课件：执业医师培训微生物学第一课.ppt

2013医学微生物学培训,泸州医学院病原生物学教研室制作 教师：杨兴友,-,20002011年约考过80道单纯微生物题，而涉及临床医学有关的题较多。 其中，细菌的感染与免疫(约8题)，病原性球菌(约9题)，肝炎病毒(约9题)较为重要。考生应重点掌握：细菌内、外毒素的主要区别；致病性葡萄球菌的鉴别要点、链球菌属致病物质的种类和所致疾病、肺炎链球菌致病性；HAV生物学特性、Dane颗粒的概念、特性以及戊肝的传播途径。 总之以大纲为主，首先全面复习，然后重点复习，一点盖面，查漏补缺。,2019,-,2,第一单元 微生物的基本概念,2019,-,3,【考纲要求】 1微生物的定义。 2三大类微生物及其特点。,2019,-,4,【考点纵览】 1微生物定义。 2微生物按其结构组成等，可分3大类： 非细胞型微生物、 原核细胞型微生物、 真核细胞型微生物。,2019,-,5,( 非分类学上名词，来自法语“Microbe“一词) 是形体微小、单细胞或个体结构简单的多细胞、甚或无细胞结构的低等生物的通称。,一、微生物的定义,2019,-,6,微生物 特点,2019,-,7,体积微小: 测量单位- 微米(m)或纳米(nm),2019,-,8,(一)非细胞型微生物 特点：一无，二简，三最小 1、一无典型的细胞结构和相应的酶系统 2、结构最简单（DNA，或RNA，或像朊粒只有传染性蛋白粒子） 3、形体最小，纳米（nm）为测量单位 所以只能在活的细胞内生长繁殖。 （RNA、DNA、蛋白其中一种 ，没有自己房子只能寄生在别人那里！）,二 微生物分三型八大类,2019,-,9,(二)原核细胞型微生物 结构相对有所进步（DNA+RNA），以微米（m）为测量单位，包括一有二无三不整 一有：原核，指的是原始核质，核分化程度低； 二无：无核膜，无核仁 三不整：细胞器不完整（有核糖体，缺少内质网，线粒体） 有：2菌4体（？） （就是缺点东西，有了房子，但没有好好装修！支原体没有细胞壁防盗门都没安。）,2019,-,10,(三)真核细胞型微生物 特点：是原核细胞型微生物不具有的它都有了： 1、核分化程度高 2、有核膜、核仁和染色质 3、有完整的细胞器：如内质网、核糖体及线粒体等 故易在体外生长繁殖。 （家用电器都已装好，可以美美自主居住了！易在体外生长繁殖）,2019,-,11,【例1】 2003A不属于原核细胞型的微生物是 A螺旋体 B放线菌 C衣原体D真菌 E立克次体 【例2】 2006A不属于原核细胞型微生物的是 A细菌 B病毒 C支原体 D立克次体 E衣原体,真题,2019,-,12,【例3】 2001A属于原核细胞型的一组微生物是 A酵母菌、淋病奈瑟菌 B放线菌、破伤风梭菌 C链球菌、念珠菌 D隐球菌、结核分枝杆菌 E小孢子菌、大肠埃希菌,2019,-,13,A衣原体 B病毒 C支原体 D螺旋体 E真菌 【例4】2001B只有一种核酸类型的微生物是 【例5】2001B缺乏细胞壁的原核细胞型微生物是,B病毒,B病毒,2019,-,14,注：医学常识问题等： 1.第一次用显微镜观察到各种形态的微生物的伟人是： 2.最先创用固体培养基将细菌进行培养的科学家是： 3.首次研制了炭疽疫苗、狂犬病疫苗的伟人是： 4.记住伤寒不属于1973年以来发现的感染人类的新病原体（像军团，幽门，埃博拉，朊粒等都属于）,吕文虎克,德国的柯霍,巴斯德,2019,-,15,本单元的出题集中在 肽聚糖的结构和细胞质内的一些重要结构上，特别是肽聚糖层的各组成成分应重点掌握， 其次应当掌握质粒、中介体等结构的基本构成和功能。 