《白细胞参数检查》PPT课件.ppt

第二章 血液一般检查,临床检验教研室 李新岳,血液一般检查在临床上应用最广泛 红细胞参数检查 包括 白细胞参数检查 血小板参数检查,其中 红细胞计数(RBC)血红蛋白测定(Hb)白细胞计数(WBC)白细胞分类计数(DC)等四项应用最多,旧称为血常规。,血液一般检验的方法有两种： 手工法：用显微镜单项计数； 血液分析仪法: 多项计数,三分群血液分析仪结果报告单,WBC 白细胞计数 LYM# 淋巴细胞绝对值 LYM 淋巴细胞百分比 MID# 中间细胞绝对值 MID 中间细胞百分比 GRAN# 中性粒细胞绝对值 GRAN 中性粒细胞百分比 RBC 红细胞计数 Hb 血红蛋白测定,HCT 血细胞比容 MCV 红细胞平均体积 MCH 红细胞平均血红蛋白含量 MCHC 红细胞平均血红蛋白浓度 RDW 红细胞体积分布宽度 PLT 血小板计数 MPV 血小板平均体积 PCT 血小板比容 PDW 血小板体积分布宽度,三分群血液分析仪检测指标（21项）,白细胞直方图 红细胞直方图 血小板直方图,第二节 白细胞参数检查,外周血正常白细胞类型 中性粒细胞( N)70% 粒细胞 嗜酸性粒细胞( E) 嗜碱性粒细(B) 单核细胞(M) 淋巴细胞(L)30%,白细胞分三类五种,p42,第二节 白细胞参数检查,原始粒细胞 晚幼粒 早幼粒细胞 分裂池 杆状核 成熟池 中幼粒细胞 分叶核细胞 骨髓贮存池 进入外周血的粒细胞 50 50 在血循环中 粘附于小静脉和毛细血管壁上 循环池粒细胞 边缘池粒细胞 它们之间可迅速地进行交换，以保持动态平衡,粒细胞发育过程,干细胞池,第二节 白细胞检查,感染、炎症、组织损伤或坏死、中毒、贫血； 结缔组织病、骨髓抑制（电离辐射、细胞毒药物、免疫抑制剂、抗甲状腺药物） 恶性肿瘤、白血病、骨髓增殖性疾病、淋巴组织增生病、,白细胞检查的选择,第二节 白细胞检查,一、白细胞计数 【显微镜法原理】 用稀醋酸溶液，将血液稀释一定倍数并破坏红细胞，混匀充入计数池，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经过换算求得每升血液中的细胞数。,有二个计数池，每个计数池有9个大方格，每个大方格长、宽均是1mm，加特制盖片后高度为0.1mm。故1个大方格体积为0.1mm3。,计数板的结构,实验指导p7,器材,【计算】,WBC/L=102010 6 4,四大格白细胞总数,=-109,20,四大格白细胞总数,4：算出每大格内平均白细胞数(0.1l) 10：换算为1l的容积; 20：稀释倍数 10 6 ：换算成每升血中浓度,【结果报告】 WBC：109/L,第二节 白细胞参数检查,【方法学评价】 1.显微镜计数法：为血液分析仪校准的基本方法（严格规范下）。简单易行，不需昂贵仪器。但影响因素多：微量吸管、计数板、细胞分布范围、人为因素等，重复性差。 2.血液分析仪法：快速、标准化、精确性高、适合大规模人群检查。但某些人为或病理因素可干扰白细胞计数。,第二节 白细胞参数检查,【质量控制】 （一）计数误差 1、技术误差：是由于操作不正规或 使用器材不准确造成的误差。 (1)器材：清洁、干燥、校准 （2）标本要求：采血迅速,避免凝血,深度适宜,不能过度挤压，稀释度要准 。 (3)盖片放置方式：推式加盖玻片法, 更能保证充液体积高度为0.1mm。,第二节 白细胞参数检查,(4)充池要求: （5）细胞分布较均匀,若每大格间细胞数相差8个时，应重新充池计数, 二次重复计数结果相差不10%。