溶剂热法从银杏叶中提取银杏黄酮的研究.pdf

收稿日期： 基金项目： 滨州学院科学基金资助项目（ ） 作者简介： 李大枝（ ） ， 女， 硕士， 主要从事中草药有效成分的提取和无机纳米材料制备的研究 ： 文章编号： （ ） 溶剂热法从银杏叶中提取银杏黄酮的研究 李大枝， 肖忠峰， 谢彦， 党艳秋， 韩国君 （ 滨州学院化学与化工系，山东 滨州 ） 摘要： 采用溶剂热法提取银杏黄酮， 利用高效液相色谱进行含量分析， 通过正交实验对影响提取率的主要因素进 行了考察。研究结果表明溶剂热法提取银杏黄酮的最佳条件为： 乙醇体积分数 ， 溶剂体积对样品质量比为 ? ， 热处理温度和时间为 下加热 。与传统的热回流提取法相比， 溶剂热法在提取银杏黄酮时具有提 取率高、 操作简便、 无污染等优点。 关键词： 银杏叶； 黄酮； 溶剂热提取 中图分类号： 文献标志码： ， ， ， ， （ ， ， ， ， ） ： ， ： ， ， ， ： ； ； 引言 银杏黄酮具有扩张血管、 降低血脂、 抗氧自由基 等药理作用 ， 以银杏叶黄酮类化合物提取物制成 生物医药深受生物制药研究的重视 。制剂中黄 酮类及其他有效成分含量的高低， 直接关系到制剂 的品质， 而有效成分的高低与银杏叶的提取方法有 直接的关系。超临界萃取以其快速、 高效、 节能、 环 保等优势为中草药分离提取所利用 。 等 利用超临界萃取技术对银杏黄酮的提取进行了研 究， 探索出了最佳工艺参数， 但同时指出， 若将超临 界萃取技术直接用于银杏叶的处理会消耗大量的二 氧化碳， 在经济上不可行。由此看来， 在现代分离技 术中中草药的前期处理， 即有效成分的高效提取至 关重要。本文用溶剂热法处理银杏叶， 探索从中高 效提取银杏黄酮的条件， 为深入开发这一产品奠定 基础。 溶剂热法是指在特制密封容器中， 以有机溶剂 为反应介质， 通过对体系加热进行合成的一种方法， 该法中溶剂因在密闭条件下而表现出高压、 高传质 速率等优势性。利用这一原理， 将该方法用作银杏 叶黄酮的提取， 取得了较理想的效果。 实验部分 主要试剂和仪器 聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜； 高效液相色谱； 检测器； 电热干燥箱（ 灵 第 卷第 期 山东大学学报（ 理学版） （ ） 年 月 敏度 ） 。 乙醇（ ， 分析纯） ； 磷酸（ 色谱醇） ； 甲醇（ 色谱 醇） ； 高纯水； 槲皮素、 山柰酚、 异鼠李素 （ 上海中药 标准化研究中心） ； 银杏叶（ 购于瑞丰大药店） 。 溶剂热法提取银杏黄酮及分析液的准备 称取 磨细的银杏叶粉末， 装入 聚四 氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中， 加入一定体积分数 的乙醇 ， 将反应釜密封好， 置于干燥箱， 在一 定温度下按设定的时间加热， 待自然冷至室温后取 釜， 将提取液抽滤， 取滤液 加入 体积比 为 的盐酸， 在 的水浴中水解 后迅速 冷至室温， 用甲醇定容于 容量瓶得分析液。 银杏叶中银杏黄酮提取率的测定方法 高效液色谱（ ） 条件 色谱柱： ， ； 流动相： 甲醇 磷酸（ ） ； 流速： ? ； 检测波长： ； 柱温： 。 对照品溶液的制备 准确称取槲皮素、 山柰酚、 异鼠李素标准品各 ， 以甲醇定容于 容量瓶作为储备液， 分别 准确移取一定量的储备液以甲醇定容于 容量 瓶得槲皮素、 山柰酚、 异鼠李素质量浓度分别为 ， ， ? 对照品混合工作液。 提取率的测定和计算 取对照品混合工作溶液和分析液， 分别进样 ， 在 下进行检测， 图 和图 分别给出 了对照品混合工作液和提取液的 图， 由图可 知， 各苷源分离效果较好。