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99-07年微生物问答题题目及参考答案99-07年微生物问答题题目及参考答案1, 以Schizosaccharomyces octosporus, S. ludwigii 和S. cerevisiae 为例描述酵母菌的三种生活周期及其特点。(02,04,05,07)答:(1)营养体以单倍体形式存在, Schizosaccharomyces octosporus(八孢裂殖酵母)是这一类型生活史的代表,特点为:营养细胞为单倍体;无性繁殖为裂殖;二倍体细胞不能独立生活,故此期极短.生活史可分为5个阶段:单倍体营养细胞借裂殖方式进行无性繁殖;两个营养细胞接触后形成接合管,发生质配后即进行核配,于是两个细胞连成一体;二陪体的核分裂3次,第一次为减数分裂;形成8个单倍体的子囊孢子;子囊破裂释放子囊孢子.(2)营养体只能以二倍体形式存在, S. ludwigii(路氏类酵母)是这一类型生活史的代表,特点为:营养体为二倍体,不断进行芽殖,此阶段较长;单倍体为子囊孢子,在子囊内发生接合;单倍体阶段仅以子囊孢子的形式存在,不能进行独立生活.生活史具体过程为:单倍体子囊孢子在孢子囊内成对接合,并发生质配和核配;接合后的二倍体细胞萌发,穿过子囊壁;二倍体的营养细胞少独立生活,通过芽殖方式进行无性繁殖;在二倍体营养细胞内的核发生减数分裂,故营养细胞成为子囊,其中形成4个单倍体子囊孢子.(3)营养体既能以单倍体也能以二倍体形式存在, S. cerevisiae(酿酒酵母)是这类生活史的代表,特点为:一般情况下都以营养状态进行出芽繁殖;营养体即能以单倍体形式存在,也能以二倍体形式存在;在特定条件下才进行有性繁殖.生活史为:子囊孢子在合适的条件下出芽产生单倍体营养细胞;单倍体营养细胞不断进行出芽生殖;两个性别不同的营养细胞接合,在质配后发生核配形成二倍体营养细胞;二倍体营养细胞不进行核分裂而是不断进行出芽生殖;在以碳酸盐为唯一或主要碳源,同时又缺乏氮源支持的条件下,二倍体营养细胞营养细胞最易转变为子囊,此时细胞核才进行减数分裂,并随即形成4个子囊孢子;子囊经自然或人为破裂后释放出子囊孢子.2, 举例概述微生物在自然界物质循环中的重要作用,展望利用有益微生物开发新生物质能源的应用前景.(99,02,06,07)答:自然界的物质循环可归结为:A化学元素的有机质花或生物合成作用，B有机物质的无机质或或分解作用两个对立过程。碳循环：绿色植物和无机营养型微生物利用光能和化学能将CO2和水还原为碳水化合物，与此同时，植物和无机营养型微生物也进行着分解作用，使有机物质重新转化为CO2，水和无机物质并释放储存的能量，动物和有机营养型生物以植物和无机营养型微生物为食，同样将合成的有机化合物分解为CO2，水和无机化合物。氮循环：大气中的N2通过某些原核微生物的固氮作用合成为化合态氮；化合氮可进一步被植物和微生物的同化作用转化为有机氮；有机氮经微生物的氨化作用释放出氨；氨在有氧条件经微生物的硝化作用氧化为硝酸；硝酸和亚硝酸又可在无氧条件下经微生物的反硝化作用，最终变成N2和N2O，返回至大气中，如此构成氮素循环。硫循环：硫的氧化：还原态的无机硫化物被微生物氧化成硫酸；硫酸盐还原：同化硫酸盐还原即硫酸盐被微生物还原成H2S后在胞内被结合到细胞组分中；反硫化作用即硫酸盐作为末端电子被微生物还原成不被同化的H2S；硫化氢的释放：生物尸体和残留物中含硫蛋白质经微生物的作用释放出H2S,CH3SH,(CH2)3S等含硫气体。磷循环：有机磷转化成溶解性的无机磷（有机磷矿化）；不溶性无机磷变成可溶性无机磷（磷的有效化）；溶解性无机磷变成有机磷（磷的同化）。有益微生物的应用前景： 3，简述并图示遗传工程的主要操作步骤。