最急性型: 无明显症状，突然倒毙。 急性型： 体温升高达44，嗜眠，昏睡 呼吸系统症状：鸡冠、肉髯发绀，呼吸紊乱，咳嗽、罗音、喘气、呼吸困难，嗉囊、口积液 消化系统症状：常见严重下痢、淡绿色甚至血染稀便。甩头发出咯咯声，常从口腔内流出灰黄色恶臭粘液。 神经系统症状：少数幸存者后期见神经症状，阵发性痉挛，角弓反张，肌肉震颤，翅腿麻痹，死亡率达90-100%。,亚急性或慢性：以神经症状为明显，反复发作，尤以受惊时更为明显。 非典型性新城疫：含母源抗体的（或抗体在高峰时接种疫苗）雏鸡群仍可发生ND，但两率均要低，以呼吸系统和神经系统症状为主，特别常见斜颈; 有免疫力的产蛋鸡，可出现产蛋下降，无色壳蛋、畸型蛋。 新城疫主要症状回顾,呼吸困难，张口呼吸，咳嗽，发出呼噜声,速发嗜内脏型：患鸡嗉囊积液，高度膨胀,口内流出酸臭液体,腹泻，黄绿色粪便,腿 麻 痹,脚麻痹，以趾部着地,有时可见神经麻痹、瘫痪,未受刺激时较为正常，一旦受到惊吓，便出现头颈扭曲,眼睑水肿,鹦鹉：平衡失调，扭颈,平衡失调，扭颈,呈观星姿势：典型症状,呈观星姿势：典型症状,白壳蛋数量增加,产蛋鸡发病时产蛋量 大度下降，软壳蛋,卵巢明显出血，产蛋下降，无法恢复,2、鹅新城疫： 一年四季均可发生，发病率在40-80，死亡率在30-100。 不同的鹅种和不同日龄的鹅均易感。 症状不明显，主要表现为排绿色粪便，产蛋量下降，畸形蛋增多。 剖检见肠粘膜出现弥漫性溃疡，以十二直肠和直肠居多，腺胃和肌胃出血等。 3、鸭： 已经从鸭体内检测出新城疫病毒，但还没有在自然条件下爆发流行鸭新城疫的报道。,4、其它禽类新城疫： 鸽子：俗称鸽瘟，主要以腹泻和脊髓炎为主，新疫区发病率高（100%），死亡率高（80%以上）。老疫区散发。 火鸡、珠鸡和鸵鸟：感染后症状一般与鸡相同。,四、病 理 变 化,1. 典型型: 全身粘膜、浆膜出血（心冠、卵泡脂肪） 腺胃乳头，肌胃角质层下出血 肠粘膜（十二指肠、小肠、空肠）出血，肠粘膜水肿，纤维素性坏死，溃疡 盲肠扁桃体肿胀出血坏死 肺瘀血，水肿。,腺胃乳头出血是本病的特征性病变,速发嗜内脏型：患鸡腺胃乳头出血,腺胃肌胃出血，肠道集腺处出血肿胀,腺胃肌胃出血，肠道集腺处出血肿胀,肠道淋巴集结出血、坏死,肠道淋巴集结出血、坏死,盲肠扁桃体出血、溃疡及坏死,肠道粘膜的广泛性出血，由于病毒在肠壁细胞中的复制而引起了坏死。,肠道广泛性出血，肠道淋巴集结出血坏死,直肠黏膜条状出血或点状出血,四、病 理 变 化,2.其它型： 主要病变见于呼吸道； 粘膜出血、水肿，有卡他性或浆液性渗出物 幼禽常见气囊炎，气囊膜增厚，内有卡他性或干酪样渗出物。,Pulmonary congestion （充血） and edema （水肿）,在高毒力和低毒力毒株感染中，均可见呼吸道症状，主要是呼吸道里的粘液,气管黏膜充血、出血,五、诊 断,流行病学、症状、病理变化可初步诊断，确诊实验室诊断。常用实验室诊断方法主要有 1. 病毒的分离鉴定：应着重毒力测定。 2. HA、HI试验。 3. 中和试验：使恢复期血清和已知NDV混合，使病毒感染能力被中和，可用鸡，鸡胚，细胞（蚀斑法）等具有感受性的宿主来进行。,HA（非特异）、HI（特异性）试验,4. ELISA:非常敏感，改用微量法后引起了很多研究者兴趣。 5. PCR：快速、敏感、特异、可区分强弱毒。,NDV强弱毒的PCR鉴定： 原理：F蛋白裂解位点(112位-117位)氨基酸的组成和排列顺序不同可以区分强、弱毒株。 鉴定PCR：设计了区别强、弱毒株的两组引物，强、弱毒株分别能扩增出442、671 bp的特异性片段和252、671 bp的通用片段。 RT-PCR + RFLP：通用引物的RT-PCR方法可以从组织或粪便中直接检测到病毒（强毒或者弱毒），然后可以利用PCR产物的酶切分析（Pst/Bbe）（利用F基因的蛋白裂解位点的差异）对野毒株和疫苗进行鉴别。,荧光定量PCR鉴定NDV强弱毒株,单克隆抗体的研制为区分毒株的微小抗原差异提供了重要工具。,5、鉴别诊断： 须与传染性支气管炎、喉气管炎、禽流感、鼻炎、支原体病等呼吸系统症状病区别，还须与禽脑脊髓炎、马立克氏病、禽霍乱、及某些中毒病相区别。,六、防 制,1、常规饲养管理措施 2、免疫接种 3、市场和屠宰场检疫，禁止带毒鸡和污染肉品的转运。 