本单元内容考查偏重对知识点的记忆，应当加强这方面内容的记忆。对细胞膜考查的题目较少，适当了解。,第二单元 细菌的形态与结构,2019,-,16,【考纲要求】 1细菌的三种形态及测量单位。 2细菌基本结构的构成。 3肽聚糖的结构。 4革兰阳性菌和阴性菌细胞壁的结构和医学意义。 5细菌胞质内与医学有关的重要结构与意义。,2019,-,17,6荚膜及其与细菌致病性的关系。 7鞭毛及其与医学的关系。 8菌毛的分类及其与医学的关系。 9芽孢及其与医学的关系。 10革兰染色的步骤、结果判定和医学意义。,2019,-,18,广义所有原核细胞型微生物（细菌、支原体衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌） 共性：有细胞壁、原始核质、二分裂、对抗 生素敏感 狭义专指其中的细菌。,一、细菌：,2019,-,19,长度单位：微米(m),二、细菌的大小,-,细菌,单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌,弧菌,弧菌,短杆状、长杆状、棒杆状、梭状杆状、月亮状、竹节状,球菌,杆菌,螺旋状菌,2019,-,21,2019,-,22,1、基本结构： 细胞壁 细胞膜 细胞质 核质,2、特殊结构1膜2毛1芽胞,记：由外到内依次是：壁-膜-浆-核,四、细菌的结构包括：,2019,-,23,1. 细菌涂片制作,涂片（均匀）,干燥,固定,生理盐水+大肠杆菌 生理盐水+金葡菌,G染色把细菌分为两类,2019,-,24,用吸水纸将片子上的水吸干,结果,蓝紫色（G+） 红色（G-）,显微镜油镜镜检,2. G染色过程,2019,-,25,注： 不被乙醇脱色，呈蓝紫色，称为革兰氏阳性菌 G+ 能被乙醇脱色，呈复染剂红色，称为革兰氏阴性菌 G- 细胞壁组成及结构差异造成的。 可将细菌分为G+菌和G菌。,革阳如男爱紫蓝，革阴似女喜红衫， 抗酸染色恰相反，阳是红来阴是蓝。,2019,-,26,意义： 可鉴别细菌 可指导临床选择药物 大多数革兰阳性菌以分泌外毒素致病为主而革兰阴性菌主要以内毒素致病,2019,-,27,（一） 细胞壁 1. 化学组分 聚糖骨架 肽聚糖 四肽侧链 五肽交联桥 壁磷壁酸 磷壁酸 膜磷壁酸 肽 聚 糖 肽聚糖 四肽侧链 脂多糖 外膜 脂质双层：内有OMP 脂蛋白,五、细菌的基本结构,2019,-,28,2、革兰阳性菌细胞壁组分,肽 聚 糖,四肽侧链-,五肽交联桥-,聚糖骨架-,N-乙酰葡糖胺（G） N-乙酰胞壁酸（M）,L-丙氨酸，D-谷氨酸 L-赖氨酸，D-丙氨酸,甘氨酸（x）,（1）,2019,-,29,G+ 的肽聚糖结构,三维立体结构，坚固,1550层,四肽侧链,五肽交联桥,2019,-,30,溶菌酶作用位点,青霉素作用位点,（2）两机制,-1，4糖苷键,四肽侧链上D丙氨酸和五肽桥,2019,-,31,特殊组分,（3）革兰氏阳性菌细胞壁,磷壁酸,壁磷壁酸,膜磷壁酸,特殊蛋白： A蛋白、M蛋白,革兰阳性菌细胞壁结构模式图,-,2019,-,33,肽聚糖 （共有组分）,聚糖支架,四肽侧链,3 革兰阴性菌细胞壁的成分与结构,外 膜 （特殊组分）,脂 蛋 白,脂质双层,脂 多 糖,特异性多糖,核心多糖,脂 质 A,2019,-,34,N-乙酰胞壁酸,N-乙酰葡萄糖胺,共有组分肽聚糖,革兰氏阴性菌细胞壁成分与结构,缺乏交联桥， 二维平面结构，疏松 12层。