,【质量控制】 （一）计数误差 1、技术误差：,第二节 白细胞参数检查,(6) 对压线细胞的计数原则: 数上不数下 数左不数右,【质量控制】,第二节 白细胞参数检查,（7）白细胞稀释液不能破坏有核红细胞,因此在病理情况下周围血出现有核红细胞时,可使白细胞数偏高, 应进行校正：,【质量控制】,WBC/L (真值) = X -,100 + Y,100,X:校正前白细胞数 Y：分类100个白细胞时,遇到的有核红细胞数,第二节 白细胞参数检查,2 、固有误差： 在每次计数时，不可避免产生的误差，包括： 计数域误差 吸管误差 固有误差 计数室误差,第二节 白细胞参数检查,2 、固有误差： 1）计数域误差： 由于每次充池后, 细胞在计数池分布不可能完全相同所造成的误差, 叫计数域误差。,一、白细胞计数,第二节 白细胞参数检查,2 、固有误差： 1）计数域误差：细胞在计数室内随机分布符合Poisson分布，其细胞计数的标准差(s) 为: s =m , m为重复计数均值,细胞计数域的变异系数（CV )为: CV(%)= s /m 100% =m / m100% = 1 /m 100% 意义：CV可以通过计数细胞增多而变小。,第二节 白细胞参数检查,2 、固有误差： 1）计数域误差：,当白细胞15.010/L可适当增加稀释倍数 。,第二节 白细胞参数检查,2 、固有误差： 1）计数域误差：,2）吸管、计数室误差：由于不精密所致。 可通过计数次数越多，即使用吸管、计数室次数越多误差将减少。,第二节 白细胞参数检查,2 、固有误差： 1）计数域误差： 2）吸管、计数室误差：,3） 固有误差总变异系数的数学公式：,1002 + 4.62 + 4.72 CV= nb nc np,nb 所数细胞总数 nc 计数板使用次数 np 吸管使用次数,第二节 白细胞参数检查,（二）生理状况的影响： 运动、劳动 、冷热水浴 、酷热 、严寒可出现一过性增高,一日内可差1倍； 吸烟者平均比不吸烟者高30%, 所以,最好是定时检查,一、白细胞计数 【质量控制】 （一）计数误差,【参考区间】 WBC：成人（4.010.0）109/L 新生儿(1520)109/L 6月2岁 (1112)109/L GRAN：5070 GRAN：（2.07.2）109/L （绝对值）,第二节 白细胞参数检查,一、白细胞计数,第二节 白细胞参数检查,白细胞是与红细胞相对而得名，是一种无色有 核细胞，呈球形，直径725 m。 【原理】 将血液制成血涂片用瑞氏染液染色 根据各种白细胞形态特征分类计数100个白细胞 即可求出各种白细胞的相对比值或百分率。,二、白细胞分类计,第二节 白细胞参数检查,【粒细胞特点】 1）这类细胞均含有特殊颗粒，故名粒细胞。 2）由于这些颗粒对染料亲和力不同，可分为中性、嗜酸性、嗜碱性三种颗粒。根椐细胞内所含特殊颗粒而对粒细胞命名。,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,3)粒细胞因其成熟阶段不同，核形可分杆状和分叶核。,二、白细胞分类计数【粒细胞特点】,杆状核（st)： 为不完全成熟细胞。数量5% 核凹陷超过假设圆直径的 3/4, 核径最狭窄处大于最宽处的1/3。 呈马蹄形、S、V、W、U形等，,分叶核： 核径最狭窄处小于最宽处的1/3。,第二节 白细胞参数检查,（二）外周血正常白细胞形态 p57,二、白细胞分类计数,1.中性粒细胞（N）,2. 嗜酸性粒细胞(E),3. 嗜碱性粒细胞(B),三种粒细胞的鉴别 - 鉴别要点 中性颗粒 嗜酸性颗粒 嗜碱性颗粒 - 颗粒数量 大量 大量 量少, 大小及均匀 细小,均匀 粗大,均匀 粗大,大小不等 分布排列 均匀,弥散 均匀,紧密 不均匀,排列稀疏 颗粒形状 尘土状 球状折光 不规则块状 掩盖核 不 不 可掩盖核 ,致核形不清 化学性质 中性物质 碱性物质 酸性物质 瑞氏染色 粉红或 桔红或 深紫红或 颜色 淡紫红 浅咖啡色 紫黑色 -,4. 