（02，05，07）答：遗传工程也称基因工程，实质上是一种DNA的人工体外重组技术。即根据人们的目标要求，用人工方法取得供体菌DNA上的目标基因，并加以改造，在体外重组于载体DNA上，再导入宿主细胞内，并使其转录，翻译表达和复制，获得供体基因的原生物学性状，从而获得大量的基因产物或使受体生物表现出新的表型性状。主要操作步骤：目标基因的分离或合成；通过体外重组将基因插入载体；将重组DNA导入受体细胞；扩增克隆的基因；筛选重组体克隆；对克隆的基因进行鉴定或测序；控制外源基因的表达；得到基因产物或转基因动物，植物。图示如下： 图 基因工程基本操作过程示意图4，简述遗传工程在生命科学研究中的应用及其前景。（00）答：在生产多肽类药物，疫苗中的应用，如抗肿瘤，抗病毒功能的干扰素，白细胞介素，胰岛素，生长激素，抗凝血因子等；基因治疗：向靶细胞中引入具有正常功能的基因，以纠正或补偿基因的缺陷，从而达到治疗的目的；在改造传统工业发酵菌种中的应用；动植物特性的基因工程改良，如转基因动物，转基因植物；培育能分解有毒物质的工程菌；推动了微生物学的发展。基因工程在食品，化工，环保，制药，农业，医学，冶炼，采矿，能源等众多领域都有游人的开发前景，但是基因工程带来巨大贡献的同时也存在着隐患，如转基因的生物是否会给人类带来潜在的危害。5，以大肠杆菌为例，简述细菌基因重组的类型和特点。（01，04，05）答：能引起原核微生物基因重组的主要方式有转化，转导，接合和原生质体融合。转化：是指受体菌接受供体菌的DNA片断，经过交换将它组合到自己的基因组中，从而获得了供体菌部分遗传性状的现象，转化后的受体菌，称为转化子。其特点为：不需受体菌株和供体菌株的接触；供体DNA不需要媒介的介导，处于感受态的受体菌直接吸收供体菌的DNA。转导：是指以噬菌体为媒介，把供体细胞的DNA片断携带到受体细胞中，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。其特点为：不需受体菌株和供体菌株的直接接触；供体DNA需要噬菌体的媒介作用。接合：是指通过供体菌和受体菌完整细胞间性菌毛的直接接触而传递大段DNA的过程。其特点为：需受体菌株和供体菌株的接触；供体DNA通过接合管导入受体细胞。原生质体融合：是指通过人工方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体发生融合，并产生重组子的过程。其特点为：需受体菌株和供体菌株的直接接触；需要通过化学因子诱导或电场诱导进行融合二亲原生质体。6，简述生物固氮作用及其反应所需要的条件（包括固氮酶，电子供体或载体以及能量）（99）答：大气中的分子态氮（N2）在生物体内有固氮酶催化还原为NH3 的过程称为生物固氮作用。生物界中只有原核生物才有固氮能力，生物固氮作用是仅次于光合作用的生物化学反应，它为整个生物圈中的一切生物的生存繁殖提供了不可或缺和可持续供应的还原态氮化物的源泉。生物固氮的条件为：具有固氮活性的固氮酶：其组成有组分（钼铁蛋白），组分（铁蛋白）和FeMo辅因子；必须有电子和质子供体，每还原分子N2需要个电子核个质子，为了传递电子和质子，还需要有相应的电子传递链；必须有能量供给，由于N2分子具有键能很高的三价键，打开它需要很大的能量；必须有严格的厌氧环境或保护固氮酶的免氧失活机制，因为固氮酶对氧具有高度敏感性，遇氧即失活；形成的氨必须及时转运或转化排除，否则会产生氨的反馈阻遏效益。7，简述微生物之间相互作用类型与特点。