,-1，4糖苷键,2019,-,35,G- 菌细胞壁结构,细胞膜,磷壁酸,G 菌细胞壁结构,2019,-,36,革兰阳性菌与阴性菌细胞壁结构比较,2019,-,37,细胞壁意义： 分为：革兰阳性菌和革兰阴性菌。 二者有四不同： 抗原性 致病性 免疫原性 对抗生素的敏感性,2019,-,38,细胞壁主要功能： 二个维持: 维持菌体固有形态 维持菌体内外的渗透压，参与内外物质交换。,C壁固形护细菌,2019,-,39,（二）细胞膜,1、功能： 物质转运， 呼吸和分泌， 生物合成， 参与细菌分裂 2、 中介体/拟线粒： 又称拟线粒，实质是部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，多见于革兰阳性细菌。 作用类似于真核细胞的线粒体，提供能量。,C膜呼吸换物质,2019,-,40,（三）细胞质,1核糖体： 细菌合成蛋白质的场所。 2质粒：染色体外的遗传物质，为闭合环状 的双链DNA，可通过结合、转化等方式 在菌间传递质粒。 （1）F质粒：致育性质粒，编码细菌性菌毛。 （2）R质粒：耐药性质粒，控制细菌耐药性。,固有耐药性与细菌染色体有关，获得性耐药性与质粒有关。 质粒不是细菌生命活动所必须的；细菌染色体是生命所必须的。,2019,-,41,3胞质颗粒 1）细菌储存的营养物质， 2）其中异染颗粒为白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌等所特有的胞质颗粒，用于鉴别诊断(2000年考)。,C浆质粒控耐药 异染颗粒辨菌体 核蛋白体产蛋白,2019,-,42,（四） 核质 细菌是原核细胞，不具成形的核。,核质遗传与变异,2019,-,43,1）、概念： 细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的作用被破坏或合成被抑制后，在高渗环境下，仍可生存，称细菌L型(Lister发现)。,（五）、细菌细胞壁缺陷型-细菌L型,2019,-,44,2）、成因： 有溶菌酶，溶葡萄球菌素，青霉素，胆汁，抗体，补体等。 3）、形态： 大小不一，高度多形性。 4）、一体一球 原生质体：G+菌细胞壁缺失后，原生质层仅被一层细胞膜包住 原生质球：G-菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护,2019,-,45,5）特点,2019,-,46,例1、细菌细胞壁特有的成分是 A.肽聚糖 B.外膜 C.脂蛋白 D.脂多糖 E.类脂A 例 2、细菌“核质以外的遗传物质”是指(2005) A. mRNA B.核蛋白体 C.质粒 D.异染颗粒 E.性菌毛,答案：A,答案：C,2019,-,47,A.中介体 B.包涵体 C.吞噬体 D.线粒体 E.异染颗粒 例3、与细菌的呼吸作用有关的结构是 例4、可用于鉴别细菌的结构是 例5、在病毒的增殖过程中，可出现的结构是,答案：A,答案：E,答案：B,2019,-,48,例 6、溶菌酶的溶菌作用机理是(2001) A.裂解细胞壁肽聚糖骨架上的-1，4糖苷键 B.抑制细胞壁肽聚糖上四肽侧链与五肽桥的交联 C.抑制细菌mRNA表达 D.抑制细菌DNA转录 E.破坏细胞壁上的磷壁酸 例 7、与细菌耐药性有关的结构是(2006) A性菌毛 B细菌染色体 C质粒 D鞭毛 E异染颗粒,答案：A,答案：C,2019,-,49,四 细菌的特殊结构,-,（一）荚膜,1、特点：外，厚，粘 1）.外：胞壁外层 2）.