《Bpcl应用举例》PPT课件.ppt

微弱发光测量仪器 可以用于各种发光分析： 超微弱发光分析 生物发光分析 自由基、抗氧化剂分析 化学发光分析 发光免疫分析,科学问题-样品设计-仪器测量,生物发光传感器,化学发光传感器,电化学发光传感器,化学发光免疫传感器,生物芯片,？,发光检测试剂盒,在生物学、医学 农学、食品科学中的应用,PMA刺激巨嗜细胞不仅产生活性氧 还有NO,第二峰来自 NO 比第一峰晚出现几分钟,Cytochrome c (细胞色素 c)对线粒体 中超氧阴离子和过氧化氢的生成和清除作用,过氧化氢： luminol 加 horseradish peroxidase 诱发的化学发光 超氧阴离子：lucigenin 诱发的化学发光 以heart muscle preparation（HMP）为材料测量结果如下： 不含细胞色素c超氧阴离子和过氧化氢的产量提高7-8倍 再加入细胞色素c则超氧阴离子和过氧化氢的产量恢复至低水平,J.B.C 生物物理所 徐建兴,茶多酚对于羟自由基（OH）引起的 DNA损伤发光有抑制作用,随着茶多酚浓度增加DNA损伤发光逐渐减弱,抗氧化剂对DNA损伤发光动力学影响 分三种类型,发光峰降低,发光峰后移,发光峰降低又后移,双环醇对刀豆蛋白A所致小鼠肝细胞核DNA损伤的保护作用,医科院药物所 刘耕陶 院士,化学发光法测定双环醇体内给药对Con A损伤小鼠肝细胞核在体外对CuS04一邻啡罗啉一维生素CHz02的影响：由图3可以看出，与正常对照组小鼠相比，注射Con A组小鼠肝细胞核DNA对该系统损伤的敏感性降低表现为后峰明显降低，曲线下面积显著减少。而于注射Con A前预先分别给予双环醇50 mgkg及150 mgkg 3次组小鼠肝细胞核DNA对该体系损伤的敏感性增高，后峰明显升高，曲线下面积显著增加。,葛根多糖对PC12细胞增殖的损伤作用,田亚平 教授 301医院,用次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶的化学发光体系测定细胞外液中的SOD酶活性。测定体系总体积为1 ml，鲁米诺浓度为16 mmolml-1，黄嘌呤氧化酶5 ml加入鲁米诺中，1 min时的化学发光值为空白，再加入10 ml不同浓度的多糖，浓度分别为0、0001、001、01、10 mgml-1 ，避光平衡1 min，记录1 rain时的化学发光值，并计算抑制率(温度保持存37度）,光果甘草毛状根培养过程中对活性氧清除能力和总黄酮含量的变化,丁家宜 教授 中国药科大学,采用化学发光法，分析了光果甘草毛状根培养过程中对3种活性氧(ROS：02.、HO和H202)清除能力的动态变化，并测定了培养过程中总黄酮含量的动态变化。实验结果表明，毛状根在对数生长期(2028 d)对 3种ROS都有很强的清除能力，在生长停滞期(2940 d)对HO和H202的清除能力仍维持较高的水平，而对02.的清除能力随培养时间的延长逐渐下降：总黄酮含量在对数生长期呈现增加的趋势，至31 d时达到最高含量(0.78)，随培养时间的延长含量逐渐降低。,白细胞呼吸暴发形态学改变及银杏叶提取物干预作用 （徐州心血管所，医科院阜外医院）,微粒子化学发光免疫测定促甲状腺素 敏感性方法的建立与应用,王永宁,中国科学院理化技术研究所,Fig 5 Comparison of determination serum TSH between CLEIA and ACS-180 system,将北京大学第三医院经丫啶酯标记的发光ACS-180系统测定并确诊的105例正常人、25例甲亢患者、及42例甲低患者的血清样品，用CLEIA法平行检测TSH的浓度，结果完全相符。对64例用CLEIA法测定的结果与丫啶酯标记的直接化学发光免疫分析（CLIA）测定的结果进行相关性分析的结果见图5。