AOAC 991.14 食品中的大肠菌群和大肠杆菌的检测 再水化干膜法 中文版.pdf
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食品中的大肠菌群和大肠杆菌的检测
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17.3.04 AOAC 官方方法官方方法 991.14 食品中的大肠菌群和大肠杆菌的检测食品中的大肠菌群和大肠杆菌的检测 再水化干膜法再水化干膜法 (Petrifilm 大肠菌群测试片和大肠菌群测试片和 Petrifilm 大肠杆菌测试片)大肠杆菌测试片) 首次发布首次发布 1991 最终发布最终发布 1994 方法性能方法性能 方法性能数据见表格 991.14(见下页) 。 A. 原理原理 见 989.10A(见 17.3.03) B. 设备和试剂设备和试剂 见 989.10B(b)-(f) (见 17.3.03) 大肠杆菌测试片和大肠菌群测试片相似,989.10B(b) (见 17.3.03) ,加入了 D溴-4-氯吲哚D葡萄糖苷酶,这是一种用以指示葡萄糖苷酶的试剂,这样就能在同一个测试片上同时得出大肠菌群和大肠杆菌数。Petrifilm 大肠杆菌测试片符合这些规格(生产商为 Medical Surgical Division/3M, 275-W 3M Center,St. Paul, MN 55144) 。 C. 样品制样品制备备 见 966.23B(见 17.2.01)和 986.33C(见17.3.02). D. 分析分析 (a)大肠菌群计数将大肠杆菌测试片和大肠菌群测试片 989.10B(b) (见 17.3.03)置于平坦表面。提起上层膜,将 1mL 样品均液接种于测试片中央。小心将上层膜覆盖在接种面上。对压板(平面朝下)的中心轻轻施压,将样品分布于限定的生长区域内。将测试片静置 1 分钟,以使凝胶固化。将测试片置于 35C 的条件下培养 242小时。 将测试片水平朝上放置于培养器中。每叠不要超过 20 片。在培养结束后及时进行计数。培养结束时,测试片能够在冷冻条件下保存 7 天(-15C) ,但应避免将此作为常规操作。使用标准菌群计数器计数,也可以使用放大镜辅助计数。大肠菌群菌群含有一个或多个气泡(在一个菌落直径之内) 。 在合理计数范围(15-150 个)内计算所有的菌群数。没有气泡的红色菌群不记作大肠菌群。 (b)大肠杆菌计数使用大肠杆菌测试片,并用与(a)相同的方法处理。再多培养 242 小时(总计 484 小时 ) 。大肠杆菌为含有气泡的蓝色菌群,其它非大肠杆菌的大
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