厚：0.2m（0.2的为微荚膜） 去除后不影响细菌的生命活动 3）.粘：胶冻样物质 2、功能包括： 1）：侵害宿主：黏附作用 2）：自保作用：抗吞噬； 抗有害物质损伤,2019,-,51,单毛菌,双毛菌,丛毛菌,周毛菌,1.特点：细长，弯曲，丝状物,2.细菌分类,3. 功能： 1）细菌的运动器官，趋利避害 2）具抗原性与致病性,2019,-,52,1、形态：细、短、直、硬、多的丝状物质。 2、特点：菌毛蛋白，与运动无关，用电子显微镜观察。 3、分类： 1）.普通菌毛：和致病性有关。 2）.性菌毛/又称F菌毛：仅见于少数G-菌，由F质粒编码，通过接合方式传递遗传物质。,（三）菌毛,2019,-,53,1、芽胞：细菌的休眠形式，营养缺乏尤其是C、N、P元素不足时，细菌生长繁殖减速，细胞质脱水浓缩，在菌体内形成的圆形或椭圆形小体。 2、产生芽胞的细菌都是革兰阳性菌。 3、芽胞与医学的关系 1）、不是细菌的繁殖方式，芽胞不能直接引起疾病。 2）、抵抗力强，杀灭芽胞最可靠的方法是高压蒸汽灭菌。 3）、芽胞是否被杀死作为判断灭菌效果的指标。,(四) 芽胞,2019,-,54,-,鞭毛运动可鉴定,1,普通菌毛附黏膜,2,性毛传递耐药性,3,芽胞形态辨细菌,4,1,荚膜护菌强致病,灭菌标准抗力硬,1,5,6,一膜二毛三起胞,使细菌具有侵袭力的结构成分是荚 膜 使细菌具有抵抗力的结构成分是芽孢 使细菌具有耐药性的结构成分是质粒；与细菌致病性有关的结构成分是菌毛、质粒 产生芽胞的都是革兰阳性菌 一个细菌只形成一个芽胞，一个芽胞发芽也只生成一个菌体，不是细菌的繁殖方式 高压蒸汽灭菌法是杀灭芽孢最有效的方法,注意：,2019,-,56,【例1】 2001A使细菌具有侵袭力的结构成分是 A芽孢 B肽聚糖（粘肽） C荚膜 D核糖体 E异染颗粒 【例2】 2000A肺炎链球菌的主要致病因素是 AC-反应蛋白 B自溶酶 C荚膜 D外毒素 E内毒素 【例3】 2002A细菌芽孢最显著的特性是 A抗吞噬性 B具有毒素活性 C耐热性 D粘附性 E侵袭性,2019,-,57,【例4】 细菌细胞壁特有的成分是 A肽聚糖 B外膜 C脂蛋白 D脂多糖 E类脂A 【例5】 细菌芽胞最显著的特性是 A抗吞噬性 B具有毒素活性 C耐热性 D粘附性 E侵袭性,2019,-,58,【考纲要求】 1细菌生长繁殖的基本条件与方式。 2根据对氧需求，细菌的分类。 3细菌生化反应的原理。 4细菌产生的与医学有关的主要合成代谢产物。 5培养基的概念。 6细菌在液体和固体培养基中的生长现象。 7细菌人工培养在医学中的应用。,2019,-,59,1、细菌的营养类型 自养菌：以简单的无机物为原料，合成菌体成分。 异养菌：以多种有机物为原料，合成菌体成分并获得能量。 异养菌包括腐生菌和寄生菌: 所有的病原菌都是异养菌，大部分属寄生菌。,一 细菌生长繁殖的基本条件,2019,-,60,2、细菌的营养物质,2019,-,61,3、根据对氧需要进行细菌分类,2019,-,62,1、细菌个体的生长繁殖 繁殖方式-细菌以简单的二分裂方式进行繁殖。 繁殖速度-多数细菌的代时为20一30min，而结核杆菌则1820小时分裂一次。,二 细菌的生长繁殖,2019,-,63,2、细菌群体的生长繁殖分为四期：,迟缓期（A）： 细菌进入新环境后的短暂适应阶段。该期细菌分裂迟缓，繁殖极少； 对数期（C）： 生长迅速，以恒定的几何级数增长。细菌的形态、染色性、生理活性等都较典型，研究细菌的生物学性状最佳时期。