三点测交实验报告成品.doc

遗传学实验报告 遗传学实验报告 题目：三点测交 班级：历生本 组员：董轲 201023130107 孙菲 201023130110 任晴 201023130119 实验时间： 2012年11月3日 教师签字： 目录实验目的-3实验原理-3实验材料及用品-4实验步骤-5注意事项-5实验结果-6实验分析-7实验目的： 1.掌握三点测交的原理及方法。 2.学习三点测交的数据统计处理及分析方法。 3.了解绘制遗传学图的原理和方法。实验原理： 连锁交换定律：处在同一染色体上的两个或两个以上基因遗传时，联合在一起的频率大于重新组合的频率。重组类型的产生是由于配子形成过程中，同源染色体的非姊妹染色单体间发生了局部交换的结果。 三点测交：三点测交就是通过一次杂交和一次测交，同时确定三对等位基因（即三个基因位点）的排列顺序和它们之间的遗传距离，是基因定位的常用方法。主要过程是：用三显性纯合体和三隐性纯合个体杂交，获得三基因杂合体（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。 现用野生型18号果蝇与突变型6号果蝇杂交，6号作母本，18号作父本。由于小翅(miniature)、白眼(white)、焦刚毛(singed)，由位于X染色体上的三个隐性基因m，w和sn3决定。故得到的F1代中雌果蝇性状均为长翅、红眼和直刚毛，而雄果蝇性状均为小翅、白眼和焦刚毛。F1代中雌果蝇为三杂合体，雄果蝇为隐形纯合体。F1代雌雄果蝇自交，在产生配子的过程中，雌果蝇的两条X染色体发生交叉互换，可以产生8种配子，由于各基因间的距离不一样，产生的8中配子数目不等，而雄果蝇只产生2种配子，且无论哪种配子与雌果蝇产生的配子结合，后代的性状均与雌配子的基因型相吻合。通过对F3代果蝇性状的观察和计数可以推知三个基因间的距离。 如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换，那么预期的双交换频率应当等于两个单交换频率的乘积，但实际上观察到的双交换值往往低于预期值，因为每发生一次单交换，对它邻近位置也发生交换的机会产生影响，这叫干涉。一般用并发率表示干涉的大小。实验材料及用品：黑腹果蝇品系：野生型18号果蝇（+） 突变型6号果蝇（w sn3 m) 仪器：恒温培养箱、显微镜、解剖镜、培养瓶、棉花塞、麻醉瓶、毛笔或解剖针、洁净的白瓷板。试剂：乙醚等实验步骤：1.11月4日21:00将6号种蝇瓶中的成蝇全部杀死。2.11月5日7:00选择处女蝇3只， 15:00选择处女蝇2只。3.11月5日15:00交配6号18号。4.11月12日放亲本。5.11月15日21:00 F1自交（1号瓶）， 16日19:00 F1自交（2号瓶）， 17日11:00 F1自交（3号瓶）。6.11月23日16:30 1号瓶、2号瓶放亲本。 24日20:00 3号瓶放亲本。7.11月26日出现F2代成蝇，观察并计数。注意事项：1.亲代杂交时母本要选6号，父本选18号，否则F1代杂交时还需要选择处女蝇，给实验带来不必要的麻烦。2.亲代杂交时要选择处女蝇，F1自交时不需要处女蝇，选择处女蝇时要严格控制时间。3.在培养瓶内出现蛹时（下一代果蝇羽化之前），一定要将亲本除去，否则混入下一代中，影响计数。4.在选择果蝇进行杂交时，要将新培养瓶横放，将果蝇放到瓶壁上，等果蝇苏醒后，再将培养瓶竖立，以防止果蝇粘在培养基上，影响交配。5.在选择杂交果蝇时，要轻度麻醉，以确保果蝇可以苏醒，不影响交配；在观察F2代性状并计数时，要重度麻醉，以免在观察计数过程中果蝇苏醒，影响计数。6.F2代的计数时间不要超过13天，确保所计数的果蝇中没有F3代。实验结果：F2代性状观察表瓶号1号瓶2号瓶3号瓶日期11/2611/2711/2912/112/312/411/2611/2711/2811/2912/111/2611/2711/2912/112/3+118610191131318100292810863999123159131451414221313wsn3m11041018410043112181552151215934656661613101+m00012102000022110102200241126201wsn3+04101011200203020423341112023631+sn3m03124030010103001010110221031133w+22203020224452132011202531300222+sn3+00000000000000000000000000000000w+m00000000000000000001000100000000实验分析：1.F2 观察结果记录表：测交后代表型观察数 表型间是否重组w-sn3w-msn3-m+ + +366-w sn3 m237-+ + m36-+w sn3 + 53-+ sn3 m38+-w + + 60+-+ sn3 + 0+-+w + m2+-+合计重组值（%）79310012.618723.59111.4根据表中的重组值可以绘出遗传学图：12.611.4 M sn3 W24 m 、sn3 、W在X染色体上的相对位置由图可知m 、sn3、W在X染色体上的相对位置和它们之间的图距。2.计算并发率和干涉： 如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换。那么预期的双交换频率应等于两个单交换频率的乘积。但实际上观察到的双交换频率往往低于预期值。因为每发生一次单交换，它邻近也发生一次交换的机会就减少一些，这叫做干涉。