淋巴细胞(L),5. 单核细胞(M),2,4,7,5,6,3,1,五种白细胞的比较 细胞 直 径 核/浆 核 形 染色质 胞 浆 N 1015 中 杆状/分叶 粗造不均 颗粒量多、细小均匀、 染粉红色、散在分布 E 1315 小 多分2叶 粗造 粗大、均匀、紧密排列， 呈眼镜状 有立体感、桔红色 1012 大 分叶不清 粗造 少量粗大、大小不均、 紫黑色、常 盖于核上 6 15 大 圆形/肾形 粗造成块 透明淡蓝色，无颗粒或 少量大小不等紫红色的嗜 天青颗粒 1525 中 肾形、马碲 疏松 半透明淡蓝色、淡灰， 形、有折叠 网状 有较多细小尘土样紫红 色嗜天青颗粒，散在分布 ,第二节 白细胞参数检查,（三）外周血异常白细胞形态 1、异常中性粒细胞形态：p59 中性粒细胞毒性变： 见于严重细菌感染性疾病、中毒、大面积烧伤、恶性肿瘤等。,二、白细胞分类计数,中毒颗粒,中毒颗粒,毒性指数：计数100200个中性粒细胞， 同时记录有中 毒颗粒的细胞。 有中毒颗粒的细胞数 毒性指数 - 所数中性粒细胞总数,毒性指数 = 1为极度，示病情严重 = 0.75为重度 = 0.50为中度 0.25为轻度,大小不均：,空泡变性：,杜勒体,核棘突：,鼓槌状小体,退化细胞,Auer小体,皮杰核畸形：中性粒细胞核呈肾形，染色质浓缩、深染，不分叶,核固缩:核呈均匀而深紫色的块状物。,核碎裂:核碎裂 数块,（1）异型淋巴细胞：由于某种原因如病毒感染或变应原的刺激，使淋巴细胞增生，并发生了某些形态变化，称异型淋巴细胞。 异型淋巴细胞多为T淋巴细胞，其形态变异系增生亢进，甚至发生母细胞化的结果。正常2%，病毒感染(肝炎、风疹等)2%，但5%；传染性单核细胞增多症时常10%，为其诊断指标之一。,2. 淋巴细胞变异： p65,第二节 白细胞参数检查,二、白细胞分类计数,按其形态可分为三型： 型（空泡型）-浆细胞型： 型（不规则型）-单核细胞型： 型（不成熟型）-幼稚型，未成熟细胞型。,浆细胞型 ,幼稚型 ,单核细胞型 ,型,型异淋,（2）具有卫星核的淋巴细胞， 即在淋巴细胞主核旁边另有一个游离的小核。 见于：接受较大剂量的电离辐射之后，或其他理化因子、抗癌药物等对细胞造成损伤时。 常作为致畸、致突变的客观指标之一。,第二节 白细胞参数检查,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,（四）白细胞分类计数(DC )的方法 1、血片检查的内容： (1)对周围血进行形态观察： (2)进行白细胞分类计数：求出各种白细胞的百分比， （3）有无异常细胞：高雪氏细胞，恶性网状细胞 。 （4）周围血中有无寄生虫： 原虫，黑热病小体,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,2、分类的操作过程： 实验指导 p32 推片 染色 低倍镜观察，选择细胞分布均匀、染色好的部位 转油镜下计数100200个白细胞,求出各种白细胞所占百分比。,二、白细胞分类计数,（四）白细胞分类计数(DC )的方法 1、血片检查的内容：,第二节 白细胞参数检查,2、分类的操作过程： 血片各部位细胞分布情况: 头体部: 以淋巴细胞较多 尾部和两侧：以中性粒、单核细胞较多, 片尾部: 异常大的细胞较多.,二、白细胞分类计数,（四）白细胞分类计数(DC )的方法 1、血片检查的内容：,% = 某白细胞的数量/计数白细胞总量100% 绝对数(10 9/L )= WBC某种白细胞分类计数比值,(2)部位的选择: 一般选择片头至片尾的2/3区域计数较好, 即体尾交界处,按一定方式,有规律的移动视野, 依次、随机、迂回、不重复视野 。