乙型肝炎HBsAg、HBsAb共存的血清学模式与HBV.doc

乙型肝炎hbsag、hbsab共存的血清学模式与hbv鱼堂垒24卷笫5期jotradh)immmmlogy20114_3讨论哮喘是目前世界上威胁公共健康最主要的慢性肺疾病,也是一种发病率,死亡率都较高且不易根治的疾病,对人类的健康构成了极大的威胁.研究表明,哮喘是以ige为介导的i型变态反应性疾病,患者血清中的总ige水平明显高于正常值,因此控制血清总ige水平有利于哮喘病的治疗.目前国内外对哮喘的治疗主要为药物疗法和免疫疗法.临床上常用治疗药物为吸人型糖皮质激素,虽然能有效控制轻,中度哮喘,但对重度患者效果不明显,存在副作用.免疫疗法虽然见效快,但其给药剂量和疗程控制不易控制,易发生严重的不良反应甚至出现休克死亡.血液净化可有效的清除血液中的致病因子,且副作用较少.利用血液净化技术除去血液中含量过高的ige是治疗哮喘行之有效的方法,而方法的核心就是免疫吸附剂.免疫吸附法相比于其它血液净化法具有治疗剂量大,不丢失血浆成分,不需要置换液,可消除传播疾病的可能等优点,所以免疫吸附法在哮喘及变态反应性疾病的治疗上具有广泛的应用前景和优势.目前我国用于临床治疗的免疫吸附剂主要是葡萄球菌蛋白a,虽然它对igg有较强的选择性,清除率达到95%,但其对ige的清除率仅为7%,而其最大的缺点就是价格昂贵,直接限制其在临床上的应用.同时蛋白a易受污染,导致吸附柱不易保存;其次配基存在脱落现象,对人类有一定的副作用.针对这种生物大分子配基的种种局限性,大连理工大学研制出新型的mep吸附剂,本文实验就是采用这种新型吸附剂进行的.实验表明,在评价mepsepharose的l5个病人血清样本中,经过1h吸附,血清中ige去除率均>65%,其中11个血-597-清样本的ige检测为阴性,而对于初始浓度高达25400iu/ml的样品,mep.sepharose对ige的清除效果达到了93.7%.mep.sepharose对ige的清除效果要明显优于pasepharose.相同吸附条件下,对于pa.sepharose,ige的清除效果总体较差,这主要是由于蛋白a与ige的亲和能力较弱.15个被测样品中只有1个达到>65%的去除率,且有两个样品中i没有被去除,而且ige去除效果与初始浓度并没有联系,如表2所示,对于初始浓度为305,762,2040iu/ml的样品,其去除率分别为91.8%,29.3%和41.5%,所以导致a蛋白吸附剂效果不稳定的原因可能来源于不同病人的个体差异,mepsepharose不仅能够有效去除ige,且它最大的优点就是价格便宜,易于保存,其特异选择性也较好,可重复使用.因此,这种新型吸附剂在临床上将会有广泛的应用前景,但其安全性还有待于下一步更深入的研究.参考文献1杜琼,李敏,许贵平,等.高亲和力lge受体13链基因与儿童哮喘的相关性研究j.西部医学,2006,18(1):19-21.2borishl,chippsb,denizy,eta1.t0sefumiselevelsinalargecohortofpatientswithsevereordifficultto-treatasthmaj.art.allergyasthmaimmunol,2005,95(3):247-253.3peterssp.asthmatreatmentinthe21stcentury:whtatsnext?j.clinrevallergyimmunol,2004,27(3):197-205.4陈丽娟.支气管哮喘药物治疗进展j.中国全科医学,2006,19(6):486487.5蔡颖.支气管哮喘的免疫治疗进展j.世界临床药物,2006,27(1):29-31.6havingaw.riskofasthmaj.lancet,2001,357(9252):313-314.(2011-08-02收稿)乙型肝炎hbsag,hbsab共存的血清学模式与hbvdna相关性探讨浙江省余姚市人民医院检验科(315400)黄其俊吴坚敏乙型肝炎病毒血清学标志物是乙型肝炎临床诊断和治疗的重要依据,不同的血清标志物模式具有不同的临床意义.在hbv感染者血清标志物中,hbsag和hbsab是对应的一组抗原抗体.通常hbsag消失后hbsab产生,但近几年临床实验室经常会遇到hbsag和hbsab同时阳性的不常见模式.本文收集我院2009年3月2011年4月门诊及住院患者中出现此模式的标本121例,对其血清标志物模式与hbvdna的关系进行探讨.1对象和方法1.1标本来源收集我院2009年3月2011年4月门诊及住院患者中hbsag和hbsab同时阳性的标本,同时测定hbvdna.按hbeag结果分为hbeag阴性组和hbeag阳性组,其中阴性组4l例(男25,女16),年龄(1265)岁;阳性组80例(男52,女28),年龄(873)岁.同时随机选取hbsag阳性,hbsab阴性的标本146例作为上述两组的对照,其中hbeag阴性组54例(男33,女21),年龄(867)岁;hbeag阳性组92例(男57,女35),年龄(968)岁.i.2仪器和试剂hbv血清标志物检测仪器为雅培公司architecti2000sr全自动免疫分析仪,试剂盒为该公司配套试剂;hbvdna检测仪器为罗氏lightcycler全自动荧光定量pcr仪,试剂为中山大学达安基因股份有限公司生产.1.3测定方法hbsag和hbsab检测采用化学发光微粒子免疫分析技术(cmia),全自动操作.hbvdna定量采用荧光定量聚合酶链反应(fqpcr),按程序操作,试剂的检测下限为10iu/llll,>1.010iu/ml时判为阳性.1.4统计学处理采用spss13.0软件包进行分析处理.2结果2.1为方便表述,以,分别代表hbsag,hb.sab,hbeag,hbeab,hbcab,并以阳性项目出现的序号作为该模式的代码.hbsag0.05iu/ml为阳性;hbsablomiu/ml为阳性;hbeag1.os/co为阳性;hbeab1.0s/co为阳性;hbcab1.os/co为阳性.