石榴皮中黄酮的提取研究

石榴皮中黄酮类化合物的提取摘要此文献综述总结了石榴皮黄酮类化合物提取方法, 黄酮的提取方法有微波提取法、有机溶剂提取法、超临界萃取法、超声波辅助提取法等。现代研究证明, 黄酮类化合物是重要的抗氧化剂, 其生理作用是多种多样的, 超临界萃取法速度快、操作简单, 产品无溶剂残留; 超声波辅助提取无需加热, 对有效成分具有保护作用。在提取某些黄酮类成分时, 可以将二者合理地结合利用。对黄酮类化合物的提取方法进行研究, 为开发利用黄酮类化合物提供了一定的科学借鉴依据。 【关键词】 石榴皮；黄酮类化合物；提取方法 前言石榴（Punica grunatum L. ）属安石榴科植物，中国各地均有分布，种质资源丰富。石榴皮性温、涩，具止泻、止血、杀菌、驱虫等功能。近年来报道，石榴皮具有抑制细胞内病毒增殖、抑制体外淋球菌生长、直接杀死病毒和阻止病毒吸附细胞等作用1 2。此外，近来研究还发现石榴皮具有一定的抗氧化性。其内含多种化学成分，黄酮是其中一类较为重要的化合物3。黄酮类化合物广泛存在于植物界，几乎分布于所有的绿色植物中4。黄酮类化合物的生理活性较广泛，具有抗肿瘤，延缓衰老，增强心血管功能，增强免疫力，调节内分泌系统，抗炎，抗过敏，抗病毒等功能。近年来对其研究较多，然而对石榴中黄酮物质的研究较少。目前，黄酮类化合物的提取方法很多，本文主要选取常用的提取方法来提取石榴皮中黄酮类物质，比较了不同提取方法对石榴皮总黄酮含量测定的影响，为更好的开发石榴皮总黄酮奠定了基础。主题1.1黄酮类化合物的提取方法黄酮类化合物种类多，性质差异较大，在植物体内因存在部位不同，结合状态也不同，在花、果和叶等组织中一般以苷的形式存在，而在木部坚硬组织中，则以游离状态存在，在皮、根茎、根等部位也曾发现有苷的结合形式5，所以要根据其存在部位、结合形式等来选择适合的提取方法。1.1.1微波提取法微波加热是透入内部的能量被物料吸收置换成热能对物料的加热, 形成独特的物料受热方式, 具有均匀性的特点, 同时具有反应高效性和强选择性等特点, 而且具有操作简便、副产物少、提取率高等优点。本法多用在药材的浸出, 在黄酮类化合物的提取上取得了良好的效果。李姣娟等人对微波法提取川桂叶总黄酮工艺条件进行研究6, 以65 %乙醇按照固液比120, 在85 条件下提取9 min, 连续提取2 次, 总黄酮得率为22.36 mg/g。此外, 张瑞菊采用单因子及正交实验,考察了乙醇浓度、微波时间、微波功率及固液比对苦参黄酮类化合物提取量的影响规律7。1.1.2有机溶剂提取法甲醇和乙醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂,高浓度的醇( 如90 %左右) 适宜于提取苷元, 60 %左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取苷类。欧美国家采用的主要溶剂法工艺有: 醇(酮)浸提- 卤代烃萃取-酮/铵盐萃取法、酮浸提-氨水沉淀- 混合酮萃取法、酮浸提- 卤代烃萃取- 铅化物沉淀法和醇(酮)浸提- 甲苯/丁醇萃取树脂法8。该工艺采用中等温度50 60 浸泡, 杂质较少,经浓缩、水析可除去烷基酚等脂溶性物质, 用CCl4 等非极性溶剂萃取除去蜡质、叶绿素等脂溶性杂质; 调节pH89 或Pb( OH) 2 沉降, 可除去原花青素、蛋白质、高分子单宁等杂质, 有利于C4- C6 酮和醇萃取有效成分和减少乳化现象, 改善分层, 提高有效成分的萃取率9。