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搞好基层医院细菌室工作的体会 摘 要 针对当前基层医院细菌室检验工作中存在的一些问题,从搞好细菌质控、提高工作人员业务素质水平、建立正确的药敏试验方法和加强与临床联系这4个方面来阐述解决问题的方法和途径。关键词 细菌检验;基层医院;解决问题我国绝大部分基层医院的细菌室长期存在着工作内容单一、报告结果缓慢、抗生素试验落后及测试品种狭窄、设备简陋、自动化程度低下、经济亏损等现象。如何来改变这种处境呢?我们认为,除了取得医院各级领导的重视和支持外,更重要的是靠科室自身的改革与建设,在不断完善中取得临床上的信任和依赖。现就本人及同事们多年的工作经验来谈一谈搞好此项工作的体会。1 搞好细菌室的质量控制工作临床细菌室的质控工作是实验室自身建设的重要组成部分,它包括室间质量控制和室内质量控制两个方面 ,其中室内质量控制是核心,是提高检验质量和技术水平的基础性工作,也是做好室间质评的前提。细菌室的室内质量控制主要应该从以下几个方面着手。1.1 实验前质量控制 实验前质控是所有室内质控之根本,主要包括标本的采集、运送和采集的方法及时间,临床细菌室应制定标本采集指南,以便于患者和医生实施。1.2 标本接种培养前的质量控制 标本接种培养前必须首先检查是否合格,不合格的标本应要求临床重新采集后送检。1.3 分离培养的质量控制 实验室应建立细菌标本随时接种制度,尤其是某些特殊菌的分离,否则将严重影响分离率。1.4 培养基等常用试剂的质量控制 各种培养基(自配或成品)在使用之前都要抽样进行无菌试验和支持生长试验;对选择培养基(如培养肠道致病菌的SS琼脂)还应进行选择和抑制生长试验,即应至少分别选1株可生长、1株被抑制菌进行接种培养,可生长菌应生长良好,被抑制菌应不能生长;对生化反应所用的培养基、试剂和试纸至少应分别选阳性和阴性反应菌株各1株进行试验,以证实应有的生化反应。测定代谢产物的试剂,要防止细菌污染。触酶、氧化酶、凝固酶在开瓶时以及使用中,每天至少要分别用一阳性和阴性菌测试1次。杆菌肽、Optochin、ONPG、XV纸片(条)在开瓶时以及使用中,每周至少要分别用一阳性和阴性菌测试1次(XV纸片仅做阳性菌)。用于分枝杆菌鉴定的试剂在开瓶或配制以及每次使用时,均要做阳性菌对照(铁的摄取试验还要做阴性对照)。抗血清在开瓶时和使用中每月需分别用阳性和阴性菌做1次测试。其他试剂和纸片仅在开瓶或配制时,做1次阴性、阳性反应测试即可。1.5 常用仪器的质量控制 实验室内的各种仪器设备的运行情况,应每天进行监测,每一仪器均要有专人维护保养,仪器上要附有运行记录卡,每天由维护保养人记录温度等指标的变化情况。一旦发现问题,立即进行维修。2 提高工作人员的业务素质水平2.1 加强基础理论知识的学习 了解人体的正常菌群是细菌检验的必要知识,要知道正常菌群的概念、分布和种类、条件致病菌与内源性感染、菌群失调症与二重感染的概念、诱因与防治原则等。对一些常见菌尤其是肠杆菌科的各种细菌的形态结构、培养和生化特性以及检验程序要牢记在心。及时了解国内外有关临床微生物检验的信息与动向,不断充实、更新知识,使自己在工作中得心应手、少走弯路,选择快捷检验程序和合适试验方法,并能对结果进行综合分析判断,给临床提供快速、准速的病原学诊断。2.2 提高正规技术操作的水平 为了从临床标本中分离出病原菌并进行准确鉴定,除选择好合适的培养基外,还要根据待检标本的来源、培养目的及所使用培养基的性状,采用不同的接种方法。