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动物细胞工程,知识回顾 植物细胞工程,什么是细胞工程? 植物细胞工程依据的原理是什么? 植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 请简述植物体细胞杂交的过程,杂种植株,融合的原生质体AB,再生壁,脱分化,愈伤组织,再分化,植物细胞的融合,植物组织培养,植物细胞A,植物细胞B,原生质体B,原生质体A,杂种细胞AB,去 壁,去 壁,人 工 诱 导,植物体细胞杂交过程,动物细胞工程常用的技术手段,动物细胞培养,动物 细胞核移植,动物细胞融合,生产 单克隆抗体,基础,一、动物细胞培养,为什么研究动物细胞培养技术 皮肤大面积烧伤的病人如何治疗 大家是否知道”鼠背耳朵”,一、动物细胞培养,1.概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它 成单个细胞,然后放在 中,让这些细胞,分散,适宜的培养基,生长和增殖,请大家阅读P44P45,一、动物细胞培养,成块的组织中,细胞排列紧密,彼此限制生长,如何将他们分开? “适宜的培养液”为了满足培养过程中细胞生命活动的需要,应根据何原则配置培养基?,?,?,组织块,剪碎,胰蛋白酶或 胶原蛋白酶,单个 细胞,与体内所需营养物质基本相同,2.动物细胞培养的过程,请补充完下列过程,取动物组织块,在培养液中培养,剪碎组织,胰蛋白酶或胶原蛋 白酶处理分散成单 个细胞, , ,制成细胞悬液,一、动物细胞培养,贴壁 生长,培养瓶或培养皿的内 表面光滑、无毒、易 于贴附,每个培养瓶 中只能培养 少量细胞,如何培养大量细胞,?思考,细胞的 接触抑制,是否需要振荡 培养?,原代培养,传代培养,酶处理,制成细胞悬液,一、动物细胞培养,传代培养中可能会发生的情况: 传代培养的细胞一般传至10代后不易传下去 10-50代左右时,增殖逐渐缓慢,以至于完全停止,部分细胞癌变,使用或冷冻保存10代以内的细胞,一、动物细胞培养,3.细胞培养的条件,条件,无菌无毒的环境 营养 温度和PH 气体环境,如何保持无菌无毒的环境? 培养液中需要包含哪些营养物质? 温度和PH一般分别为多少? 细胞培养需要什么气体? 分别有什么作用? 如何保证气体的充足?,阅读P46 回答问题,一、动物细胞培养,3.细胞培养的条件,条件,无菌无毒的环境 营养 温度和PH 气体环境,培养液培养器械无菌处理 培养液中加一定量的抗生素 定期更换培养液,合成培养基,与体内环境相似 36.50.5 PH=7.2-7.4,将培养皿或松盖培养瓶置于 含95%空气加5%CO2混合气 体的培养箱中,大规模生产生物制品 为基因工程提供受体细胞 培养动物细胞用于有毒物质的检测 用于生理、病理、药理方面的研究,一、动物细胞培养,4.动物细胞培养技术的应用,总结本节知识框架,动物细胞培养,概念 过程 条件 应用,名词,细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 合成培养基,作业,1.比较
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