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文档简介

第一章巴斯德 柯赫学名=属名+种名近代微生物分类体系界,门,纲,目,科,属,种微生物分类鉴定方法:核算水平。包括(G+C)mol%值的测定,核酸分子杂交,16S或18SrRNA等保守基因核苷酸序列分析,重要基因序列缝隙和全基因组测序第二章细菌的细胞形态球状,杆状,螺旋状细菌细胞的一般结构包括:细胞壁,细胞膜,细胞质,间体,核糖体,核质,内含物颗粒。特殊结构有荚膜,鞭毛,伞毛(菌毛),芽孢根据细胞壁结构可把细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,前者的细胞壁主要由肽聚糖组成,后者主要由蛋白质和脂多糖组成,而且覆盖在肽聚糖层的外面。鞭毛与细胞的运动密切相关伞毛常出现在革兰氏阴性菌上,这是一种遗传特性,性伞毛仅雄性细菌具有,它在接合时能转移DNA荚膜是某些细菌分泌的黏性物质以一层厚膜状态包围在胞壁外,在细胞表面周围形成一个致密层,其主要成分是水,其余由多糖类,多脂类或者多糖蛋白质复合体组成。芽孢:某些细菌在其生活史的一定阶段,在营养细胞呢形成一个圆形的休眠体,对不良环境尤其是对热有较强的抗性。其只在由于营养耗尽而生长停止的时候形成,若在生长末期加入新鲜的营养,芽孢的形成就会被抑制。 细菌一般进行无性繁殖,即细胞的横分裂,称为裂殖。菌落:将细菌繁殖局限在固体表面的某一空间内,使其形成一个较大的子细胞群落。放线菌的一大类形态极为多样(杆状到丝状),多数呈丝状生长的原核微生物,是产生抗生素的主要微生物。而其中链霉菌产的抗生素又占放线菌总数的80%。放线菌的菌丝.:1.基内菌丝:用于吸收营养物质2.气生菌丝:接触空气,吸收氧气。3.孢子丝:.由气生菌丝分枝部分分化后形成孢子作用的繁殖菌丝,即繁殖功能。放线菌以无性生殖,主要形成孢子,也可以通过菌丝断片繁殖。发酵工业种常用的放线菌:链霉菌属,诺卡氏菌属,小单孢菌属,孢囊链霉菌属。酵母菌是一类单细胞微生物,属真核微生物,诞生痕是子细胞与它的母细胞分离时子细胞的细胞壁上的位点,它通常在细胞长轴的末端。出芽痕是指在母细胞壁上出芽与子细胞分开的那个位点。酵母菌的繁殖方式有无性和有性繁殖两类,其中无性繁殖又分为芽繁和裂繁。有性繁殖指以形成子囊孢子的方式进行的繁殖过程.霉菌也称为小型丝状真菌,与酵母同属,常为绒毛状,网状或絮状菌丝体的真菌,不仅可以直接发酵生产糖化酶和蛋白酶等,还可以淀粉为直接基质发酵生产柠檬酸等有机酸,此外,青霉素也是霉菌来生产的,同时霉菌也是一腐生或寄生的微生物,能引起许多基质,木材,橡胶和食品等发生霉变。担子菌是真菌中进化最高级的,包括人类所称的蘑菇,木耳等,这类菌又称蕈菌或伞菌。担子菌和所有其他真菌的区别在与它们能产生一种有性孢子,称为担孢子。在所有担子菌的主要类型中有一种称为锁状联合的机制,它可以保证由双核分裂产生出来的姐妹核可以分开进入子细胞内,它在核分裂时形成。噬菌体是一类侵害细菌(包括放线菌)的病毒,非常专一的寄生性,其生长和繁殖包括五个步骤:吸附,侵入,增殖,成熟和释放。噬菌体一步生长曲线:P152效价:每毫升试样中所含具有感染性噬菌体的数量,也称为噬菌斑形成量。测定效价的方法常用双层平皿法。噬菌体分烈性和温和性两种,温和型噬菌体侵入寄主细胞后,由于前者的基因组整合在后者的DNA上,并随寄主细胞的复制而进行同步复制,不引起寄主细胞裂解的现象称为溶原化。此时的寄主DNA上的噬菌体称为原噬菌体,这时的寄主称为溶原菌。除细菌和放线菌外原核微生物还包括支原体,立克次氏体和衣原体,支原体是一类目前已知最小的,无细胞壁,但无须依赖活细胞而能独立生活的原核微生物,许多中为人和动物的致病菌。立克次氏体以二分裂方式进行繁殖。衣原体是一类比立克次氏体小,专门寄生在真核细胞中致病性原核微生物,必需要从其他生物取得能量,青霉素的作用机制:抑制细菌的细胞壁中肽聚糖的合成。第三章以获得能量,进行新陈代谢并合成细胞物质,表现出微生物的生长与繁殖。这些物质统称为营养物质,吸收和利用营养物质的过程称为营养过程。微生物可分为光能营养型和化能营养型,又可分为自养和异养,以上交叉叫出现了四大营养型。 选择性培养基:分离某种微生物而加入助长该类微生物的营养物质或者加入抑制其他微生物生长的抑菌剂的培养基,在其上得到的微生物一般不是一个纯种,而是营养要求或抗性类似的类群,故其选择性只是相对的。鉴定培养基:添加了某种或某些特定的化学药品,因而能对特定的微生物分类学上的种类起鉴别作用的培养基,如可以用伊红美蓝培养基区分大肠杆菌和产气杆菌,相比选择性培养基在选择性上更能区分不同微生物种群。分批培养:将微生物的生长和产物的形成同时或分间断进行。连续培养:将新鲜的培养基连续缴入均匀搅拌的培养基中,同时排出含有细胞和产物的发酵液。