从甘草中提取甘草酸不同提取方法的比较

从甘草中提取甘草酸不同提取方法的比较日期：2008-08-08来源： 作者：字体：大 中 小 从甘草中提取甘草酸不同提取方法的比较摘要几种不同的从甘草中提取甘草酸的提取方法进行了实验比较。结果表明，微波辅助提取法与热回流法、索氏提取法、室温提取法等传统方法相比，具有提取高效、快速、完全及节省时间、溶剂和能耗等优点，是一种适于从甘草中快速提取甘草酸的新方法。甘草是一味重要的中药，系豆科甘草属植物。甘草提取物对医治胃溃疡有较好疗效，此后又发现甘草有抗炎、抗变态、抗溃疡、防治病毒性肝炎及高脂血症、抗癌、抗利尿、抗干扰素诱生剂及增强细胞免疫调节之功效，特别是近年来发现甘草具有防治艾滋病的效果后，引起了药理学家和化学家的极大重视。现代医学研究证明，甘草的主要有效成份是甘草酸及甙元甘草次酸等。 提取中药中的化学成分最常用的方法为溶剂提取法，包括热回流法、索氏提取法、室温提取法以及近年来发展起来的超声波强化提取法等。热回流提取时间长，杂质溶出率高，操作量大。索氏提取法由于保持较高的浓度差，所以提取效率高，浸液杂质少，但提取时间较长，所用溶剂量较大。室温提取法虽不需要加热，但提取时间长，效率较低，尤其是用水作溶剂时易发霉变质。微波辅助提取技术通过调节微波加热的参数，可选择有效加热目标成份，以利于提取与分离，与其它传统方法相比，具有提取高效、快速、完全，节省时间、溶剂和能源等优点。2 实验材料及方法2.1 实验材料植物原料：乌拉尔甘草购自同仁堂医药公司，由实验室加工成三种粒度：甘草切片，直径5-10mm，厚度3-5 mm；甘草粗粉，约2-4mm，用研钵研磨；甘草细粉加工后筛分。实验试剂：无水乙醇、氨水、乙腈、冰醋酸、甘草酸单铵盐标准品。实验用提取溶剂组成经优化均为60%乙醇+1%氨水+水。2.2 提取方法热回流提取法：称取相应粒度的甘草10克，第1次加入溶剂100ml于约80温度下进行回流提取1.5小时，过滤；提取后的残渣加入溶剂80ml进行第二次回流提取1.5小时，过滤；再次将残渣加入溶剂80ml进行第三次回流提取1.5小时，过滤。 索氏提取法：称取相应粒度的甘草10克，加入溶剂200ml在约80下提取5小时或10小时，过滤。 室温提取法：称取相应粒度的甘草3克，加入溶剂30ml，间断2小时手摇，室温(约15)下提取相应时间，过滤。 微波辅助提取法：称取相应粒度的甘草10克，加入溶剂100ml，在经技术改造后的微波辅助提取设备内约80温度下提取相应时间，过滤。 连续3次提取时，第1 次提取4min，过滤，残渣再重复提取2次。 2.3 追加实验 温度影响实验：称取甘草切片10g,加入溶剂100ml,在不同温度下(精密恒温水浴控制温度，误差1)进行回流提取4小时过滤。 微波辅助提取放大实验：取甘草切片60克加溶剂600ml，微波辅助提取相应时间后过滤。 2.4 分析方法 各种滤液经0.5微米针筒式过滤膜过滤后用高效液相色谱法分离测定， 提取液中甘草酸的质量提取率(%)=-100% 提取用甘草的质量 3 结果与讨论 表1为各种提取方法提取结果的比较 表1 热回流提取、微波辅助连续提取三次提取及索氏提取的结果Extraction methodMaterial GA extraction efficiency (,%)First Second Third TotalReflux extraction,tripleABC1.642.352.630.550.390.280.110.050.012.292.792.92MAE,tripleABC2.332.833.050.730.460.340.280.110.043.313.403.43Extraction time(h) 5 10 Soxhlet extraction A 2.01 2.49B 2.18 3.05C 2.27 3.09 3.1 热回流提取法由表1可见，连续回流提取3次，第3次甘草酸提取率较低，继续增加提取次数及提取时间意义不大。很显然原料粒度对提取率有重要的影响。方法评价时均取3次提取率之和。3.2 索氏提取法由表1可以看出，对三种粒度的甘草，Soxhlet提取5小时已达较高的提取率，提取时间延长至10小时时，提取基本完全。该方法提取时间为10小时。3.3 室温提取法由图1可见，随提取时间的加长，提取率逐渐升高，提取至20小时，已基本平衡，继续延长时间，提取率不再升高，故室温提取率以提取20小时为方法评价的标准。3.4 微波辅助提取法图2 的结果表明，提取率随微波辅助提取时间的增加明显提高。1次提取4 min时，提取已基本平衡，继续延长时间，提取率不再升高。与图1相比，微波辅助提取4-5分钟的提取率与室温提取20-24小时的提取率基本一致。特别是对甘草切片，要达到相同的提取率，微波辅助提取可明显节约时间。实验确定微波辅助提取时间以提取4分钟为标准。若加大物料的处理量，达到较高的提取率所需要的时间相应延长，但在25分钟内仍能得到较高 的提取率(图2中曲线)，比较图1与2可知，微波辅助提取确实可实验快速提取的目的，但适用于小批量处理。微波辅助连续3次提取的结果(表1)表明，对于3种粒度的甘草，连续提取均可达到很高的提取率，甘草中甘草酸的提取比较完全。3.5 温度对甘草酸提取率的影响图3的结果表明，甘草酸提取率随提取温度的升高而明显升高。微波辅助提取正是利用微波可快速、选择性加热的特性，强化甘草酸的提取。3.6 方法评价由图4可见，对任何一种提取方法，随甘草粒度变小，提取率均明显升高，甘草粒度是影响提取率的重要因素。从实验可以看出，10克甘草若得到几乎相同的提取率，ERT需要20小时和100ml溶剂，热回流次需要4.5小时和260ml溶剂，而微波辅助提取1次仅需要4分钟和100ml溶剂，在基本相同的条件下，若微波辅助连续提取3次，则需要300ml溶剂但仅需要12分钟，材料A，B，C利用微波辅助提取3次比热回流提取3次的效率分别提高44.54%，21.86%和17.46%。索氏提取法由于浓度差较高，