壳聚糖对参芪水煎液成分纯化的影响.docx

壳聚糖对参芪水煎液成分纯化的影响【摘要】 目的研究壳聚糖对参芪水煎液成分纯化的影响。方法以总多糖含量、固含物的量为指标，采用正交设计法进行研究，并结合HPLC指纹图谱法进行分析。结果壳聚糖用量对参芪水煎液中多糖具有显著影响，由正交法可知最佳纯化条件为A3B1C2D3，该工艺总多糖含量为49.26%，固含物的量为55.58%。HPLC指纹分析可知不同工艺纯化液的指纹图谱全貌具有良好的相似性，只在5，6，9，10，12号色谱峰的含量上存在一定差异。结论壳聚糖对参芪水煎液化学成分具有良好的纯化作用。 【关键词】 参芪; 壳聚糖; 纯化; 多糖; 指纹图谱 Abstract:Objective To study the Chitosan purification influence on Shenqi aqueous extracts components(MethodsBy means of determining polysaccharide and solids contents, orthogonal experiment and HPLC method were used to study and analyze. Results The content of Chitosan had significant influence in polysaccharide, and the best purification process was A3B1C2D3 , whose polysaccharide content and solids content achieved 49.26% and 55.58% respectively; the nine different technology fingerprints showed that those fingerprints had favourable similarity, and only had some diffrence on the number of 5、6、9、10、12 chromatographic peaks. ConclusionChitosan can play an excellent role in purification of Shenqi aqueous extracts components. Key words: Shenqi;Chitosan;Purification;Polysaccharides;Fingerpint 随着中药现代化的进一步发展，中药水提液的纯化技术是中药制剂前处理中最为关键的步骤，而中药水提液成分复杂，体积较大，有效成分含量低，杂质多，所以在保留有效成分的同时尽可能多的去除杂质成为了中药制剂现代化的瓶颈。近几年研究发现，水提醇沉法存在一些不足，乙醇沉淀物中仍含大量有效成分，且费用也高。壳聚糖澄清技术是一种高效、快捷、经济的中药水煎液纯化方法，在中药制剂澄清工艺上越来越受青睐,1，2,，但研究仍不够深入。本文以党参、黄芪为研究对象，采用正交法,3,，以总多糖含量、固含物的量为指标，结合HPLC指纹图谱分析技术,4,，研究壳聚糖澄清剂对参芪水煎液成分的纯化影响，为壳聚糖在中药复方制剂的前处理方面的研究提供基础和依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器Agilent 1100 液相色谱仪(含在线真空脱气机，低压四元梯度泵，自动进样器，柱温箱，可变波长紫外检测器)，电热恒温水浴锅(型号H?S?G-?B-4)，电子分析天平(Sartorius BP211D，十万分之一天平)，Shimadzu UV-1700 分光光度计。 1.2 试药党参、黄芪药材，由丽珠集团利民制药厂提供，经广东药学院中药开发研究所朱盛山教授分别鉴定为桔梗科植物党参Codonopsis pilosula( franch.) Nannf.的干燥根和豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch() Bge(var mongholieus (Bge()Hsiao的干燥根。壳聚糖(上海伯奥生物科技有限公司);D-无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所，批号为:110833-200503);乙腈为色谱纯，水为三蒸水;磷酸、硫酸、苯酚、盐酸均为分析纯。 2 方法和结果 2.1 参芪水煎液的制备取党参、黄芪药材各1 kg ，分3次煎煮，第1次加10倍量水煎煮1 h，第2 次加8 倍量水煎煮1 h，第3 次加8 倍量水煎煮30 min。合并煎液，滤过，浓缩至每毫升药液含0.5 g生药，备用。 2.2 壳聚糖澄清剂的配制称取1.0 g壳聚糖置100 ml量瓶中，用1%冰醋酸至刻度，配成1%的壳聚糖胶体溶液。 2.3 正交实验 2.3.1 正交因素的确定依据预实验结果，以药液浓度、澄清剂加入量、澄清温度和搅拌时间为考察因素，以总多糖含量和沉淀物去除率为指标，按照L9(34)正交实验进行研究，测定，计算，并对结果进行比较分析。各因素水平见表1。表1 正交实验因素水平表(略) 2.3.2 正交实验根据因素设计表，分别取参芪水煎液制成相应药液浓度的溶液各50 ml，按照正交设计表(见表2)进行正交实验，分别加入1%的壳聚糖澄清剂溶