肺结核痰涂片检查工作规范.doc

肺结核痰涂片检查工作规范 - 痰涂片检查是肺结核病人诊断与鉴别诊断、制定化疗方案、疗效考核的主要方法或手段。为贯彻落实市卫生局关于在全市一级以上医疗单位中开展传染性肺结核筛查工作的通知的精神，加强传染性肺结核病人发现力度，特制定本规范。 一、痰检的对象和要求 （一）对象 1咳嗽、咳痰3周或有咯血或血痰症状以及胸片异常者。 2进行疗效考核的病人：凡已确诊、登记、治疗的肺结核病人，在化疗期间应按规定定期作痰菌复查。 1）初治涂阳病人（含重症涂阴病人）在疗程满2、5、6个月时，复治涂阳病人在疗程满2、5、8个月时，各查痰一次。 2）初、复治涂阳病人在疗程满2个月时，痰菌仍为阳性者，应在治疗满 3个月时增加查痰一次。 3）确诊、登记的涂阴肺结核病人，即使病人因故未接受治疗，也应在登记后满2和6个月时进行痰菌检查。（二）要求 1初诊病人应送3份痰标本（夜间痰、清晨痰和即时痰）。如无夜间痰，在留清晨痰后23小时再留取一份痰标本；或在送痰时，留取两份即时痰。治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份痰（清晨痰和夜间痰）。 2痰标本采集：即时痰为病人就诊时咳出的痰液。清晨痰为清晨深咳出的痰液。夜间痰为就诊前一天晚睡前咳出的痰液。痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本，痰量应为35毫升。 应由检验人员或专人验收痰标本，痰液不合格者，要求重新送检。难以获得合格标本时，也应进行细菌学检查，但应注明标本性状以供分析结果时参考。 痰标本的容器，应采用国家参比实验室推荐的国际通用痰瓶或采用直径4厘米、高2厘米的塑料或涂蜡纸密闭盒。留痰容器上应注明病人姓名、编号 （门诊序号或病人登记号）及日期。 3痰标本的保存和输送：痰标本容器密封，勿倒置，严防痰液外溢。不能立即作涂片检查的痰标本，须置4冰箱保存，防止痰液干涸或污染。 需送上一级细菌实验室培养的痰标本，外送前应认真核对痰标本容器上标 注，是否正确和清晰，是否与化验单一致。痰容器应采用专用的结核杆菌和痰标本冰盒运送，或以纸张和塑料袋封装、扎牢顺序放置于包装袋内。盒外注明勿倒置标志。 4送检时，县（市、区）结防所（科）医师应填写检验单。填写项目包括：病人姓名、地址、登记号（或门诊序号）、送检日期（或初诊日期）、送检原因（初诊病人或随访病人）。检验单应与痰标本分别放置在不同容器中，一齐送交上级实验室。 5收到痰标本后，实验室检验人员仔细核对标本和检验单各项内容，查看痰标本是否合格。随后按顺序编号，及时检查和登记。 6废弃标本和污染物的处理： 1）痰盒和废弃标本等污染物，均须经高压蒸汽灭菌后才能丢弃或清洗，严禁不经灭菌随意处理。 2）痰盒等污染物如采用焚烧处理，须置于焚烧炉内彻底焚化。焚化不彻底，或暴露焚烧是有害的。 3）痰检工作台面的消毒：可将痰标本置于一搪瓷盘中，在操作厨中进行痰涂片操作。涂片操作完成后，将盘与废弃物等一并进行高压蒸汽灭菌，或与操作台面同时以3石碳酸或其它可靠的消毒液擦拭后，再以紫外线灭菌灯 （距离1米）照射30分钟。二、痰直接涂片检查法 （一）涂片 取经95乙醇擦拭脱脂过的干燥、清洁、无油污、无划痕的新玻璃片，于玻片背面的左端13处以蓝色或黑色记号笔（玻璃铅笔）编号。 用接种环或折断的竹签茬端，挑取痰标本的脓样、干酪样部分约005 01ml，于玻片正面的右侧三分之二处均匀涂抹成225厘米卵圆形痰膜。自然干燥后待检。一张玻片只可涂抹一份标本。玻片只应使用一次，不得清洗后再次使用。 （二）萋尔尼尔逊氏染色法（ZiehlNeelsen） 简称萋尼氏染色法： 1试剂： 1）碱性复红乙醇染色储存液： 碱性复红液：8克碱性复红溶于95乙醇100毫升中。 5石碳酸水溶液：5克石碳酸溶于100毫升蒸馏水中。 2）碱性复红乙醇染色液： 10毫升碱性复红储存液与90毫升5石碳酸水溶液混合。 3）5盐酸乙醇脱色液： 5毫升浓盐酸与95毫升95乙醇混合。 4）0。3亚甲兰复染储存液： 03克亚甲兰溶于50毫升95乙醇中，完全溶解后加蒸馏水至终体积100毫升。 5）亚甲兰复染液： 以蒸馏水10倍稀释03亚甲兰复染储存液即得亚甲兰复染液。 2染色步骤： 1）火焰固定涂片。 2）滴加碱性复红乙醇染色液，盖满痰膜。小心火焰加热至出现蒸汽后，脱离火焰，保持染色三分钟。染色期间应始终保持痰膜被染色液覆盖，必要时可续加染色液。切勿使染色液沸腾。 3）流水自玻片背面上端轻洗，洗清染色液。 4）自痰膜上端外缘滴加脱色液，流过痰膜。需脱至痰膜无可视红色为止。脱色应单片进行。 5）流水自玻片背面上端轻洗，去脱色液。 6）滴加亚甲兰复染液，染色30秒钟。 7）流水自玻片背面上端轻洗，去复染液。 8）待干后镜检。 3镜检与报告： 光学显微镜镜检(目镜lOX，油镜IOOX)染色痰片。在淡蓝色背景下，抗酸杆菌呈红色，其它细菌和细胞呈蓝色。 按照下列标准报告所得结果： 1）抗酸杆菌阴性：连续观察300个不同视野，未发现抗酸杆菌。 2）抗酸杆菌可疑(土)：12条抗酸杆菌300个视野。 3）抗酸杆菌阳性(1+)：39条抗酸杆菌100个视野。 4）抗酸杆菌阳性(2+)：l9条抗酸杆菌10个视野。 5）抗酸杆菌阳性(3+)：l9条抗酸杆菌每个视野。 6）抗酸杆菌阳性(4+)：10条抗酸杆菌每个视野。 镜检结果，应及时记录在“结核病细菌学实验室登记本“和化验报告单上。痰涂片化验单应包括痰标本的性状。阴性结果应填记“阴性”不得以“（）”表达。300个视野内仅见12条抗酸杆菌者，应在报告单上注明条数，医生可结合胸片进行判断。必要时再取