课件：其他有机毒物及其代谢产物的测定.ppt

第八章 其他有机毒物及其代谢产物的测定,亢延飞,第一节 五氯酚 理化性质 五氯酚（pentachlorophenol，PCP）为白色晶体，易溶于碱性水溶液，易溶于有机溶剂和植物油。 五氯酚钠（sodium pentachlorophenate）的工业品为浅黄色鳞片状晶体，有臭味，易溶于水、醇和丙酮，不溶于苯和石油。五氯酚钠水溶液呈碱性，加酸即析出五氯酚。五氯酚钠溶液可与铜、铁、锌、金、汞等金属生成具有色泽的不溶性五氯酚金属盐。五氯酚及其钠盐在日光照射下均易分解。,二 代谢与生物监测指标 五氯酚及其钠盐主要用作木材、皮革、纺织品、纸张和绳索等的防腐剂，以及甘蔗、菠萝和稻田的除草剂等。工作方面，除生产者难免要与之接触以外，工人施用五氯酚及其钠盐药液对木材进行防腐处理时，也可以通过皮肤或呼吸道吸收而引起中毒。在生活中，误食、误饮被药液污染的食物或水源水，则可以造成中毒事故。 五氯酚及其钠盐经皮肤、呼吸道和肠道吸收。进入人体的五氯酚主要以原型或与葡萄糖苷酸结合的形式从尿液中排出，少量代谢成四氯化氢醌也从尿液中排出。另有一小部分结合或为结合的五氯酚从粪便中排出 。,五氯酚及其钠盐属高毒类。五氯酚及其钠盐对皮肤、眼和呼吸道粘膜有刺激作用，直接接触后可引起局部损害。某些人群流行病原调查提示接触五氯酚溶液后患鼻癌、鼻咽癌和软组织肉瘤的危险度增高。 测定尿中五氯酚及其盐的含量，便可以推测其接触量，并对五氯酚中毒诊断和鉴别有参考价值。 五氯酚及其钠盐进入体内吸收后，血中和尿中含量都增高，但尿中浓度高于血中浓度，所以，尿样常用作接触五氯酚的生物监测指标试样。,样品采集及保存 采集现场尿样或晨尿，将尿液收集在清洁的硬质玻璃瓶或聚乙烯瓶中，可用于直接测定游离五氯酚。,尿中五氯酚的测定 尿中五氯酚及其钠盐的测定方法有分光光度法、气相色谱法和高效液相色谱法。分光光度法主要有4-氨基安替比林分光光度法，亚甲蓝分光光度法和藏红花分光光度法。但分光光度法灵敏度较低，干扰较多。 气相色谱法包括直接气相色谱法和衍生化气相色谱法。由于五氯酚沸点高，蒸气压小，不易气化，给直接气相色谱法带来困难，故常需先将五氯酚或五氯酚钠与重氮甲烷作用生成衍生物五氯苯甲烷后，再作气相色谱测定。这样，使操作步骤比较繁琐，而且使用的试剂苯、重氮甲烷有致癌危险。 高效液相色谱分析法测定尿中五氯酚及其钠盐是较好的方法。,（一）4-氨基安替比林分光光度法 原理 尿中五氯酚或五氯酚钠在弱酸性条件下随水蒸气蒸馏出来，吸收在氢氧化钠溶液中，生成的五氯酚钠在铁氰化钾（氧化剂）存在下，与4-氨基安替比林作用生成蓝色安替比林染料，用二甲苯提取，在580nm波长处比色定量。 样品处理 取尿样, 加适量柠檬酸溶液和蒸馏水进行蒸馏，馏出液用100mL刻度烧杯接收。接收烧杯内先加入少量蒸馏水和氢氧化钠溶液。将冷凝管出口进入接收烧杯溶液中。当馏出液达到约100mL时停止蒸馏，将馏出液加水至100mL，待测。,3 样品测定 取馏出液20mL于50mL带塞试管中，加入pH = 6的柠檬酸盐缓冲液1.00mL和0.4%4-氨基安替比林溶液1.00mL，混匀。加入10%铁氰化钾1.00mL，混匀。快速加入二甲苯5.00mL，用力振摇后静置分层，取上层提取液转入比色杯，在5800nm波长处测定吸光度，按标准曲线法定量。,(二) 亚甲蓝分光光度法 1 原理 在弱碱性溶液中，五氯酚钠可与亚甲蓝定量结合生成有色化合物，萃取后的波长660nm或590 nm处进行分光光度法测定。 2 样品处理 取尿样50 mL置于蒸馏瓶中，加盐酸1 mL和数毫升饱和碳酸氢钠溶液，放数粒玻璃珠，然后进行蒸馏，待用。,3 样品测定 取10 mL馏出液于比色管中，加入亚甲蓝应用液1 mL，三氯甲烷3 mL，混合，静置分层，取三氯甲烷层于比色管中，在波长660 nm或590nm处测定吸光度，按标准曲线法定量。,（三）气相色谱 1 原理 尿样中五氯酚用正己烷提取，再用重氮甲烷甲基化试剂作用生成五氯苯甲醚，然后进行气相色谱测定。将样品与标准品在相同条件下的色谱峰的保留时间进行比较，确证尿样中是否含五氯酚，如含五氯酚，采用标准曲线法以峰高定量。,3 样品处理和测定 取尿样于具塞离心管中，加氢氧化钠溶液碱化后再加正己烷，振摇后，除去正己烷。