相关方程为Y = - 0.04 1.05 X（Y为CLEIA法测定的TSH的浓度，X为CLIA法测定的TSH的浓度）相关系数r = 0.98 ,两种方法具有良好的相关性。,微粒子化学发光免疫测定促甲状腺素敏感性方法的建立与应用,王永宁,中国科学院理化技术研究所,图1 酶促化学发光反应的动力学曲线 Fig 1 Kinetics curve of enzyme -accelerating chemilumine-scence reaction a: 50 mIU/L TSH ; b: 25 mIU/L TSH; c: 10 mIU/L TSH.,图4 TSH标准曲线 Fig 4 TSH calibration curve,J.Agric.Food Chem. 2001,49,2137-2141,indoxyl-b-glucuronide (IBG)特异性检测羟自由基及其应用于食品水提物羟自由基清除效能,indoxyl-b-glucuronide (IBG)特异性检测羟自由基及其应用于食品水提物羟自由基清除效能,Fenton试剂加indoxyl-b-glucuronide (IBG) indoxyl-b-glucuronide (IBG)被羟自由基诱导产生超弱发光，发光强度可提高2个数量级以上 indoxyl-b-glucuronide (IBG)对超氧阴离子无发光反应 反应体系中加入羟自由基淬灭剂可抑制发光，发光的降低程度可用来检测羟自由基的淬灭能力 IC50 (g/mL)：发光的抑制会饱和，使发光量达到半抑制的自由基淬灭剂浓度为监测指标 Yuans General Hospital, Taiwan 刘灿荣,胡柚皮中黄酮类化合物提取及抗氧化性研究 浙江大学 叶兴乾,利用化学发光法测定了这些黄酮类化合物的抗氧化能力，实验证明胡柚皮中黄酮类化合物作为自由基清除剂存在构一效关系，是一种良好的自由基清除剂。利用胡柚皮黄酮类化合物粗提物较好的抗氧化能力可开发许多产品，如老年功能性食品、天然化妆品、天然增味剂、天然色素等，而且它在胡柚皮中含量丰富，这对于胡柚皮的综合开发利用是极其有利的。,盐胁迫下绿豆幼苗的超微弱发光 河北大学 李光,植物的超微弱发光与其代谢生理反应密切相关。发光分析的优越在于可以在不损伤和不干扰植物生理反应的情况下，较早地了解生物系统内部的生化反应的状况，而不必进行大量的生化分析。研究方法的改进和突破对于研究植物盐胁迫机理有一定的实际意义和促进作用,杏花开放过程中超弱发光 和ATP及活性氧含量的变化 山东农业大学 杨洪强,活性氧是导致UWL产生的重要因素。综合各花期UWL衰减曲线与ATP和呼吸速率的变化，露萼期与露瓣期杏花整体代谢活性较低，所以其UWL也处于一较低的水平，发光衰减速率低。可见，杏花UWL水平及衰减趋势与花体生活力水平有更密切的关系，其新陈代谢的活跃程度是决定杏花UWL的主要因素。,杨梅果汁的抗氧化特性研 浙江大学食品科学系 陈健初,不同品种的杨梅汁对羟自由基的抑制率有较大的差异.同时可以发现,杨梅汁清除羟自由基的能力与杨梅汁中所含的酚、黄酮及花色苷等生物活性成分存在较一定的相关性,即酚类、黄酮及花色苷含量较高的杨梅品种其清除羟自由基的能力较强. 迟大种的生物活性成分含量最高,其清除羟自由基的能力也最强.,红景天提取物清除O2和OH的体外实验研究 北京联合大学 生物活性物质与功能食品北京市重点实验室,我国卫生部1991年批准红景天为新食品资源。红景天具有抗疲劳、抗缺氧、抗辐射、增强免疫力等作用。在Phen-Cu-VC-H2O2 -DNA法的检测结果中，通过检测OH攻击DNA伴随DNA氧化降解产生化学发光，不仅观察到红景天提取物清除OH的作用，而且间接反应出红景天提取物对DNA的保护作用。,番茄中抗氧化色素的提取及其 清除羟自由基能力的研究 湖南农业大学生化与发酵工程实验室 田云,通过微弱发光测量仪检测抗氧化色素清除BF的能力发现，所提取的抗氧化色素具有较强的清除BF的能力，且其清除BF的能力具有剂量效应关系。