（01，06）答：中性关系：两个微生物种群之间没影响或仅存无关紧要的相互作用,如空气中的微生物，休眠的芽孢等；偏利关系：一个种群因另一个种群的存在或生命活动而得利，而后者冒雨从前者受益或受害，如好氧微生物消耗环境中的分子氧，为厌氧微生物的生存和发展创造厌氧的环境条件；协同关系：两个微生物种群之间相互受益并保持它们各自独立性的松散关系，如纤维分解微生物和固氮细菌的饿共栖，纤维分解菌分解纤维产生的糖类可为固氮细菌提供碳源和能源，而固氮细菌固定的氮素可为纤维分解微生物提供氮源，互为有利而促进了纤维分解和氮素固定；互惠共生关系：协调作用发展成为专性的结合并具有共生的特殊形态结构和功能，如地衣是真菌和蓝细菌的共生体，蓝细菌固氮为真菌提供有机氮素营养，真菌利用菌丝吸收水分和矿质营养供给蓝细菌生长的需要；寄生关系：一种微生物寄生在另一种生物体上从后者取得养料，前者称为寄生物，后者称为寄主，在寄生关系中，寄生物对寄主一般是有害的，往往使寄主发生病害或者死亡，如噬菌体于细菌之间的关系；捕食关系：一种微生物种群被另一种微生物种群完全吞食，捕食者种群从被食者种群得到营养，而对被食者种群产生不利影响，如土壤中的原生动物和其他微生物之间的关系；竞争关系：两个种群或多个种群共同依赖同一生长基质或者环境因素，结果一方或两方的种群大小或生长率受到限制，竞争结构强者生存，弱者淘汰，如在同一生长环境中如果限制P的数量，两种藻类星杆藻和小环藻在此环境中生活时，则小环藻被星杆藻取代；拮抗关系：一种微生物种群产生某种物质使另一个微生物种群的生长受到抑制而本身不受影响，如乳酸菌产酸抑制其它微生物的生长。8，简述微生物细胞的生长周期，并以大肠杆菌为例简述细菌的生长曲线。（99，07）答：迟缓期：细菌接种到新鲜培养基而处于一个新的生长环境，因此在一段时间里并不马上分裂，细菌数量维持恒定，或增加很少，群体的生长率近于0。在图上，曲线平缓。特点为：生长速率常数为0；菌体体积增长较快；代谢活跃。对数期：以最大的速率生长和分裂，细菌生长旺盛，代谢活力强。分裂速度快，菌数以指数级数增加，代时稳定。细胞在形态、生理等方面较为一致。在图上呈一条斜度很小的直线。稳定期：又称恒定期或最高生长期。处于稳定期的微生物，新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，整个培养物中二者处于动态平衡，此时生长速度，又逐渐趋向零。稳定期的细胞内开始积累贮藏物，大多数芽孢细菌也在此阶段形成芽孢。稳定生长期的活细菌数最高并维持恒定。开始时曲线上升缓慢，菌数达到最高水平后，曲线开始下降。衰亡期：营养物质耗尽和有毒代谢产物的大量积累，细菌死亡率逐渐增加，群体中活菌数目急剧下降，出现了“负生长”。这一阶段的细胞，有的开始自溶，产生或释放出一些产物，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。菌体细胞也呈现多种形态，有时产生畸形，细胞大小悬殊，有的细胞内多液泡，革兰氏染色反应的阳性菌变成阴性反应等。9,简述显微直接测数和稀释平板测数法的原理及方法。（99，02，07）答：显微直接测数法：原理：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。方法：计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积为1mm和高度为0.1mm的计数室，在1mm的面积里又被刻划成25个（或16个）中格，每个中格进一步划分成16个（或25个）小格，计数室都是由400个小格组成。将稀释的样品滴在计数板上，盖上盖玻片。然后在显微镜下计算4-5个中格中的细菌数，并求处每个小格所含细菌的平均数，再按下面公式求出每毫升样品所含的细菌数。每毫升原液所含细菌数=每小格平均细菌数4001000稀释倍数稀释平板测数法：原理：每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。