,第二节 白细胞参数检查,【方法学评价】： 1、显微镜法：是经典的白细胞分类法，能够准确地根据细胞形态特征进行分类计数，并可发现血细胞形态、结构、染色、分布是否有异常，是白细胞分类计数的参考方法；但其耗时，且影响因素较多，精确性及重复性较差，不适于大量健康人群的筛检。,二、白细胞分类计数,p46,第二节 白细胞参数检查,【方法学评价】： 2、血液分析仪： 三分类：是以较低廉的成本筛检正常人群的白细胞，但是不能准确提供异常白细胞分类结果。 五分类：由于综合应用了电阻抗、光学、细胞化学、荧光分析等技术，能准确地把白细胞分为嗜中性、嗜酸、嗜碱粒细胞及淋巴细胞和单核细胞。,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,【质量控制】 1、计数误差 （1）涂片制备和染色 （2）观察部位 细胞在涂片中分布不匀，胞体大的细胞和幼稚细胞分布在涂片尾部， 胞体小的细胞分布在片头,如淋巴细胞和嗜碱性细胞。 所以分类的最佳部位是体尾交界处。,二、白细胞分类计数,第二节 白细胞参数检查,（3）计数范围和移动规律 （4）计数白细胞的数量 被计数的细胞占总计数细胞的比例越大,所计数细胞的总数越多,误差就越小即增加计数细胞,扩大计数范围,可缩小误差。,二、白细胞分类计数,【质量控制】 1、计数误差 （1）涂片制备和染色 （2）观察部位,第二节 白细胞参数检查,（4）计数白细胞的数量 表2-41 被计数的细胞占总计数细胞的比例越大,所计数细胞的总数越多,误差就越小即增加计数细胞,扩大计数范围,可缩小误差。 当病人白细胞极少（一张片100个WBC），可数 50个细胞，再算出百分数，同时应注明计数细胞数。 或数2张片子,并注明。,【质量控制】 1、计数误差,第二节 白细胞参数检查,（5）注意事项 观察全片：低倍镜油镜 异常和幼稚细胞的记录： 发现幼稚或异常白细胞，应分类，并包括在分类计数的100白细胞中(百分率中)。 发现有核红细胞，应报告分类100个白细胞所见有核红细胞数X:100(不含于分类的100白细胞中)。,二、白细胞分类计数 【质量控制】,第二节 白细胞参数检查,注意其他血细胞形态: 如遇到不能确认的细胞，应另列入分类不明一项，如实报告，并保留血片。,二、白细胞分类计数 【质量控制】,（5）注意事项 观察全片：低倍镜油镜 异常和幼稚细胞的记录：,第二节 白细胞参数检查,二、白细胞分类计数,【质量控制】 2、质量考核与评价 目前仍缺乏统一的质量控制方法，关键在于熟练操作技术，严格控制各个操作环节，尽量减少误差。 常用重复计数后计算的S或CV来表示 总之：计数细胞的总数越多,误差就越小。即增加计数细胞,扩大计数范围,可缩小误差。,第二节 白细胞参数检查,经验控制： （1）与红细胞数相对比较， 周围血红细胞/白细胞 = 500600:1,二、白细胞分类计数 【质量控制】,第二节 白细胞参数检查,经验控制： （2）将白细胞计数结果与血涂片中白细胞分布情况对照。,WBC（109/L） 血片中WBC数/HP 47 24 79 46 1013 610 1318 1020,第二节 白细胞参数检查,二、白细胞分类计数,【参考区间】 % 绝对值 中性杆状核 Nst 1%5% 0.040.05 中性分叶核 Nsg 50%70% 2.007.00 嗜酸粒细胞 E 0.5%5% 0.020.50 嗜碱粒细胞 B 0%1% 00.10 淋巴细胞 L 20%40% 0.804.00 单核细胞 M 3%8% 0.120.80,第二节 白细胞参数检查,三、白细胞计数和分类计数的临床意义 由于中性粒细胞占白细胞总数的50 % 70% 所以中性粒细胞的变化直接影响白细胞总数的变化。