GBT5009.19-1996食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法.pdf

GB/T 5009.191996 中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准 食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法 Method for determination of BHC and DDT in foods GB/T 5009.191996 GB/T 5009.191996 1 主题内容与适用范围 1 主题内容与适用范围 本标准规定了食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法。 本标准规定了食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法。 本标准适用于食品中六六六、滴滴涕残留的测定。 本标准适用于食品中六六六、滴滴涕残留的测定。 气 相 色 谱 法 检 测 限 ： -666 、 -666 、 -666 、 -666 依 次 为 0.2,0.8,0.3,0.4 g/kg。 气 相 色 谱 法 检 测 限 ： -666 、 -666 、 -666 、 -666 依 次 为 0.2,0.8,0.3,0.4 g/kg。 p, p, -DDE、o, -DDE、o, -DDT、p, -DDT、p, -DDD、p, -DDD、p, -DDT 依次为 0.5,2.7,1.6，4.0 g/kg。 -DDT 依次为 0.5,2.7,1.6，4.0 g/kg。 pppp 薄层色谱法最低检测量为 0.02 g，适宜范围为 0.020.20g。 薄层色谱法最低检测量为 0.02 g，适宜范围为 0.020.20g。 第一篇 气相色谱法（第一法） 第一篇 气相色谱法（第一法） 2 原理 2 原理 样品中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相色谱法测定，与标准比较定 量。电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用这一特点， 可分别测出微量的六六六和滴滴涕。不同异构体和代谢物可同时分别测定。 样品中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相色谱法测定，与标准比较定 量。电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用这一特点， 可分别测出微量的六六六和滴滴涕。不同异构体和代谢物可同时分别测定。 出峰顺序：-666、-666、-666、-666、p, 出峰顺序：-666、-666、-666、-666、p, -DDE、o, -DDE、o, -DDT、 p, -DDT、 p, -DDD、p, -DDD、p, -DDT。 -DDT。 pp pp 3 试剂 3 试剂 使用的试剂一般系分析纯，有机溶剂需经重蒸馏。 使用的试剂一般系分析纯，有机溶剂需经重蒸馏。 31 丙酮。 31 丙酮。 32 正己烷。 32 正己烷。 33 石油醚：沸程 3060。 33 石油醚：沸程 3060。 34 苯。 34 苯。 35 硫酸。 35 硫酸。 36 无水硫酸钠。 36 无水硫酸钠。 37 硫酸钠溶液（20 g/L） 。 37 硫酸钠溶液（20 g/L） 。 38 六六六、滴滴涕标准溶液：准确称取甲、乙、丙、丁六六六四种异构体 和 p, 38 六六六、滴滴涕标准溶液：准确称取甲、乙、丙、丁六六六四种异构体 和 p, -滴滴涕、p, -滴滴涕、p, -滴滴滴、p, -滴滴滴、p, -滴滴伊、o, -滴滴伊、o, -滴滴涕（-666、 -666、-666、-666、p, -滴滴涕（-666、 -666、-666、-666、p, -DDE、o, -DDE、o, -DDT、p, -DDT、p, -DDD、p, -DDD、p, -DDT）各 10.0 mg 溶于苯，分别移入 100 mL 容量瓶中，加苯至刻度，混匀，每毫升含农 药 100.0g，作为储备液存于冰箱中。 -DDT）各 10.0 mg 溶于苯，分别移入 100 mL 容量瓶中，加苯至刻度，混匀，每毫升含农 药 100.0g，作为储备液存于冰箱中。 