方法：将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择3个稀释度的菌液，分别去0.2mL放入无菌培养皿，再倒入适量的以溶化并冷至45度左右的培养基，与菌液混匀，冷却，待凝固后，放入适宜温度的培养箱或温室培养，长处菌落后计数，按下面公式计算出原菌液的含菌数：每毫升原菌液活菌数=同一稀释度3个以上重复培养皿菌落平均数稀释倍数510，图示并简述烈性噬菌体的生活周期。（99）答：烈性噬菌体具体繁殖过程如下：吸附：噬菌体与敏感细菌随机碰撞相遇，噬菌体的尾丝与敏感细菌特定的受体部位相互作用，并可逆性的吸附在细菌表面，基板不可逆的吸附在细菌表面。侵入：噬菌体尾部的酶水解宿主细胞壁中的肽聚糖，使细胞壁产生一个小孔，然后尾鞘收缩，将核酸压入细胞内。病毒大分子的合成：噬菌体核酸利用宿主的复制系统合成自身所需的核酸和蛋白质。装配和释放：将分别合成的核酸和蛋白质组装成成熟的噬菌体，噬菌体在宿主细胞内完成装配后，细胞裂解，子代噬菌体从宿主的胞内转向胞外，继而去侵染其他宿主细胞，如此循环。11，试述病毒的非增殖感染类型。（05）答：由于病毒或是细胞的原因，致使病毒的复制在病毒进行敏感细胞后的某一阶段受阻，结果导致病毒感染的不完全循环，这类感染称为病毒的非增殖性感染。非增殖性感染的类型为：流产感染：A依赖于细胞的流产感染：细胞缺少某些参与病毒复制的酶，tRNA或病毒大分子合成所需的其他细胞蛋白等。B依赖于病毒的流产感染：由基因组不完整的缺损病毒引起，无论是感染允许细胞还是非允许细胞，都不能完成复制循环。限制性感染：这类感染因细胞的瞬时允许性产生，其结果或是病毒持续存在于受染细胞内不能复制，直到细胞成为允许性细胞，病毒才能繁殖；或是一个细胞群体中仅有少数细胞产生病毒子代。潜伏感染：在受染细胞内有病毒基因组持续存在，但并无感染性并行颗粒产生，而且受染细胞也不会被破坏。12，概述土壤微生物在发展持续农业中的作用。（00）答：利用微生物可以改善农业生产的生态环境；利用微生物防治作物病虫害以减少污染环境的化学农药和除草剂的使用；利用微生物改善和提高土壤肥力以减少化学肥料的使用，生产绿色食品；利用微生物生产在环境中易受生物降解的塑料；利用微生物生产如氢气，乙醇和沼气等清洁能源；利用微生物生产对人类健康极为需要的如抗生素，生物调节剂，微生物多糖，酶抑制剂等药物。13，简述微生物修复DNA损伤的方式，作用机理及其与突变形成的关系。（04，05）？答：DNA损伤：是指任何不正常的DNA结构，包括基因突变，移码突变和染色体畸变。微生物具有并研究较多的DNA损伤修复系统有光复活作用，切补修复，重组修复和SOS修复。光复活作用：是指光诱导后使损伤的DNA修复现象。细菌中存在一种光复活酶（PR酶），PR酶在黑暗中专一的识别嘧啶二聚体，并与之结合，形成酶DNA复合物，当给予光照时，酶利用光能（PR酶本身无发色集团，与损伤的DNA结合后才能吸收光，起光解作用）将二聚体拆开，恢复原状，酶再释放出来。切除修复：又称暗修复，该修复除了碱基错误配对和单核苷酸插入不能修复外，几乎其他DNA损伤（包括嘧啶二聚体在内）均可修复，是细胞内的主要修复系统。包括一系列复杂的酶促DNA修补复制过程,主要有以下几个阶段：核酸内切酶识别DNA损伤部位，并在5端作一切口，再在外切酶的作用下从5端到3端方向切除损伤；然后在 DNA多聚酶的作用下以损伤处相对应的互补链为模板合成新的 DNA单链片断以填补切除后留下的空隙；最后再在连接酶的作用下将新合成的单链片断与原有的单链以磷酸二酯链相接而完成修复过程。重组修复：是一种越过损伤而进行修复。这种修复不将损伤碱基除去，而是通过复制后，经染色体交换，使子链上的空隙部位不再面对着嘧啶二聚体，而是面对着正常的单链，在这种情况下，DNA聚合酶和连接酶便能起作用，把空隙部位进行修复。