地丁草对实验性小鼠急性肝损伤保护作用.doc

地丁草对实验性小鼠急性肝损伤保护作用 作者：韩在刚 袁红艳 郭伟康 王芳 张晓玲 李镐 吕惠子【摘要】 目的探讨地丁草水提取物对四氯化碳引起小鼠急性肝损伤的保护作用。方法60只小鼠随机分为正常组，模型组，地丁草水提取物高剂量组、中剂量组、低剂量组，阳性对照组。地丁草水提取物高、中、低剂量组分别按2.0，1.0，0.5 g/kg灌胃地丁草水提取物；阳性对照组按0.1 g/kg水飞蓟宾灌胃；正常组和模型组给予等体积生理盐水，共5 d。第5天给药1 h后，模型组，地丁草水提取物高、中、低剂量组和阳性对照组按0.15 ml/10 g腹腔注射0.1% CCl4，正常对照组腹腔注射等体积生理盐水。测定小鼠血清天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性和肝组织超氧化歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。结果地丁草水提取物能显著降低CCl4所致小鼠血清ALT(P< 0.01)和AST活性 (P< 0.05)，升高肝组织SOD活性(P< 0.01)，降低肝组织MDA的含量(P< 0.01)。结论地丁草水提取物对 CCl4 所致小鼠急性肝损伤具有保护作用。 【关键词】 地丁草 急性肝损伤 保护作用 地丁草Corydalis bungeana Turcz.为罂粟科一年生草本植物，为中药苦地丁的基源植物,其别名多，因地域不同而不同，有紫花地丁(北京)、苦丁小鸡菜、苦丁茶、地丁紫堇、扁豆根(辽宁、河北)等。本品具有清热解毒、活血消肿的作用，对感冒发热、肝炎等多种炎症有较好疗效1。本实验探讨了地丁草水提物对四氯化碳引起小鼠肝损伤的影响。1 材料与仪器1.1 药品与试剂药材采于吉林省延吉市，由延边大学药学院刘永镇教授鉴定为地丁草Corydalis bungeana Turcz，标本存放于延边大学药学院生药学标本室；水飞蓟宾：西安天一生物技术有限公司。AST， ALT，MDA，SOD试剂盒：南京建成生物工程研究所产品。1.2 仪器紫外分光光度计(上海棱光技术有限公司，S22PC)，全自动离心机(SIGMA公司产品, 5308型), 全自动生物化学分析仪(日本Arkray公司, SP 4430) 等。1.3 动物昆明种雄性小鼠，体重1820 g，由延边大学医学部动物实验中心提供。2 方法2.1 地丁草水提物的制备用水煎煮提取3次，合并滤液，干燥得浸膏，备用。2.2 动物模型的制备与药物处理昆明种小鼠60只，随机分为6组，每组10只：分别为正常对照组，模型组，地丁草高剂量组（2.0 g/kg）、中剂量组（1.0 g/kg）、低剂量组（0.5 g/kg），阳性对照组（水飞蓟宾）。给药组灌胃1次/d，正常对照组和模型组给予等体积（0.50 ml）生理盐水，连续5 d，第5天给药1 h后，除正常对照组外，其余均腹腔注射0.1% CCl4 0.015 mlg-1，禁食20 h，眼球取血，离心取血清；同时剖腹取肝，分别称重取0.1 g，加入1.8 ml生理盐水进行匀浆。2.3 生化指标检测按试剂盒的检测方法测定“2.2”项血清中的ALT和AST活性，肝组织中MDA含量和SOD活性。2.4 统计学分析统计学处理数据以表示，各组样本均数间差别的假设检验用方差分析(ANOVA)，P< 0.05认为有统计学意义。3 结果3.1 地丁草水提物对CCl4所致肝损伤小鼠血清ALT和AST活性的影响模型组ALT，AST活性较正常组明显升高，具有显著性差异（P< 0.001），表明CCl4引起小鼠肝损伤模型成功。地丁草高、中剂量组与模型组比较ALT活性显著降低（P<0.01），AST检测结果也有统计学意义（P<0.05）。结果见表1。表1 地丁草水提取物对CCl4（略）与模型组比较，*P<0.001，*P<0.01，*P<0.05；n=103.2 地丁草水提取物对CCl4引起肝损伤小鼠肝组织SOD活性及MDA含量的影响模型组肝组织SOD活性及MDA含量与正常组相比有显著性差异，地丁草高、中、低剂量组均能与显著升高SOD活性（P< 0.01），同时明显降低给药组小鼠肝组织MDA的含量（P< 0.01）。结果见表2。表2 地丁草水提取物对CCl4所致肝损伤小鼠肝组织SOD活性和MDA含量的影响（略）与模型组比较，*P<0.001，*P<0.01，*P<0.05；n=104 讨论 四氯化碳引起肝损伤是传统的肝毒模型，它对肝损伤的毒性作用是通过脂质过氧化作用进行2。存在于肝细胞质中的可溶性酶ALT，AST在肝细胞损伤后释放入血，血清中两者水平高低可以反应肝细胞损伤程度，可作为早期肝损伤的指标。本实验结果地丁草高、中两个剂量显著降低CCl4 所致小鼠急性肝损伤血清ALT和AST的升高(P< 0.01，P< 0.05)，表明地丁草提取物具有肝保护作用。 SOD是细胞内主要的防御性抗氧化酶，能够清除自由基，并可抑制自由基启动的脂质过氧化反应，从而起到保护细胞膜结构与功能的完整作用。MDA是脂质过氧化的最终产物，可严重破坏细胞膜结构，导致细胞肿胀、坏死，含量高低可反应映氧化的损伤程度3，4。本实验结果表明，地丁草提取物明显提高肝组织SOD活性(P< 0.01)，明显降低急性肝损伤小鼠肝组织MDA含量(P< 0.01)。提示地丁草水提物有良好的肝保护作用。 地丁草具有清热解毒的功效，临床上用于治疗感染性疾病。药效学证实，其水提物对单纯疱疹病毒有抑制作用；体外抑菌试验表明地丁草对甲型链球菌、肺炎球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌等均有抑制作用。本实验显示地丁草水提物具有肝保护作用，这为地丁草的另一种药效提供科学依据。本实验只利用一个模型进行探讨，地丁草的肝保护机制以及药效需进一步深入的研究。【参考文献】 1江苏新医学院.中药大辞典，上册M.上海：上海科学技术出版社，1997：1290.2Weisburger JH.Mechanisms of action of antioxidants as exemplified in vegetables tomato and teaJ.Food Chem