4、疫情控制,2、免疫接种,免疫接种是预防新城疫发生的关键 常用疫苗有弱毒活苗（抗体HI滴度可达到29） 灭活油乳剂苗（抗体HI滴度可达到212） 抗体滴度超过213可能感染了野毒 应根据母源抗体水平和当地疫情合理安排免疫程序。,合理做好预防接种工作，增强鸡群的特异免疫力。 (1)弄清疫苗的性质、使用对象及方法： 中等毒力疫苗（I系苗或称Mukteswar株)、弱毒苗（系苗或称HB1株、III系苗或称F株、IV系苗或称LaSota株和V4弱毒苗）。 中等毒力的疫苗(I 系)： 免疫产生快，免疫持续时间长，保护力强。 主要应用于有基础免疫的鸡群作加强免疫。 慎用I 系。, 弱毒疫苗：包括系（B1株）、系（株）、IV系（Lasota株）、V4和克隆株等。 系和III系疫苗 安全，特别适用雏鸡免疫，免疫期短。 本疫苗可用滴鼻、点眼、饮水、气雾等方法免疫。 免疫原性较差。 IV系疫苗(Lasota株，克隆株常用Clone 30) 毒力较强，免疫原性好，可突破母源抗体，抗体效价高 目前世界各国广泛应用于雏鸡免疫。 通常采用滴鼻点眼、饮水、气雾方式免疫。,V4（耐高温株） 具有良好的安全性、免疫原性和耐热性，可常温保存。 V4苗可以通过饮水、滴鼻、肌肉注射等方式免疫。 V4苗还具有自然传播性，产生的血清抗体较高，具备抵抗强毒攻击的能力，是防制ND的理想弱毒株。 目前在国外广泛应用，国内应用相对较少。,（2）接种途径 点眼或滴鼻：适用于活疫苗，如II系、IV系和克隆株的免疫。 肌肉接种：适用于系苗和灭活苗。 饮水法：用于活疫苗，进行二次免疫和产蛋阶段的增强免疫。 气雾法：用于活疫苗，适用于大群蛋鸡的二次免疫和暴发ND时的紧急接种。 接种途径回顾, ,(3) 母源抗体对免疫应答的影响 母鸡经过新城疫疫苗接种后,可将其抗体通过卵黄传递给雏鸡,具有母源抗体的雏鸡既有一定的免疫力,又对疫苗接种有干扰作用。 对灭活苗干扰较小；对于弱毒苗激发的粘膜免疫无影响,（4）免 疫 程 序,免疫程序的制定原则：疫苗接种先弱后强、提倡1日龄局部免疫及活死苗联用、保持鸡群整齐较高的抗体滴度、使用联苗。无现成程序可用，须结合本场特点。 确定首免日龄：首免日龄4.5（1日龄HI滴度-4）5。0.5%采样测HI均值，平均监测HI1:16，就应免疫。 发病老场：1-7日龄即以弱毒苗进行局部免疫同时进行灭活苗注射接种（原因） 第二次免疫距第一次免疫7-10天。,（5）免疫注意事项,免疫抑制 饲养管理（营养） 谨慎用抗菌药（氯霉素、磺胺） 疫苗干扰 疫苗质量 接种操作,商品肉鸡新城疫免疫程序（参考）,蛋鸡新城疫免疫程序（参考）：,300日龄检测HI滴度，若不齐，则饮水或气雾免疫。,土鸡的ND免疫程序（参考）,4、疫情控制 一旦发生本病，应封锁鸡场、紧急消毒、分群隔离。 通常分为2-3群，即发病鸡群、可疑群、假定健康群。 立即用疫苗进行紧急接种，接种顺序是假定健康群可疑群发病鸡群。 油乳剂灭活苗，大鸡0.75ml，小鸡0.5ml；IV系苗，点眼滴鼻，大鸡4-5头份，小鸡2-3头份；I系（注意）大鸡肌注1.5头份，小鸡肌注1头份或者气雾免疫。,病鸡和死鸡就地化制或高温处理。被污染的羽毛、垫草、粪便应深埋或烧毁 最后一个病例处理后两周，并通过严格的终末消毒后，方可解除封锁。,本病无特效疗法，鸡群一旦发病，应立即用La系、克隆30或V4点眼或饮水，两月龄以上鸡群也可用系紧急接种（注意：紧急接种可能会引起处于潜伏期的病鸡死亡，用其他的弱毒苗会使死亡期拉长，后果是一样的，需要跟场主说明）。 同时配合使用抗菌素和多种维生素，以预防细菌继发染，促进机体恢复。,鸡新城疫爆发的控制,讨论：我国鸡新城疫难以控制的原因,1、鸡场生物安全措施不力 鸡群过分密集、半开放式饲养、不同年龄鸡群同场饲养等。 2、母源抗体的影响 母源抗体可抑制相应的弱毒株在幼雏体内复制，从而影响弱毒疫苗的免疫。,我国鸡新城疫难以控制的原因,3、多数鸡群存在着不同程度的免疫抑制性病毒的多重感染。 4、在鹅鸭等水禽中出现了致病性强的NDV。 5、 NDV致病性、抗原型、基因型等出现了变化。 6、疫苗的种类、剂量、质量及使用方法不当等。 7、免疫程序不合理。,非 典 型 ND,主要