按hbeag结果分为hbeag阴性组和hbeag阳性组,fqpcr法测得的hbvdna采用对数平均值方法计算hbvdna的平均拷贝数.598-在hbsag,hbsab共存的121例患者中,hbvdna阳性率为80.17%o7/21),hbeag阳性者占66.12%(80/121),结果见表1.2.2hbs.和hbsab同时阳性患者hbsag,hbsab定量值的分布,见表2.2.3hbsag和hbsab同时阳性患者与对照组dna定量结果对hbeag阴性患者,其hbvdna存在较高水平复制,其中ttbvdna>1.010iu/ml的阳性率为34.15%,而对照组仅为12.96%,两组hbvdna结果差异有统计学意义(p<0.05);hbeag阳性的两组hbvdna均存在高水平复制,两组结果差异无统计学意义(p>0.05).hbeag阴性组和阳性组hbvdna结果差异有统计学意义(p<0.01).表1121例皿bsag和tlbsab同时阳性患者的血清标志物模式,分布及itbvdna结果分组模式n(%)dna阳性数(%)hbvdna(10)表2ltbg和isab同时阳性患者itbsag,itbb定值的分布表3哪sag和皿b同时阳性患者与对照组dna定量结果>1.010253.66(22/41)29.63(16/54)93.75(75/80)85.s7(79/92)>1.0lo534.15(14/41)12.96(7/54)72.50(58/80)66.30(61/92)3讨论目前hbsag常作为hbv感染的重要指标,而hbsab是其特异的中和抗体.hbsab是由hbsag暴露的抗原决定簇引起机体产生的一种特异性抗体,它是一种保护性抗体,能中和ttbsag,具有防御hbv感染的作用.hbsab阳性一方面意味着hbv可能已被清除,人体产生了保护作用;另一方面表明病情恢复,血清一般不具有传染性.根据传统的hbv血清学指标变化规律,在感染早期,hbsag首先出现,hbsab一般于hbsag消失后开始在血液中出现,因此血清中hbsag和ttbsab一般不会同时存在.但近几年,越来越多的临床迹象和实验室结果发现,确有一些患者血清标志物hbsag和ttbsab同时阳性.l璃s和ttbsab同时阳性者,本文可见其血清标志物出现多种模式.从表2的hbsag,hbsab定量值分布发现,hbsag含量>100iu/ml占79.34%,hbsab含量<100miu/:2011年第24卷第5期jofradifnl占83.47%,说明这类患者中hbsag含量常处于较高水平,而ttbsab的含量却相反,多数介于(103o)mlu/ml.本文使用architecti2000sr全自动免疫分析仪,基本上避免了因操作误差而引起的假阳性情况,且双阳性者均作了复查处理.这种双阳性现象笔者认为主要有以下几种解释:hbv的s区或前s区基因变异,a抗原决定簇第145位氨基酸甘氨酸被精氨酸所取代,变异株所产生的hbsag可逃避原野生株所诱生的hbsab的中和作用而与其共存.在慢性乙肝患者体内,病毒长期处于细胞的免疫压力下,可能在体内或细胞免疫表位区发生变异,同一个体同时存在野生株和不同的突变株群体,当突变株的量超过野生株时,针对野生株的hbsab与突变株的hbsag就出现共存现象.前后有不同亚型的hbv感染.有一部分可能属于hbv感染恢复期所形成的hbsag一抗hbs免疫复合物.接种乙肝疫苗或乙型肝炎免疫球蛋白后,虽有正常的抗.hbs应答但缺乏对突变株的中和性,仍能感染a决定簇变异的免疫逃逸病毒株,从而与抗一hbs共存.有报道称hbv-2是一种新的嗜肝病毒,其ttbsagdna序列与hbv有同源性,故可检出hbsag,但其自动或被动产生的hbsab不能中和hb,这就导致hbsag与hbsab同时阳性.从表1,表3可见,hbsag和hbsab同时阳性的患者hbvdna阳性率高达80.17%,血清学模式以hbeag阳性者为多见,占66.12%.nbeag阳性的两组hbvdna均存在高水平复制,两组结果无显着性差异(p>0.05),但hbeag阳性组的hbvdna的定量值显着高于ttbeag阴性组(p<0.05),说明这种共存模式中,hbeag与hbvdna有良好的相关性.hbeag阳性患者,绝大多数hbvdna呈定量阳性,说明病毒复制活跃,传染性强.值得注意的是,hbeag阴性组hbvdna复制水平远高于单纯hbsag阳性的对照组(p<0.05).对于nbsag和hbsab同时阳性的hbeag阴性患者而言,其hbvdna仍存在较高水平复制,其中>1.0x10iu/ml的阳性率为34.15%,这类患者应高度怀疑hbv前cjc区的基因突变导致hbeag阴性,其可能不仅存在前s/s区的突变,而且同样可能存在前c/c区的基因突变,抗一hbe阳性出现并不意味着dna停止复制或传染性消失.所以这类hbeag阴性的慢性乙型肝炎患者,hbsag和hbsab同时阳性并不代表乙肝肝炎恢复,相反此类患者往往持续存在hbv的复制和突变,更容易造成肝脏的慢性损伤.参考文献1陈远林,秦立新,张仁生,等.乙肝病毒血清学标志物检出模式及其临床报告j.实用预防医学,2005,12(4):834-836.2彭文伟.传染病学m.