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桃论文:热处理提高桃果实耐冷性的机理研究及相关磷脂酶D基因的电子克隆【中文摘要】桃是我国黄河与长江流域主要果品之一,属于典型的呼吸跃变型果实,不易保鲜,不耐贮藏,且对低温非常敏感,在贮运过程中极易发生冷害,造成极大的经济损失。磷脂酶D(phospholipase D, PLD, EC 3.1.4.4)是植物组织中普遍存在的一类磷脂水解酶,几乎在植物所有的生命阶段和对环境的应答中都起着重要作用。本研究以久保桃(Prunus persica L. cv. jiubao)果实为试材,研究了热处理诱导采后桃果实耐冷性与PLD之间的关系,并克隆了桃果实PLD基因的全长序列。本研究有利于明确PLD作用的分子细胞学机理,能够为控制桃果实冷害提供理论依据。主要研究结果如下:1. 38C热空气处理2 d,能够明显抑制低温贮藏过程中桃果实相对电导率和MDA含量的升高,减轻果实冷害。在热处理初期桃果实PLD和SA被激活,Western分析证实热处理对PLD的激活作用是通过增加其蛋白表达量来实现的。由此可见,PLD信号转导系统和SA信号转导系统的激活是果实响应温度变化的前期反应。但对于PLD或其水解产物如何作为上游信号参与热处理诱导桃果实耐冷性的产生,以及该过程中PLD信号途径与SA信号途径的关系仍需.【英文摘要】Increasing evidences suggest that phospholipase D (PLD) is associated with low temperature stress in plant tissues. Among plant organs, peach fruit are highly susceptible to chilling injury (CI). However, little is known about the role of PLD (i.e., gene expression; protein level and activity) in postharvest chilling tolerance of peach fruit. In this work, using peach fruit (Prunus persica L. cv.jiubao) as materials, the molecular and cellular mechanism of relationship between chilling tolerance and PLD was.【关键词】桃 热处理 耐冷性 磷脂酶D 电子克隆【英文关键词】Peach fruit Heat treatment Chilling tolerance PLD in Silico Cloning【索购全文】联系Q1:138113721 Q2:139938848 同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务.保过包发【目录】热处理提高桃果实耐冷性的机理研究及相关磷脂酶D基因的电子克隆缩略语表4-7中文摘要7-9Abstract9-101 引言11-251.1 植物磷脂酶D 研究回顾11-211.1.1 植物磷脂酶 D 的分子生物学特性12-171.1.2 植物磷脂酶 D 的生理作用17-211.2 热处理诱导果蔬采后耐冷性研究进展21-241.2.1 植物发生冷害机理21-221.2.2 果蔬采后冷害研究进展22-231.2.3 热处理诱导果蔬耐冷性23-241.3 本研究的目的和意义24-252 材料与方法25-322.1 实验材料252.1.1 植物材料252.1.2 材料处理252.1.3 菌株与质粒252.1.4 酶与生化试剂252.2 实验方法25-322.2.1 相对电导率和丙二醛(MDA)的测定25-262.2.2 水杨酸含量测定26-272.2.3 桃果实总蛋白的提取及含量测定272.2.4 磷脂酶 D 活性测定27-282.2.5 磷脂酶 D 的 Western blotting 分析282.2.6 桃磷脂酶 D 基因的鉴定28-292.2.7 反转录-聚合酶链式反应验证292.2.8 磷脂酶 D 基因序列的生物信息学分析29-302.2.9 磷脂酶D 的RT-PCR 分析30-323 结果与分析32-443.1 热处理提高桃果实耐冷性与磷脂酶 D 之间关系的研究32-373.1.1 热处理提高了桃果实的耐冷性32-343.1.2 热处理过程中桃果实水杨酸含量的变化规律研究34-353.1.3 热处理过程中桃果实磷脂酶D 活性和蛋白表达量的变化.35-373.2 桃果实磷脂酶 D 基因的克隆与序列分析37-443.2.1 桃果实磷脂酶D 基因cDNA 的筛选鉴定37-383.2.2 桃磷脂酶D 基因序列的RT-PCR 验证38-393.2.3 桃果实磷脂酶D 氨基酸序列分析39-403.2.4 不同物种间磷脂酶D 蛋白的同源性比较40-433.2.5 热处理过程中桃果实PLD 基因的变化4
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