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博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏,1,细胞克隆形成率实验,黄波,南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心,博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏,2,目的,1.了解辐射对细胞增殖的影响 2.掌握细胞培养的基本技术 3.掌握辐照细胞的方法,细胞克隆技术,博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏,3,步骤,1.取对数生长期的细胞,用PBS洗干净后胰酶消化,离心。 2.采用血球计数板计数细胞 按一定细胞数量(照射0、0.5、1Gy组接种300个/皿,照射2Gy接种600个/皿,照射4Gy组接种2103个/皿,照射8Gy组接种1104)接种于60 mm培养皿,每个剂量组3个皿 照射不同剂量的60Co 射线,博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏,4,细胞贴壁后分别用60Co 射线照射,置于37 CO2孵箱培养10天; PBS洗2次,75乙醇固定3060min; 自然晾干后Giemsa染色1h左右,计数细胞克隆数(计数50个细胞的单克隆); 计算出细胞存活率,实验重复3次。,博学之,审问之
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