恒化器和恒浊器:恒化指恒定的化学环境,恒浊指反应细胞浓度的浊度恒定。 常用菌数计数法;血球计数板法(适用于单细胞),平面活计数法第四章 生物氧化反应:由一系列酶在温和的条件下按一定的次序催化进行的反应,氧化反应中的能量释放的分段逐级进行的释放出部分能量以化学能的形式储存在能量载体内,如ATP中的高能磷酸键。生物化学中的氧化还原中不仅仅是电子的传递,还包括整个氢原子的传递,其有脱氢,递氢,受氢三个阶段。微生物代谢产能方式有发酵,有氧呼吸,无氧呼吸和光合作用这四类。第五章可将微生物分为专性好氧,兼性好氧,微好氧菌.耐氧菌和专性厌氧菌五种。专性厌氧微生物不能合成超氧化物歧化酶(SOD酶)和过氧化氢酶,无法去除在有氧存在时细胞内形成的超氧负离子。石炭酸系数:指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度与达到同效的石炭酸的最高稀释度之比第六章从自然界分离筛选菌种:调查研究(包括资料查阅)实验方案设计(确定采样的生态环境)采样(确定增殖培养的条件)增殖培养平板分离第一次原种斜面第二次增殖培养根据实际情况进行定性或半定量测定(第二次平板分离)第二次原种斜面定性或半定量测定(初筛:一株一瓶)第三次平板分离第三次原种斜面复筛(一株3至5瓶)第四次平板分离【第三次原种斜面】再复筛较优菌株1至3株。厌氧微生物的分离方法:1.高层琼脂柱技术 2.厌氧罐技术 3.厌氧手套箱技术基因突变:突变泛指细胞内(或病毒颗粒内)的遗传物质的分子结构或数量突然发生的可遗传的变化。 突变型的类型:1.形态突变型 2.营养缺陷型 3.抗性突变型 4.致死突变型 5.条件致死突变 6.产量突变型 突变型的类型:1.染色体畸变(染色体结构的改变、包括缺失、重复、倒位和易位) 2.基因突变(碱基置换同义突变、错义突变、无义突变 移码突变)诱变剂及其诱变机制(诱发突变简称诱变,是指通过人为的方法,利用物理、化学因素处理微生物而引起的突变) 物理因素:1.紫外线(诱导T=T在DNA链上相邻的嘧啶之间交联而成耐热耐酸DNA修复:光复活作用、切补修复【暗复活】)诱变育种的步骤和方法:1.发菌株的选择(野生型、经历生产条件考验、诱变菌株。依据:对诱变剂敏感,具 有合成目的产物的代谢途径)2.诱变菌株的培养(注意:前培养目的是将诱变细胞的生理状态调整到处于同步生长状态的旺盛的对数生长期,而细胞内又要含有丰富的内源性碱基)3.诱变菌悬液的制备(1.选择合适的介质 2.使细胞或孢子处于良好的分散状态 3. 调节适当的细胞或孢子密度)4.诱变处理(1.诱变剂的选择 2.剂量的选择致死率70%80% 3.诱变处理方式紫外线与光复活的交替处理复合处理同一诱变剂连续重复处理)5.后培养:是指诱变处理后,立即将处理过的细胞转移到营养丰富的培养基中进行培养,使突变基因稳定、纯合并表达(重要作用:消除表延迟)高产突变株的分离与筛选营养缺陷型突变菌株的筛选 营养缺陷型() 野生型(+) 营养缺陷型的筛选方法:1.后培养 2.淘汰野生型(抗生素法、菌丝过滤法) 3.缺陷型的检出(逐个检出法、夹层检出法、限量补充检出法、影印培养法)4.缺陷型的鉴别 抗性突变株的筛选:1.一次性筛选法 2.阶梯性筛选法基因重组育种:通过两个细胞间遗传物质的重组而实现的工业微生物育种 细菌的结合:当两个不同的菌株结合时,遗传物质是单方向转移的,由供体菌(具性因子F)到受体菌。供体菌应是Hfr菌株,多为野生型多带抗生素敏感(如strs)标记;受体菌F菌株,多为营养缺陷型并带抗生素抗性(strr)标记。转化:指某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型细胞的游离DNA,并并将其整合到自己染色体基因组中,从而获得后者遗传性状的现象。(参与转化的基因供体只是游离的DNA分子转化因子)【无需直接接触】感受态:在一个生长过程中的细菌培养物中,只有某一阶段的细胞才能作为转化的受体。细胞能接受转化的生理状态叫感受态。转导:转导是以噬菌体作媒介,将一个细胞的遗传物质传递给另一个细胞的过程。【无需直接接触】(1.能进行局限性转导的噬菌体为温和噬菌体。转导噬菌体只能通过诱导溶原性得到。 2.能进行普遍性转导的噬菌体为烈性噬菌体或经过改造的温和噬菌体)菌种的保藏原理:根据微生物生理、生化特点,人工的创造环境条件,使微生物生长处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。(低温、干燥、缺氧、避光、缺乏营养、添加保护剂或酸度中和剂)保存方法主要措施适宜菌种保藏期评价冰箱斜面保存法低温(4)各大类1-6个月简便冰箱半固体

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