留在亲链上的二聚体仍然要依靠再一次的切除修复加以除去，或经细胞分裂而稀释掉。SOS修复：是在DNA分子受到较大范围的重大损伤时诱导产生的一种应急反应。在大肠杆菌中,这种反应由recA-lexA系统调控。正常情况下处于不活动状态。当有诱导信号如 DNA损伤或复制受阻形成暴露的单链时，recA蛋白的蛋白酶活力就会被激活，分解阻遏物lexA蛋白,使SOS反应有关的基因去阻遏而先后开放,产生一系列细胞效应。引起SOS反应的信号消除后，recA蛋白的蛋白酶活力丧失，lexA蛋白又重新发挥阻遏作用。14，微生物在生物修复中有何意义。（03）？答：生物修复是微生物催化降解有机污染物，转化其他污染物从而消除污染的一个受控或自发进行的过程。生物修复的基础是发生在自然界中微生物对有机污染物的降解作用。生物修复的本质是生物降解，能否成功取决于生物降解速率，在生物修复中采取强化措施促进生物降解十分重要，这包括：接种微生物，目的是增加降解微生物数量，提高降解能力。添加微生物营养。提供电子受体。提供共代谢底物。提高生物可利用性。添加生物降解促进剂。15，试述微生物在基因工程中的作用。（03）答：微生物的多样性，尤其是抗高温，抗高盐，抗高碱，抗低温，分解有毒物质和杀虫等，为基因工程提供了及其丰富而独特的基因资源。基因工程所用的克隆载体主要是由质粒，噬菌体和其他病毒DNA等改造而成的。基因工程所用的千余种工具酶绝大多数是从微生物中分离纯化得到的。微生物细胞是基因克隆的宿主，即使是植物基因工程和动物基因工程也要先构建穿梭载体，使外源基因或重组体DNA在大肠杆菌中得到克隆并进行拼接和改造，才能再转移到植物和动物细胞中。作为大规模表达各种基因产物，从事商业化生产的工程菌。为基因工程提高操作技术和理论指导。16，试述微生物生长的意义，生长测定的方法和原理及影响微生物生长的主要因素。（04）答：意义：微生物的生长繁殖是其内外各种环境因素相互作用下的综合反映，因此，生长繁殖情况就可作为研究各种生理，生化和遗传等问题的重要指标；同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治，也都与它们的生长繁殖和抑制紧密相关。所以有必要测定微生物的生长繁殖及其控制的规律。生长测定的方法有：计数法：直接或间接的测定样品中所含细菌，孢子，酵母菌等单细胞微生物的数量，该方法能测定样品中微量的菌数。重量法：根据每个细胞有一定的重量而设计的，它可以用于单细胞，多细胞以及丝状体微生物生长的测定。包括干重法和湿重法。生理指标法：根据微生物的呼吸强度，耗氧量，酶活性，生物热等来测定微生物的数量。影响微生物生长的主要因素有：营养物质，水的活性，温度，PH和O2。17，何为病毒？病毒的核酸有哪些类型和结构特征？以T4噬菌体为例简述病毒的复制周期及特点。（给出T4噬菌体结构示意图，注明个部分名称）（99，04，06）？答：病毒：指超显微的，没有细胞结构的，专性活细胞内寄生的实体。一种病毒的毒粒只含有一中核酸，DNA或是RNA。病毒核酸的类型：单链DNA(ssDNA),双链DNA(dsDNA),单链RNA(ssRNA)和双链RNA(dsRNA)结构特征：线状单链，环状单链，线状双链，有单链裂口的线状双链，有交联末端的线状双链，闭合环状双链，不完全环状双链。病毒的复制周期及特点见10题18，简述微生物营养类型及其特点。（00，04，05）答：光能无机自养型：能以CO2为唯一或主要碳源；进行光合作用获取生长所需要的能量；以无机物如H2、H2S、S等作为供氢体或电子供体，使CO2还原为细胞物质； 主要有蓝细菌，紫硫细菌，绿硫细菌和藻类等。光能有机异养型： 不能以CO2为主要或唯一的碳源；以有机物作为供氢体，利用光能将CO2还原为细胞物质；在生长时大多数需要外源的生长因子； 主要有红螺菌科的细菌。