pppp pppp 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 19960901 实施 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 19960901 实施 GB/T 5009.191996 39 六六六、滴滴涕标准使用液：将上述标准储备液以己烷稀释至适宜浓度， 一般为 0.01 g/mL。 39 六六六、滴滴涕标准使用液：将上述标准储备液以己烷稀释至适宜浓度， 一般为 0.01 g/mL。 4 仪器 4 仪器 41 小型粉碎机。 41 小型粉碎机。 42 小型绞肉机。 42 小型绞肉机。 43 组织捣碎机。 43 组织捣碎机。 44 电动振荡器。 44 电动振荡器。 45 旋转浓缩蒸发器。 45 旋转浓缩蒸发器。 46 吹氮浓缩器。 46 吹氮浓缩器。 47 气相色谱仪，具有电子捕获检测器（ECD） 。 47 气相色谱仪，具有电子捕获检测器（ECD） 。 5 分析步骤 5 分析步骤 51 提取 51 提取 511 称取具有代表性的样品（适用于生的及烹调加工过的蔬菜、水果或谷 类、豆类、肉类、蛋类）约 200 g，加适量水，于捣碎机中捣碎，混匀。称取匀 浆 2.005.00 g，于 50 mL 具塞三角瓶中，加 1015 mL 丙酮，在振荡器上振 荡 30 min，过滤于 100 mL 分液漏斗中，残渣用丙酮洗涤四次，每次 4 mL，用 少许丙酮洗涤漏斗和滤纸，合并滤液 3040 mL，加石油醚 20 mL，摇动数次， 放气。振摇 1 min，加 20 mL 硫酸钠溶液（20 g/L） ，振摇 1 min，静置分层， 弃去下层水溶液。用滤纸擦干分液漏斗颈内外的水，然后将石油醚液缓缓放出， 经盛有约 10 g 无水硫酸钠的漏斗，滤入 50 mL 三角瓶中。再以少量石油醚分三 次洗涤原分液漏斗、 滤纸和漏斗， 洗液并入滤液中， 将石油醚浓缩， 移入 10 mL 511 称取具有代表性的样品（适用于生的及烹调加工过的蔬菜、水果或谷 类、豆类、肉类、蛋类）约 200 g，加适量水，于捣碎机中捣碎，混匀。称取匀 浆 2.005.00 g，于 50 mL 具塞三角瓶中，加 1015 mL 丙酮，在振荡器上振 荡 30 min，过滤于 100 mL 分液漏斗中，残渣用丙酮洗涤四次，每次 4 mL，用 少许丙酮洗涤漏斗和滤纸，合并滤液 3040 mL，加石油醚 20 mL，摇动数次， 放气。振摇 1 min，加 20 mL 硫酸钠溶液（20 g/L） ，振摇 1 min，静置分层， 弃去下层水溶液。用滤纸擦干分液漏斗颈内外的水，然后将石油醚液缓缓放出， 经盛有约 10 g 无水硫酸钠的漏斗，滤入 50 mL 三角瓶中。再以少量石油醚分三 次洗涤原分液漏斗、 滤纸和漏斗， 洗液并入滤液中， 将石油醚浓缩， 移入 10 mL 具 塞试管中，定容至 5.0 mL 或 10.0 mL。 具 塞试管中，定容至 5.0 mL 或 10.0 mL。 512 称取具有代表性的乳样品 2.00 g，于 10 mL 具塞试管中，加 4 mL 丙 酮，振摇 1 min，加 4 mL 石油醚，振摇 1 min。静置分层。将上层石油醚溶液 移入另一 25 mL 具塞试管中，再加 1 mL 石油醚于原试管中，不摇。取出上层石 油醚合并于 25 mL 试管中，重复两次。再加与石油醚等体积的硫酸钠溶液（20 g/L ） ，摇混，分层。将上层石油醚溶液取出经无水硫酸钠滤入 10 mL 具塞试管 中，再加 1 mL 石油醚于原 25 mL 试管中，不摇。取出上层液合并于 10 mL 试管 中，重复两次。提取液定容至 4.0 mL。 512 称取具有代表性的乳样品 2.00 g，于 10 mL 具塞试管中，加 4 mL 丙 酮，振摇 1 min，加 4 mL 石油醚，振摇 1 min。静置分层。将上层石油醚溶液 移入另一 25 mL 具塞试管中，再加 1 mL 石油醚于原试管中，不摇。取出上层石 油醚合并于 25 mL 试管中，重复两次。再加与石油醚等体积的硫酸钠溶液（20 g/L ） ，摇混，分层。将上层石油醚溶液取出经无水硫酸钠滤入 10 mL 具塞试管 中，再加 1 mL 石油醚于原 25 mL 试管中，不摇。取出上层液合并于 10 mL 试管 中，重复两次。提取液定容至 4.0 mL。 513 称取具有代表性的均匀食用油样品 0.50 g 以石油醚溶解于 10 mL 试 管中，定容至 10.0 mL。 513 称取具有代表性的均匀食用油样品 0.50 g 以石油醚溶解于 10 mL 试 管中，定容至 10.0 mL。 