根据各组分峰面积积分 值， 以槲皮素（ ） ， 山柰酚（ ） ， 异鼠李素（ ） 为对照， 分别计算样品中槲皮素、 山柰酚、 异鼠李素的含量。 根据以上所得含量比分别求算出槲皮素（ ） 、 山柰酚（ ） 、 异鼠李素（ ） 的浓度， 然后根据式： 求算总黄酮苷的浓度， 再根 据式子： （ 为计算得到的提取液中总黄酮苷 的浓度） 得出从每克银杏叶提取出总黄酮苷的质量。 图 对照品混合液的 谱图 图 提取液的 谱图 结果与讨论 料液比对提取率的影响 量取相同体积的乙醇体积分数 的醇、 水混 合溶剂， 分别称取不同质量的银杏叶粉末进行提取 分析， 发现当料液比为 ? 时， 提取效果最佳， 故实验中采用 ? 的料液比。 正交实验 银杏叶中黄酮的提取受很多因素的影响， 提取 剂、 提取时间、 提取温度等都是重要因素， 在考虑环 境友好的前提下， 采用乙醇和水的混合液作为提取 剂， 考察提取剂中乙醇的体积分数、 提取时间、 提取温 度 个因素， 经单因素预实验分析， 建立正交实验。 表 溶剂热法实验的因素 水平和 （ ） 正交实验结果 （ ） 实验号及 因素分析 因素 提取温度? （ ）提取时间? 提取剂中乙醇的体积分数? （ ） 实验结果（ 槲皮素含量） ? （ ） 较优位级 因素次序 山东大学学报（ 理学版）第 卷 从正交实验结果来看， 提取剂中乙醇的体积分 数对银杏黄酮的提取率影响最大， 而提取温度次之， 提取时间对提取率的影响最小。按正交表实验结果 可知， 最佳提取条件组合为 ， 即在料液比为 ? 时， 利用溶剂热法从银杏叶中提取银杏黄 酮的最佳的条件是提取剂中乙醇的体积分数为 ， 在 下提取 。 验证及对比实验 按正交表实验结果， 选用最佳提取条件组合 。在此条件下重复实验 次， 进行验证实验， 结果见下表 。 表 验证实验结果 提取条件实验序号 提取率 （ 总黄酮含量） ? （ ） 由表 可知， 银杏叶中银杏黄酮的提取率平均 为 ? ， 五次结果的标准偏差 为 ， 变 异系数 为 ， 具有合理性。 同时， 通过实验对溶剂热提取法与传统热回流 方法进行了对比： 选择溶剂体积对样品质量比为 ? ， 用 乙醇做提取剂， 分别利用溶剂热法 与传统热回流法在 提取 ， 以同样方法水解 后， 以对照品混合液为对比、 用高效液相色谱进行定 量分析。计算结果为： 传统热回流条件下， 银杏叶中 银杏黄酮苷的提取率为 ? ， 而采用溶剂热 法， 银杏叶中银杏黄酮苷的提取率为 ? ， 明 显高于传统热回流法。 结论 应用溶剂热法从银杏叶中提取银杏黄酮， 利用 高效液相色谱仪对溶剂热法提取液中银杏黄酮含量 进行分析， 采用正交实验对提取效果进行了研究。 在乙醇体积分数 ， 溶剂体积对样品质量比为 ? ， 加热 的条件下， 银杏黄酮提取率最 佳。通过对比溶剂热提取同传统热回流提取工艺在 提取银杏黄酮时的差异， 证明溶剂热法在提取银杏 黄酮时具有提取率高、 操作简便、 对环境无污染等优 点。同时， 若将溶剂热法与超临界 萃取技术联 用， 将推动超临界 萃取技术在中草药提取中的 应用。 参考文献： 李红雄，彭晓春， 蒋剑波 银杏根中黄酮类化合物的提 取及其含量测定 吉首大学学报（ 自然科学版） ， ， （ ） ： 惠俊峰， 惠有为， 米钰， 等银杏黄酮苷提取方法研究 西北农业学报， ， （ ） ： 张春秀， 胡小玲， 岳红， 等 银杏黄酮类化合物的提取分 离 应用化学， ， （ ） ： 王靖， 邹雨佳， 唐华澄， 等 高效液相色谱法（ ） 测定 银杏黄酮含量 食品工业科技， ， （ ） ： ， ， ， ， ： 张玉祥， 邱蔚芬 超临界萃取银杏叶有效成分的工 艺研究 中国中医药科技， ，