化能无机自养型：生长所需要的能量来自无机物氧化过程中放出的化学能；以CO2或碳酸盐作为唯一或主要碳源进行生长时，利用H2、H2S、Fe2+、NH3或NO2-等无机物作为电子供体使CO2还原成细胞物质；主要有硝化细菌，硫化细菌，铁细菌，氢细菌和硫磺细菌。化能有机异养型：生长所需要的能量均来自有机物氧化过程中放出的化学能； 生长所需要的碳源主要是一些有机化合物，有机物通常既是碳源也是能源 ；主要有绝大多数细菌和真核生物。19,简述细菌芽孢的形成过程及其耐热机制。（06）答：芽孢形成过程：轴丝形成：开始形成芽孢时，核物质变成致密的一条；横膈膜的形成：左端细胞膜内陷形成隔膜，产生大小两个细胞；前孢子的形成：大细胞向前生长，将小细胞包围，形成一个具有双层膜的前孢子；皮层形成：在前孢子的双层膜之间信号出皮层，在皮层中有吡啶二羧酸（DAP）和Ca的吸收；孢子衣形成：前孢子外膜表面合成外孢子物质沉积在皮层外表面，发展成为一个连续的致密层；芽孢成熟：某些芽孢在此阶段形成外孢子壁；芽孢释放：孢子囊破裂，芽孢释放出来。芽孢的耐热机制：芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差；皮层的离子强度很高，从而使皮层产生极高的渗透压去夺取芽孢核心中的水分，其结果造成皮层的充分膨胀；核心部位的细胞质变得高度嗜睡，导致核心具有极强的耐热性。20，简述影响营养物质进入细胞的主要因素和微生物吸收营养物质的类型和特点。（01，02，05，06）答：影响营养物质进入细胞的主要因素：营养物质本身的性质；微生物所处的环境；微生物细胞的透过屏障。微生物吸收营养物质的类型和特点：扩散（diffusion）:物质扩散的动力是物质在膜内外的浓度差；物质在扩散过程中不消耗能量；不需要膜上载体蛋白参加；简单扩散不是微生物吸收营养物质的主要方式。促进扩散（facilitated diffusion）：运输动力来自细胞膜内外的运输物质的浓度差；需要载体，每种载体只运输相应的物质，具有较高的专一性；不消耗能量，参与运输的物质本身的分子结构不发生变化。主动运输（active transport）：运输过程需要载体，载体蛋白通过构象变化而改变与被运输物质之间的亲和力；需要消耗细胞的能量；可以逆浓度运输；广泛存在与微生物中的一种主要运输方式。基团移位（group translocation）：物质在运输过程中发生化学变化，主要存在与厌氧型和兼性厌氧型细菌中。21，简述细菌分类鉴定的常用方法。（05，06）答：常用分类方法有：以形态生理特征为主的传统分类法（经典分类法）：主要运用形态特征和生理特征，在这些特征中又分主要特征和次要特征，一般形态特征为主要特征，最后用双歧法排列出一个个分类群。以DNA为主的遗传分类法：主要是从遗传学角度评价微生物间的亲缘关系，以GC含量和不同来源的DNA之间碱基顺序的类似程度及同源性为依据，排列出一个个分类群。数值分类法：用数理统计方法来处理细菌的各种特征，求出相似值，以其相似性的大小决定细菌在分类学中的关系，并把透酶分为各个类群。化学分类法22，举例阐述微生物在自然界物质循环中和污染环境治理中的重要作用。（04）答：微生物作为物质循环中的重要成员除了参与生物地球化学循环外，很重要的就是降解和转化环境中的污染物，完成生态系统的物质循环过程：生物降解：对物质（特别是环境污染物）的分解作用，是生态物质循环过程中的重要一环。重金属转化：微生物特别是细菌，真菌在重金属的生物转化中起重要作用，微生物直接和间接的作用也可以去除环境中的重金属，有助于改善环境，如能将无机汞和有机汞转化为单质汞的铜绿假单胞菌，金黄色葡萄球菌等。污染介质的微生物处理人类生产和生活活动的废水，废气及固体废弃物都可以用生物方法处理。