52 净化 52 净化 5.0 mL 提取液加 0.50 mL 浓硫酸，盖上试管塞。振摇数次后，打开塞子放 气，然后振摇 0.5 min，于 1 600 r/min，离心 15 min，上层清液，供气相色谱 法分析用。 5.0 mL 提取液加 0.50 mL 浓硫酸，盖上试管塞。振摇数次后，打开塞子放 气，然后振摇 0.5 min，于 1 600 r/min，离心 15 min，上层清液，供气相色谱 法分析用。 53 测定 53 测定 531 气相色谱参考条件 531 气相色谱参考条件 5311 色谱柱：内径 34 mm，长 1.22 m 的玻璃柱，内装涂以 OV-17 （15 g/L）和 QF-1（20 g/L）的混合固定液的 80100 目硅藻土。 5311 色谱柱：内径 34 mm，长 1.22 m 的玻璃柱，内装涂以 OV-17 （15 g/L）和 QF-1（20 g/L）的混合固定液的 80100 目硅藻土。 5312 Ni-电子捕获检测器：汽化室温度：215；色谱柱温度：195； 检测器温度：225；载气（氮气）流速：90 mL/min；纸速：0.5 cm/min。 5312 Ni-电子捕获检测器：汽化室温度：215；色谱柱温度：195； 检测器温度：225；载气（氮气）流速：90 mL/min；纸速：0.5 cm/min。 532 测量与计算 532 测量与计算 电子捕获检测器的线性范围窄，为了便于定量，选择样品进样量使之适合 各组分的线性范围。根据样品中六六六、滴滴涕存在形式，相应的制备各组分 电子捕获检测器的线性范围窄，为了便于定量，选择样品进样量使之适合 各组分的线性范围。根据样品中六六六、滴滴涕存在形式，相应的制备各组分 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 19960901 实施 GB/T 5009.191996 的标准曲线，从而计算出样品中的含量。 的标准曲线，从而计算出样品中的含量。 六六六、滴滴涕及异构体或代谢物含量按式（1）计算。 六六六、滴滴涕及异构体或代谢物含量按式（1）计算。 1000)/( 1000 121 1 1 = VVm A X（1） （1） 式中：X 式中：X1样品中六六六、滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量，mg/kg； 1样品中六六六、滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量，mg/kg； A1被测定用样液中六六六或滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含 量，ng； 被测定用样液中六六六或滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含 量，ng； V1样品净化液体积，mL；样品净化液体积，mL； V2样液进样体积，L；样液进样体积，L； m1样品质量，g。样品质量，g。 结果的表述：报告平行测定的算术平均值的二位有效数。 533 色位有效3 色谱图 出峰顺序：1、2、3、4 为-666、-666、-666、-666，5、6、7、8 为 p, 结果的表述：报告平行测定的算术平均值的二位有效数。 533 色位有效3 色谱图 出峰顺序：1、2、3、4 为-666、-666、-666、-666，5、6、7、8 为 p, -DDE、o, -DDE、o, -DDT、p, -DDT、p, -DDD、p, -DDD、p, -DDT -DDT pppp 534 允许差 相对相差15%。 第二篇 薄层色谱法（第二法） 6 原理 样品中六六六、滴滴涕经有机溶剂提取，并经硫酸处理，除去干扰物质， 浓缩，点样展开后，用硝酸银显色，经紫外线照射生成棕黑色斑点，与标准比 较，可概略定量。 7 试剂 除同 3.13.8 外，还需以下试剂。 71 氧化铝 G：薄层色谱用。 72 硝酸银溶液（10 g/L） 。 73 硝酸银显色液：称取硝酸银 0.050 g 溶于数滴水中，加苯氧乙醇 10 mL， 加 30%（V/V）过氧化氢溶液 10L，混合后贮于棕色瓶中，放冰箱内保存。 74 六六六、滴滴涕标准使用液：各吸取六六六、滴滴涕标准溶液（3.8）2.0 mL，分别移入 10 mL 容量瓶中，各加苯至刻度，混匀。每毫升含农药 20g。 8 仪器 除同 4.14.6 外，还需以下仪器。 