这些结果为我们更合理开发利用番茄资源提供了很好的依据。,草莓愈伤组织的超弱发光及 活性氧代谢变化的研究 中国林科院亚热带林业研究所 田 敏,取初生的不同类型的愈伤组织在相同的条件下测定它们的超弱发光强度,发现1型愈伤组织的发光值最高, 2型和3型的发光值相差不大； 通过对22和2的测定,发现相对1型愈伤组织来说,2和3型愈伤组织具有较高的活性氧水平, 3型愈伤组织22和2的的产生速率分别约是1型愈伤组织的9倍和4倍。在继代培养基上,1型愈伤组织生长得较快,2和3型则较缓慢。因此愈伤组织超弱发光的强度主要与细胞的分裂增殖及分化活动有关,而与活性氧的产生水平无太大的相关性。,分析生物发光 监测环境污染,应用发光杆菌检测京杭运河水体污染 杭州大学 黄纯农,纳米材料催化化学发光法 测定车间废气中的丁酮 北京联合大学 周考文,丁酮在纳米级MgO和Al203表面都有较强的发光现象，但在MgO与Al203 摩尔比为4:1的混合物上有较好的选择性。分析波长为440 nm；测定温度为335左右；载气流速为145 mLmin；方法的检出限为6.2 mgm3；线性范围为201000 mgm3 ；相关系数为0.9992。应用本法可快速测定车间空气中的丁酮。,研究植物生理 鉴定作物品质,大豆发芽过程 超弱发光强度变化,发芽期大豆Lox-1缺失体 发光强度明显高于正常大豆 农科院 种质所,超弱发光测量挑选鉴定无豆腥味大豆原料,几种蔷薇带茎叶簇冷冻后 荧光增强倍率,植物解冻发光增强比率与抗寒性能有关,林业大学,研究发光分析化学,Determination of Sulpiride by Capillary Electrophoresis with End - Column Electrogenerated Chemiluminescence Detection,长春应化所 汪尔康,Clinical Chemistry 2002,New technique for capillary electrophoresis directlycoupledwith end-column electrochemiluminescence detection,长春应化所 汪尔康,Electrophoresis 2002,安乃近在吐温80和聚乙二醇-400增敏 介质中的化学发光强度比较 A0.1 g /ml 安乃近在吐温80增敏介质中的化学发光强度。 B0.1 g /ml安乃近在乙二醇-400增敏介质中的化学发光强度,相 对 发 光 强 度,相 对 时 间 坐 标,清华大学 张新荣,Development of a Gas Sensor Utilizing Chemiluminescence on Nanosized Titanium Dioxide,清华大学 张新荣,Analytical Chemistry 2002,Plant Tissue-based Chemiluminescence Flow Biosensor for Glycolic Acid,陕西师大 章竹君,Analytical Chemistry 2001,Electrochemiluminescent Detection of Chiorpromazine by Selective Preconcentration at a Lauric Acid-modified Carbon Paste Electrode Using Tris (2,2-bipyridine)ruthenium(ii),中科院长春应化所 董绍俊,Analytical Chemistry 2000,Chemiluminescence determination of tetracycline based on radical production in a basic acetonitrilehydrogen perox