酸化处理后的水相，正己烷提取，再加重氮甲烷，混合数分钟，静置，加入甲醇水溶液混合，分层后取正己烷层，测定。,（四）高效液相 1 原理 尿样中加入盐酸后，置于沸水中，使结合型的五氯酚水解，并在碱性条件下用二氯甲烷提取部分干扰物，然后在酸性条件下用乙醚提取尿中五氯酚，浓缩后，高效液相色谱法测定。 3 样品处理和测定 取尿样于消化瓶中，加盐酸，水浴加热，后冷却至室温，转入分液漏斗中，调至碱性，二氯甲烷提取干扰物，再将溶液调至酸性，乙醚萃取，浓缩，甲醇定容，离心，取上清分析。,第二节 甲醇 理化性质 甲醇（methanol）又称木醇或木酒精（wood alcohol）为无色透明液体。易挥发，易燃易爆。可与水，乙醇，酮，醚，酯，卤代烃和苯混溶。 代谢及生物监测指标 甲醇主要用于溶剂，医药行业及日用化妆品行业，还是化工原料。还作防冻剂，管道脱水剂，复印，汽油燃料等。,2019/8/6,15,可编辑,甲醇具有强挥发性，所以易经呼吸道，胃肠道和皮肤吸收。 甲醇的毒性与其原形及其代谢产物的蓄积量有关。甲醇本身具有麻醉作用，可使中枢神经系统受到抑制。虽然甲醇的麻醉作用比乙醇弱，但因在体内代谢缓慢和蓄积作用而呈现了比乙醇更大的毒性。甲醇中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害主要与甲酸含量有关。 急性中毒以神经系统的损害，酸中毒和视神经炎为主，长期接触低浓度的甲醇会引起慢性中毒，对黏膜和皮肤有不同程度的刺激。空腹时甲醇最小中毒量为10g，2-20g可致盲，中毒致死量为120-240g。 呼吸道吸入甲醇，属于低剂量摄入，半减期较短，尿样作为生物监测指标试样，需要注意采样时间。,三 样品采集及保持 采集接触者班后尿或晨尿，尽快送实验室分析。采样时应注意饮酒，服药及可影响甲醇含量的其他毒物的接触情况。 四 尿中甲醇的测定 常用分光光度法气相色谱法。 （一）品红亚硫酸光度法 1 原理 在酸性介质中用高锰酸钾氧化甲醇为甲醛，甲醛用品红亚硫酸显色，与标准比色定量分析。在加入显色剂之前，须加草酸使过量高锰酸钾褪色，以免引起干扰。,2 样品处理和测定 取尿样加水蒸馏。将蒸馏液加乙酸，此为样品溶液。 取样品溶液和甲醇标准液，分别于试管中，各加高锰酸钾，再加草酸褪色，最后加品红亚硫酸显色，进行比色分析。 （二）顶空气相色谱法 1 原理 静态顶空气相色谱法测定尿中甲醇是将尿样置于密闭容器中，在一定温度下，容器上方的蒸气达到平衡时，甲醇的饱和蒸气符合拉乌尔定律。甲醇在,气相中的浓度与尿样溶液中甲醇的浓度成正比。并抽取瓶顶部蒸气进行气相色谱分析。气相中的甲醇经色谱柱分离，氢火焰离子化检测器检测，保留时间定性，峰高峰面积定量。 3 样品处理 在顶空瓶中加入2g无水硫酸钠，2 mL尿样，立即封口。混匀，移入水浴箱恒温平衡，然后进样。,第三节 丙酮 一 理化性质 丙酮（acetone）别名二甲基甲酮（dimethyl ketone）为无色透明液体，具有特殊的芳香气味，易挥发，高度可燃，易溶于水和其他有机溶剂。 代谢和生物监测指标 丙酮主要作为溶剂，化工原料，炸药，制药，化妆品，人造丝，制革和油脂等工业。,丙酮经呼吸道，胃肠道和皮肤吸收。 丙酮是人体内正常的内源性物质。属于微毒类物质。急性毒性主要是对中枢神经系统的麻痹作用，其蒸汽具有刺激作用。吸入性中毒表现为流泪，流涎，嗜睡，运动失调，昏迷，呼吸衰竭，直至死亡。 呼出气和尿样中的丙酮是检测的两个生物指标呼出气。 样品采集及保存 呼出气中丙酮的测定,第四节 正己烷 一 物理性质 正己烷（hexane）为微有异臭味的无色透明液体，易挥发，几乎不溶于水，易溶于三氯甲烷，醚和醇。 正己烷在体内的代谢产物2，5-己二酮，它为无色透明低挥发性液体，具有芳香气味，易溶于水和有机溶剂。,代谢和生物检测指标 在石油馏分，炼厂气，天然气中分离得到正己烷。 正己烷可以作为有机溶剂，还用于印刷，五金，电子等行业中的除污清洁剂。 正己烷以蒸气形式经呼吸道进入人体，也可经消化道或皮肤吸收。 呼出气中正己烷和尿样中2,5-己二酮可作为生物监测指标。,图 8-1 正己烷在体内的生物转化,样品采集及保存 1 呼出气 2 尿样 呼出气中正己烷的测定 气相色谱法测定 尿中2,5-己二酮的测定 测定方法主要是气相色谱法，但根据样品处理方法不