81 薄层板涂布器。 82 玻璃板：5 cm 534 允许差 相对相差15%。 第二篇 薄层色谱法（第二法） 6 原理 样品中六六六、滴滴涕经有机溶剂提取，并经硫酸处理，除去干扰物质， 浓缩，点样展开后，用硝酸银显色，经紫外线照射生成棕黑色斑点，与标准比 较，可概略定量。 7 试剂 除同 3.13.8 外，还需以下试剂。 71 氧化铝 G：薄层色谱用。 72 硝酸银溶液（10 g/L） 。 73 硝酸银显色液：称取硝酸银 0.050 g 溶于数滴水中，加苯氧乙醇 10 mL， 加 30%（V/V）过氧化氢溶液 10L，混合后贮于棕色瓶中，放冰箱内保存。 74 六六六、滴滴涕标准使用液：各吸取六六六、滴滴涕标准溶液（3.8）2.0 mL，分别移入 10 mL 容量瓶中，各加苯至刻度，混匀。每毫升含农药 20g。 8 仪器 除同 4.14.6 外，还需以下仪器。 81 薄层板涂布器。 82 玻璃板：5 cm20 cm。 83 展开槽：内长 25 cm，宽 6 cm，高 4 cm。 84 玻璃喷雾器。 85 紫外线杀菌灯：15W。 86 微量注射器或血色素吸管。 9 分析步骤 91 提取 同 5.1。 20 cm。 83 展开槽：内长 25 cm，宽 6 cm，高 4 cm。 84 玻璃喷雾器。 85 紫外线杀菌灯：15W。 86 微量注射器或血色素吸管。 9 分析步骤 91 提取 同 5.1。 中华人民共和国卫生部 19960619 批准 19960901 实施 GB/T 5009.191996 92 净化 92 净化 10 mL 提取液浓缩于 1 mL，加 0.1 mL 浓硫酸，盖上试管塞振摇数下，打开 塞子放气，再振摇 0.5 min，于 1600 r/min，离心 15 min。上层清液供薄层谱 分析。 10 mL 提取液浓缩于 1 mL，加 0.1 mL 浓硫酸，盖上试管塞振摇数下，打开 塞子放气，再振摇 0.5 min，于 1600 r/min，离心 15 min。上层清液供薄层谱 分析。 93 测定 93 测定 931 薄层板的制备 931 薄层板的制备 称取氧化铝 G 4.5 g，加 1 mL 硝酸银溶液（10 g/L）及 6 mL 水，研磨至糊 状，立即涂在三块 5 cm 称取氧化铝 G 4.5 g，加 1 mL 硝酸银溶液（10 g/L）及 6 mL 水，研磨至糊 状，立即涂在三块 5 cm20 cm 的薄层板上，涂层厚度 0.25 mm，于 100烘 0.5 h，置于干燥器中，避光保存。 20 cm 的薄层板上，涂层厚度 0.25 mm，于 100烘 0.5 h，置于干燥器中，避光保存。 932 点样 932 点样 离薄层板底端 2 cm 处，用针划一标记。在薄层板上点 110 L，样液和 六六六、滴滴涕标准溶液，一块板可点 34 个。中间点标准溶液，两边点样品 溶液。也可用滤纸移样法点样。 离薄层板底端 2 cm 处，用针划一标记。在薄层板上点 110 L，样液和 六六六、滴滴涕标准溶液，一块板可点 34 个。中间点标准溶液，两边点样品 溶液。也可用滤纸移样法点样。 933 在展开槽中预先倒入 10 mL 丙酮-己烷（1+99）或丙酮-石油醚（1+99） 。 将经过点样的薄层板放入槽内。当溶剂前沿距离原点 1012 cm 时取出，自然 挥干。 933 在展开槽中预先倒入 10 mL 丙酮-己烷（1+99）或丙酮-石油醚（1+99） 。 将经过点样的薄层板放入槽内。当溶剂前沿距离原点 1012 cm 时取出，自然 挥干。 934 显色 934 显色 将展开后的薄层板喷以10 mL硝酸银显色液， 干燥后距紫外灯8 cm处照10 20 min，六六六、滴滴涕等全部显现棕黑色斑点。 将展开后的薄层板喷以10 mL硝酸银显色液， 干燥后距紫外灯8 cm处照10 20 min，六六六、滴滴涕等全部显现棕黑色斑点。 10 计算 10 计算 1000)/( 1000 342 2 2 = VVm A X（2） （2） 式中：X式中：X2样品中六六六、滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量，mg/kg； 2样品中六六六、滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量，mg/kg； A2被测定用样液中六六六或滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含 量，g； 被测定用样液中六六六或滴滴涕及其异