熊胆冻干粉针剂安全性实验报告.doc

熊胆冻干粉针剂安全性实验报告 作者：徐正哲， 金东洙， 陈正爱【关键词】 熊胆冻干粉针剂,；,安全性实验,摘要：目的对熊胆冻干粉针剂进行肌肉刺激性、血管刺激性、全身过敏性及溶血性实验，以评价其用药的安全性。方法在肌肉刺激性实验中，主要观察2只家兔注射熊胆冻干粉针剂后48 h的变化。在血管刺激性实验中，主要观察2只家兔分别连续5 d注射熊胆冻干粉针剂及生理盐水的变化。在全身过敏性实验中，6只豚鼠隔日3次腹腔注射熊胆冻干粉针剂，于首次给药后第14日和21日分别静脉注射熊胆冻干粉针剂，观察15 min内动物的变化。在溶血性实验中，观察本品在4 h内有无溶血和聚集现象。结果熊胆冻干粉针剂对家兔股四头肌无刺激作用，对家兔耳缘静脉无刺激作用，对豚鼠未见过敏反应，家兔无溶血现象。结论熊胆冻干粉针剂的动物实验结果表明其安全可靠。关键词：熊胆冻干粉针剂 ； 安全性实验 The Test Report of the Reliability of Bear Gall Lyophilized Powder for Injection Abstract：ObjectiveTo evaluate the reliability of bear gall lyophilized powder injection by testing the muscle stimulation, vessel stimulation, hypersensitivity of total boby and haemolytic test. MethodsIn the muscle stimulation test, two rabbits were observed at 48h after injection bear gall lyophilized powder; In the vessel stimulation, two rabbits were observed on the 5 d after injection bear gall lyophilized powder or saline, respectively; In hypersensitivity of total boby, 6 cavies were injected by bear gall lyophilized powder in abdominal cavity in 3 times, and the last two were 14d and 21d after first medication; In the haemolytic test, hemolysis and coagulation were mainly observed. Results The bear gall lyophilized powder has no stimulation to muscle and ear vein of rabbit, the rabbits have no allergic reaction as contrast and without hemolytic reaction. ConclusionBear gall lyophilized powder injection is safe and reliable based on the animal experiment.Key words：Bear gall lyophilized powder for Injection; Reliability test 熊胆为熊科动物黑熊或棕熊的干燥胆，气微清香或微腥，味极苦而回甜，具有清热、镇惊、利胆等药理作用。引流熊胆和天然熊胆一样，主要含有胆酸，熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸。熊胆注射剂以引流熊胆为原料而制成的冻干粉针剂，其主要成分是熊去氧胆酸。为探讨熊胆冻干粉针剂的临床用药安全，我们对熊胆冻干粉针剂进行了安全性实验，现将实验内容及结果报道如下。1 药物熊胆冻干粉针剂由延边大学药学院天然药物教研室提供,临用时取本品。2 方法2.1 局部刺激性实验2.1.1 目的本实验主要观察熊胆冻干粉针剂对家兔股四头肌的刺激性反应。2.1.2 动物 日本大耳白家兔，雌雄兼用，体重2.02.5 kg，由延边大学医学院实验动物科提供。2.1.3 方法取健康无损伤的家兔2只，以无菌操作法分别在其左右两腿股四头肌内各注入供试品1.0 ml/只，注射后48 h处死动物，解剖取出股四头肌，纵向切开，观察注射部位局部刺激反应，按表1换算成相应的反应级。2.1.4 结果实验结果表明：两只家兔经肌肉注射后，家兔健康正常，腿部活动正常。家兔处死取出股四头肌后，肉眼观察给药部位，给予熊胆冻干粉针剂的4例股四头肌刺激反应级数各为0级，提示本品对家兔股四头肌无刺激作用。2.2 血管刺激性实验2.2.1 目的 本实验主要观察熊胆冻干粉针剂对家兔血管的刺激性反应。2.2.2 动物 日本大耳白家兔，雌雄兼用，体重2.02.5 kg，由延边大学医学院实验动物科提供。表1 注射肌肉刺激反应评级标准（略）2.2.3 方法 取健康、两耳无损伤的家兔2只。用无菌操作方法于左耳耳缘静脉注射灭菌生理盐水2.3 ml/kg,于右耳耳缘静脉注射熊胆冻干粉针剂的浓缩液2.3 ml/kg，1次/d，连续3 d。于末次注射24 h后将动物放血处死，分别距注射部位进针点2 cm处向心端剪下耳缘约2 cm作为标本，标本用福尔马林固定，常规组织切片，观察血管周围变化、血管壁是否损伤、内皮细胞有无脱落、有无血栓形成以及其他病理变化。2.2.4 结果实验结果表明：家兔左右耳肉眼观察注射部位均无异常，血管无充血，周围组织无水肿现象。病理切片观察结果表明，给予生理盐水的2例耳缘和给予熊胆冻干粉针剂的4例耳缘均未见血管扩张和炎细胞浸润，提示本品对家兔血管无刺激作用。2.3 过敏实验2.3.1 目的 本实验主要观察熊胆冻干粉针剂对豚鼠有无全身过敏性反应。2.3.2 动物 健康无伤豚鼠，雄性，由延边大学医学院实验动物科提供。2.3.3 方法 取健康无伤豚鼠6只，体重250350 g，隔日腹腔注射供试品0.5 ml，连续3次，然后分为2组，每组3只，分别在第1次注射后14 d及21 d静脉注射本品1 ml进行攻击，在注射后15 min内观察动物反应。如有竖毛、呼吸困难、喷嚏、干呕或咳嗽3声等现象中的两种或两种以上者，或有音、抽搐、虚脱或死亡现象之一者为阳性。2.3.4 结果 实验结果表明：熊胆冻干粉针剂于第1次腹腔注射后第14天和第21天进行攻击，均未发生过敏反应。表明在本次实验条件下，熊胆冻干粉针剂对豚鼠无全身性致敏作用。结果见表2。表2 不同时间过敏实验观察结果（略）“-”表示为阴性结果；“+”表示为阳性结果2.4 溶血性实验2.4.1 目的 本实验观察熊胆冻干粉针剂有无溶血性反应。2.4.2 动物 日本大耳白家兔，雄性，体重2.3 kg，由延边大学医学院实验动物科提供。2.4.3 方法取健康家兔1只，从颈总动脉取血约10 ml，放置于200 ml三角瓶中，用玻璃棒搅动血液10 min，除去纤维蛋白原，使成脱纤血液，加约10倍量的生理盐水，摇匀，离心（2 000 r/min，5 min）除去上清液，沉淀的红血球再用生理盐水按如法洗涤23次，至上清液不显红色为止。取沉淀的红细胞1 ml，加生理盐水50 ml，制得2%的兔红细胞混悬液。取试管7支，按表3配比量依次加入2%兔红细胞混悬液和生理盐水，混匀后，置于37恒温水浴箱30 min，然后分别加入不同量的上述药液（第6管为阴性对照管，第7管为阳性对照管），摇匀，置37恒温水浴箱中。开始每隔15 min观察1次，1 h后，观察1次/h，共4次。结果见表3。表3 溶血实验配比量（略）2.4.4 溶血判定标准溶液澄明红色，管底无细胞残留，为全溶血；溶液澄明红色或