环境污染的微生物监测：环境中的微生物是环境污染的直接承担者，环境状况的任何变化都对微生物群落结构产生影响，因此可以用微生物指示环境污染，如大肠杆菌是最基本的粪便污染指示菌，最常用的水质指标之一。23，简述从土壤中分离自生固氮菌纯培养的操作步骤及方法。（01，04）答：分离自生固氮菌所用的培养基常为阿斯比无氮培养基。具体操作如下：富集培养：用已灭菌后冷却至50oC左右的阿斯毕培养基倒成平板。用已灭菌的镊子将黄豆粒大的土壤摆入已冷凝的平板培养基上。正面放置培养箱中培养，28oC培养34天后，在土粒周围有混浊半透明的胶状菌落出现，有的在后期会产生褐色的色素。划线分离纯化：用已溶化至50oC阿斯毕培养基倒入平板。用接种环挑取上述菌落少许，在冷凝平板上进行划线分离，而后置28oC培养4天。纯化，镜检，得到纯种培养：平板上出现单菌落，按无菌操作移入阿斯毕培养基斜面试管中，28oC培养4天。镜检：将斜面菌株进行涂片、染色、镜检。如是粗短杆状或球状的单一形态的菌体细胞较大，常呈单个或“8”字排列，在细胞表面有较厚的荚膜者，即为自生固氮菌。如有杂菌，需要进一步划线纯化。将得到纯化菌株，移接到另一阿斯毕培养基斜面管，28oC培养34天，即获得纯培养菌，可冷冻保存，备用。微生物名词解释:1，（00，02，04，06）菌根：指一些真菌和植物根以互惠方式建立起来的共生体，可以促进磷，氮和其他矿物质的吸收，包括外生菌根和内生菌根。2，（00，02，04，06）根际效应：生活在根圈中的微生物，在数量，种类和活性上都有明显不同，表现出一定的特异性，这种现象称为根际效应（根圈效应）。3，（99，02，04，06）Kock法则：证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则。4，（99，02，04，06）溶源性：感染细胞后噬菌体不能完成复制循环，噬菌体基因组长期存在于宿主细胞内，没有子代噬菌体产生的现象。5，（04，06）基因文库：是某种特定的生物所含有的能够包含所以基因的足够数目的克隆的集合。6，（04，06）营养缺陷型：一种缺乏合成其生存所必需的营养物的突变型，只有从环境或培养基中获得这些营养或其前体物才能生长。7，（04，06）稳定生长期：微生物通过对数生长期后，生长速度降低至零的时期，稳定期的微生物数量最大并维持稳定。8，(01,05,07)一步生长曲线：定量描述烈性噬菌体生长规律的曲线。9，（01，03，05）准性生殖：是一种类似于有性生长，但比有性生长更为原始的一种生殖方式，它可使同种生物的两个不同菌株的体细胞发生融合，且不经过减数分裂的方式而导致低频率基因重组并产生重组子。10，（04，05，07）抗生素：是某些生物合成或半合成的一类次级代谢产物或衍生物，它们上能抑制微生物生长或杀死微生物的化合物。11，（05，07）氨化作用：有机氮化合物转化成氨（铵）的生化过程。12，（05，07）聚-羟丁酸：存在于某些细菌细胞质内的颗粒状的内含物，有许多羟基丁酸聚合而成，具贮藏能量，碳源和降低细胞渗透压的作用。13，（01，07）古生菌：是一个在进化上很早就与真细菌和真核生物相互独立的生物类群，主要包括一些独特生态类型的原核生物。14，（04，06）同步生长：以同步培养方法使群体细胞能处于同一生长阶段，并同时进行分裂的生长方式。15，（02，03，04）质壁空间：又称质膜间隙或周质空间，指存在于细胞壁与细胞膜之间的空隙，在周质空间中存在着多种周质蛋白。16，（00，07）发酵：微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物，同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。17，（99，00）基因重组：把两个不同形状个体内的遗传基因转移在一起重新组合，形成新的遗