二者之间有着密切的关系和相同的意义，但二者增减不绝对一致，要具体分析。,第二节 白细胞参数检查,三、白细胞计数和分类计数的临床意义,分析白细胞分类变化意义时，必须计算各类型白细胞的绝对值才有诊断参考价值。 各类型白细胞绝对值白细胞计数值白细胞分类计数百分率。,【 生理变化】 （1）年龄的变化： WBC: 新生儿期（15 20）10 9 /L (个别3010 9/L) 3 4天降至1010 9/L 3个月后逐降至成人水平。,第二节 白细胞参数检查,（一）中性粒细胞 1. 中性粒细胞数量变化的临床意义 （WBC、GRAN# 、GRAN）,【 生理变化】 （1）年龄的变化： DC: 初生期外周血白细胞主要为中性粒， 6 9天N下降至与淋巴大致相等, 以后L增高，整个婴儿期L可达70%。 2 3岁后L逐下降，N上升， 至4 5岁，二者相等，形成第二次交叉。 至青春期，N与成人相同。,第二节 白细胞参数检查,1. 中性粒细胞数量变化的临床意义,【 生理变化】 （2）日间变化：一日内最高值与最低值可相差一倍左右。 （3）运动、疼痛和情绪影响：因体内白细胞重新分布和骨髓释放增加，使WBC，以N为主。 （4）吸烟者平均高于非吸烟者30%,第二节 白细胞参数检查,1. 中性粒细胞数量变化的临床意义,【 生理变化】 （5）妊娠期： 妊娠5个月WBC可达15109/L, 以中性粒细胞增多； 妊娠最后1个月WBC 常波动于(1217)109/L 分娩时可达34109/L 分娩后 2 5天内恢复正常,第二节 白细胞参数检查,1. 中性粒细胞数量变化的临床意义 （WBC、GRAN# GRAN）,【病理变化】 （1）增多： 成人10109/L 新生儿20109/L 为白细胞增多 2岁以内12109/L WBC30109/L，提示可能为白血病。,第二节 白细胞参数检查,1. 中性粒细胞数量变化的临床意义 （WBC、GRAN# GRAN）,急性中毒：急性化学药物中毒、代谢性中毒 急性大出血： 严重组织损伤或急性溶血： 白血病及恶性肿瘤：,第二节 白细胞参数检查,【病理变化】 （1）增多： 急性感染或化脓性炎症：,三、白细胞计数和分类计数的临床意义 1.中性粒细胞数量变化的临床意义,（2）减少： WBC4109/L称为白细胞减少。 中性粒细胞绝对值1.5109/L，称粒细胞减少症； 粒细胞0.5109/L，为粒细胞缺乏症。,第二节 白细胞参数检查,1. 中性粒细胞数量变化的临床意义,（2）减少： 1）感染：某些病毒性感染、某些革兰阴性菌感染（伤寒、副伤寒）、 某些原虫感染（疟疾、黑热病）。 2）血液系统疾病： 3）理化损伤： 4）单核-巨噬细胞系统功能亢进：如脾亢、门脉性肝硬化、淋巴瘤等疾病。 5）免疫性破坏增加：,第二节 白细胞参数检查,1. 中性粒细胞数量变化的临床意义,第二节 白细胞参数检查,2、中性粒细胞的核象变化： 核象变化是指外周血中性粒细胞核的分叶状况，反映粒细胞的成熟程度。,p61,第二节 白细胞参数检查,2、中性粒细胞的核象变化：,第二节 白细胞参数检查,2、中性粒细胞的核象变化 核左移：外周血杆状核或杆状核以上的幼稚粒细胞增多，超过5%时称核左移。,第二节 白细胞参数检查,核左移： 再生性左移：核左移伴WBC增多，表示机体反应性强，骨髓造血功能旺盛。常见于各种病原体所致的感染，特别是急性化脓性感染时，其次见于急性中毒、急性溶血、失血、类白血病反应等，白血病时也可引起核左移，为骨髓病理造血，不表示骨髓造血功能旺盛。,2、中性粒细胞的核象变化：,第二节 白细胞参数检查,核左移： 退化性左移：核左移伴WBC减少或正常，