1.1.3超临界萃取法超临界流体萃取是利用超临界流体在临界压力和临界温度附近具有的特殊性能作为溶剂进行萃取的一门科学, 最常用的超临界流体为CO2。应用CO2- SPE 技术提取分离黄酮类物质, 具有萃取速度快, 效率高, 操作简单等特点, 产品中没有残留有机溶剂, 与传统的萃取分离工艺相比优势是明显的。此外, 超临界CO2 萃取较易与其它先进技术联用, 成为新型而有效的分离分析技术。余希成通过单因素和正交实验研究,对超临界CO2 流体萃取海金沙黄酮类化合物的工艺进行了优化设计10。 魏强华等11通过水提除蜡工艺获得除蜡蜂胶, 然后对除蜡蜂胶以乙醇浓度75 %、液固比101、微波处理4 min、室温浸提3 d 的条件进行提取。该工艺可以显著缩短提取时间, 提高提取率。1.1.4超声波辅助提取法用超声波法提取黄酮类物质, 是目前比较新的方法。其原理主要是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成份的浸出。王立升采用超声波提取工艺,以乙醇为溶剂提取小叶榕叶中的黄酮类物质, 工艺上增加对脂溶性成分的处理。通过单因素试验研究了各因素对提取率的影响, 正交试验表明影响黄酮提取率的因素主次顺序是: 液固比提取时间乙醇浓度超声功率12。小叶榕叶提取黄酮类成分的最佳条件为: 乙醇浓度60 %, 液固比130, 每次提取时间20 min, 功率为240 W, 最佳条件下小叶榕叶中总黄酮的提取率达到4.38 %。总结黄酮类化合物具有降压、降血脂、镇痛、抑制血小板聚集、抗骨质舒松、抗心律失常、抗过敏及抗缺氧等多种保健作用, 特别是具有抗自由基及抗癌、防癌的作用, 使其在医药、食品领域的应用具有广阔的前景。大部分毒理学研究提示黄酮类化合物一般无毒,由于黄酮类化合物可能存在几种不同的作用机制与合成途径, 研究者们对其实验结果的解释可能仍然存在不足之处。基于此, 还需要考虑其活性成分的稳定性以及加工和贮藏过程中活性成分与药物中其它成分的交互作用。此综述对石榴皮黄酮类化合物的提取方法作了初步说明。通过这几种不同提取方法的比较，我认为微波辅助法比较适用，它具有操作简便、副产物少、提取率高等优点。虽然石榴皮具有很高的药用价值，但是我国对于石榴皮的研究并不是相当重视，造成石榴皮大量浪费，因此加强石榴皮的研究是十分必要的。参考文献1 张 杰,姚学军等.中药石榴皮鞣质类成分抗生殖器疱疹病毒作用J.中国中药杂志，1995，20（9）：556 558.2 张 杰，周江桥等.中药石榴皮对淋球菌的体外抑制作用J.中国皮肤病学杂志，1996，10（2）：75 76.3 许宗运，蒋慧等.石榴皮和石榴渣总黄酮含量的测定J.中国农业科学，2003，19：72 75.4 叶 春，聂开慧等.对40种新鲜蔬菜中总黄酮含量的测定J.山地农业生物学报，2000，19（2）：121 124.5 张继杰 中药化学M . 北京：人民卫生出版社，1994.6 李姣娟, 黄克瀛, 龚建良, 等.微波法提取川桂叶总黄酮工艺条件的研究J.食品研究与开发, 2007( 8) : 71- 747 张瑞菊, 张国英, 孙海波, 等.微波辅助提取苦参总黄酮J.食品研究与开发, 2007( 9) : 43- 468 冯晓萍, 查忠勇, 王槐三.银杏叶黄酮提取工艺研究现状M.四川化工与腐蚀控制, 2002, 2( 5) : 13- 169 王成章, 郁青, 沈兆邦.银杏叶提取物( GBE) 质量和制备工艺M.林业科技通讯, 1999( 8) : 4- 610 余希成, 卢俊.超临界CO2 萃取海金沙中黄酮的研究J