比如痰等含杂菌量较多的标本,应采用平板分区划线分离法:先将标本均匀涂布于平板表面边缘一小区(第一区)内,约占平板15面积,再在二、三、区依次连续划线。在此过程中要使划线尽可能细并且不重复。每划完一个区,均将接种环灭菌一次。每一区的划线均接触上一区的接种线1次2次,使菌量逐渐减少,以获得单个菌落。鉴定一种细菌,尽可能用一个菌落做全部鉴定试验。如果一个菌落不够,应考虑采用纯培养,即挑取单个菌落接种于斜面培养基,经过培养即可获得大量纯培养物。这一点我觉得特别重要,因为在我们实际工作中,就有许多同志由于采用了不恰当的接种与分离技术或者操作技术不到位而使试验过程拖长乃至整个实验失败或错误的教训。2.3 提供进一步深造学习的机会 大医院和上级医院在各个方面毕竟有它们的优势和学习借鉴之处,所以有条件的基层医院,要经常轮换派送工作人员到这些医院去进修学习,以开拓视野、增长见识、提高水平。3 建立正确的抗生素敏感性试验(antimicrobial susceptibility test,AST)方法3.1 药敏质控方法 药敏纸片首先要用卫生部临床检验中心提供的质控标准菌株(常规有3种:金黄色葡萄球菌ATC 25923、大场埃希菌ATC 25922、铜绿假单胞菌ATC 27853)来进行标定,并随临床标本来测定对各抗生素的抑菌环,在不失控的条件下,每周监测2次,一旦失控,必须每天测定。3.2 药敏试验常规抗生素的选择 选择何种药物作为试验用药应由感染科医生、药剂师和感染控制委员会议决定。选择原则应考虑到药物临床疗效、耐药菌株流行情况、预防耐药菌株产生和经济等综合因素,最终目的是达到控制感染病。根据NCCLS(National committee for clinical laboratory standars,NCCLS),非苛养菌(肠杆菌科、铜绿假单胞菌和其他非肠杆菌科、葡萄球菌属、肠球菌属)和苛养菌(嗜血杆菌属、淋病奈瑟氏菌、肺炎链球菌和其他连球菌)有各自常规药敏试验标准,在此不再赘述。但要关注多重耐药机制对细菌耐药性的影响,及时更新知识,紧跟国际标准(NCCLS每年修订的标准),对推荐的参考方法要参照执行。3.3 药敏结果的审核 在填报药敏结果时一定要注意对耐甲氧西林葡萄球菌(methecillin resistant Staphylococcus,MRS)和产超广谱内酰胺酶(ESBLs)的克雷伯菌属及大肠埃希菌等肠杆菌科细菌的药敏报告方法,即不管体外药敏结果如何,对MRS都应报告该菌株耐所有青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类、内酰胺类和内酰胺或内酰胺酶抑制剂类抗生素,同时绝大多数的MRS对氨基糖苷类、大环内酯类和四环素类抗生素也耐药;对所有产ESBLs的菌株应当报告为耐所有青霉素类、头孢菌素类和氨曲南。4 加强与临床的联系临床感染性疾病涉及很多病原体,没有任何单一的试验能够检出所有潜在病原体。因此,临床信息非常重要,是作为选择试验方法的重要依据。临床医生在开化验单时应告诉实验室人员有关患者的推测性诊断,以便使试验人员能据此选择合理的检验程序和试验方法,并能指导临床正确采集恰当的标本,改变过去那种临床送什么标本、检查哪些项目全都由医生说了算的局面。当实验室开始有结果时,必须及时通知临床医生,推行“三级报告”制度,以便让他们随时评价诊断和治疗方案。另外实验室人员对危重和疑难症患者,需要亲自去进行床边观察,参加病例讨论,接受临床医生就诊治方面的咨询;要参

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