核移植和动物克隆ppt课件

动物细胞与组织培养, 动物细胞融合, 单克隆抗体制备, 细胞核移植和体细胞克隆,动物细胞工程,高产奶牛的获得,胚胎核移植和体细胞克隆,1、定义： 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.,3、分类： 胚胎核移植、体细胞核移植。,胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易。,动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难,2、原理： 动物细胞核具有全能性,1.动物细胞克隆的关键技术是?,2.动物细胞克隆的原理是?,另一头绵羊的子宫,特别注意：克隆动物性状与供体动物完全一样吗？,不可能！因为： 一、供体动物只提供细胞核，而细胞质中的遗传物质（如线粒体DNA）来自于受体卵细胞. 二、生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境的影响。,供体,受体,代孕 受体,细胞培养,1、写出ab所代表细胞工程名称：a表示： b表示:,2、实施细胞工程时，所需受体细胞大多采用卵细胞的原因：,体积大，易操作。含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。,3、多利面部毛色是： 根据遗传学原理说明判断依据。,4、若黑面绵羊的基因型为AA,白面绵羊的基因型为aa，则克隆羊的基因型为,核移植,胚胎移植,白色,多利全部的核基因都来自白面绵羊,aa,前景,1、加快家畜遗传改良进程 2、保护频危物种 3、器官移植 4、利用生物反应器生产生物蛋白,意义,在克隆动物种间杂繁殖障碍,创造新物种等 方面有科学意义和潜在的经济价值.,存在问题,成功率低 存在健康问题 克隆人方面存在伦理问题,动物细胞融合,杂合的原生质体,杂种细胞,愈伤组织,杂种植株,植物体细胞杂交过程,1970年，有两位科学家做了一个人鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。那么，如何实现人鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？,1、定义：指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。,一、动物细胞融合,细胞杂交：不同基因型的细胞之间的融合就是细胞杂交。,杂交细胞：融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞成为杂交细胞。,细胞融合是正常的生命活动,两个细胞正在融合,受精作用,请思考试管婴儿是什么回事,动物细胞融合,2、诱导融合的因素 生物法：灭活的病毒诱导融合.( 这是由于病毒能改变细胞膜上磷脂和蛋白质的分布。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。) 化学法：聚乙二醇PEG 物理法：电刺激融合,病毒颗粒黏 附细胞表面,细胞膜连接,细胞膜被 病毒颗粒穿通,细胞融合、形成杂种细胞,3、动物细胞融合技术的应用,细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。 利用杂交瘤技术，制备单克隆抗体。,思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质 分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细 胞发生融合，不灭活的话会感染细胞。,植物细胞杂交与动物细胞融合的比较,细胞膜的流动性细胞的全能性,细胞膜的流动性,纤维素酶、果胶酶,胰蛋白酶,物理方法 （离心、振荡、电激） 化学方法（PEG）,物理、化学方法 灭活的病毒,去除细胞壁后诱导原生质体融合,使细胞分散后诱导细胞融合, 动物细胞与组织培养, 动物细胞融合, 单克隆抗体制备, 细胞核移植和体细胞克隆,动物细胞工程,人们获得抗体的传统方法是? 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体 这种方法的缺点是什么? 效率低，产量有限，纯度低，动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。 能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产生单一类型的抗体呢？ B淋巴细胞在体外不能无限增殖。,单克隆抗体的制备,思考,单克隆抗体的制备极富创造性的方案 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长，又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子，就是单克隆抗体。,问题强化：,1）、本过程利用了哪些原理？,免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理,2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？,这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体,3）、为何要进行两次筛选？,第1次筛选得到杂交瘤细胞（3种,用选择性培养基）。第2次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。,a、作为诊断试剂：在临床生化诊断、病理组织定位、体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比,具有准确、高效、简易、快速特点.,2、单克隆抗体的优点： 特异性强，灵敏度高，可大量制备。,3、单克隆抗体的应用,b、用于治疗疾病和运载药物： 主要用于癌症治疗。 生物导弹：抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学药物或细胞毒素。（单克隆抗体，准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。原理：抗原与抗体的特异性结合）,1、动物细胞工程技术的基础是：（ ） A动物细胞融合 B胚胎移植 C动物细胞培养 D核移植,课堂练习,、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ） A结果是相同的 B杂种细胞的形成过程基本相同 C操作过程中酶的作用相同 D诱导融合的手段相同,3.在用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时， 将抗原注射到小鼠体内，不能获得（ ） AT淋巴细胞 B效应B淋巴细胞 C抗体 D记忆细胞 4.下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，不正确的AB淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导 B融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体 C体外培养时，一个B淋巴细胞可以产生一种抗体，但 不能无限增殖 D单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高优越性明显,A,B,5、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A B C D,C,6.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案,3、图中B为_过程，常用_作为诱导剂，该细胞继承_的遗传特性，既能_,又能_。,1、该实验方案的目的是_,2、A是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生_,4、C过程指细胞培养，该过程包括_培养和_培养两个阶段，其中_代以内的的细胞属于细胞株。,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,原代,传代,50,具有一定的流动性,(2)单克隆抗体的准确定义应为 ( ) A一类特殊抗体 B无性繁殖系 C单一抗体细胞的无性繁殖产生的抗体 D单一抗体细胞的有性繁殖系产生的抗体 (3)杂交瘤细胞繁殖进行的是_分裂，其遗传性状_。 (4)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”这是利用了 _ 。,有丝,不变,C,抗