,2019,-,64,最大稳定期（E）： 营养的消耗，代谢产物的堆积，繁殖数与死亡数几乎相等。活菌数保持稳定。芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在最大稳定期产生。 衰亡期（F）： 繁殖变慢，死菌数超过活菌数。细菌形态发生改变，生理活动趋于停滞。,2019,-,65,细菌的生长曲线图,2019,-,66,【例1】 2007A幽门螺杆菌是 A无鞭毛 B革兰染色阳 C营养要求低 D微需氧 E呈球形 【例2】 细菌个体的繁殖方式是 A有性繁殖 B菌丝断裂 C细胞出芽 D无性二分裂 E核酸复制,答案：D,答案：D,2019,-,67,三 细菌的新陈代谢和能量转换,2019,-,68,(一）细菌的能量代谢,发酵：以有机物为受氢体的生物氧化过程,呼吸：以无机物为受氢体的生物氧化过程,需氧呼吸以分子氧为受氢体,厌氧呼吸以其他无机物为受氢体,2019,-,69,（二）分解代谢产物和细菌的生化反应 细菌种类不同细菌酶不同分解物质能力不同代谢产物不同鉴别作用。 常用的生化试验： 1)糖发酵: 据此可以鉴别不同的细菌。 2)枸橼酸利用实验: 利用如产气杆菌可以在枸橼酸盐培养基上生长而大肠埃希菌不能在该培养基上生长的特性区分二者。 3)VP试验: 据此可区别大肠埃希菌和产气杆菌。,2019,-,70,4)甲基红试验: 根据产物的pH可区分产气杆菌和大肠埃希菌。 5)吲哚试验: 鉴定细菌对氨基酸的分解能力不同，检测色氨酸的代谢产物。 6)硫化氢试验: 检测含硫氨基酸的代谢产物，属于细菌分解代谢产物。,2019,-,71,（三）细菌的合成代谢产物,2019,-,72,表1：由细菌产生并与医学有关的主要合成代谢产物,2019,-,73,表2：由细菌产生并与医学有关的主要合成代谢产物,2019,-,74,四 细菌的人工培养,2019,-,75,1、 培养基,是由人工方法培配置而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。,2、据物理性质不同分： 液体：增菌作用 半固体：检测细菌动力，有鞭毛的细菌可呈现羽毛状或云雾状浑浊 固体： 平板：细菌的分离、纯化、鉴定及药敏试验作用； 试管：菌种的保存,2019,-,76,3、细菌在培养基中的生长情况： 1）、细菌在液体培养基中的生长情况,2019,-,77,2）细菌在固体培养基中的生长情况： 菌落菌落是单个细菌在固体培养基上生长繁殖后形成肉眼可见的细菌集团，是纯种细菌。,2019,-,78,菌落有三种,2019,-,79,（三）细菌在半固体培养基中的生长 情况动力试验,1、3：有动力 2：无动力,2019,-,80,【例】 在流行病学调查时，可作为细菌分型依据的代谢产物是 A抗生素 B细菌素 C热原质 D毒素 E色素,答案：E,2019,-,81,医学： 感染性疾病的病原学诊断 细菌学的研究 生物制品的制备 工农业生产 基因工程,五 培养基应用,2019,-,82,第四单元 消毒灭菌与病原实验室生物安全,2019,-,83,1. 灭菌： 杀灭物体上所有的微生物（包括病原体和非病原体，繁殖体和芽胞）的方法 2. 无菌： 灭菌的结果，不含活菌的状态。 3. 消毒： 杀灭物体上病原微生物的方法，该方法不一定杀死芽胞。,一、消毒与灭菌,2019,-,84,4. 无菌操作： 防止微生物进入人体或物体的操作技术。 5. 抑菌（生长）： 抑制体内或体外细菌的生长。 6. 防腐（繁殖）： 防止或抑制微生物生长繁殖的方法，一般不致细菌死亡。,总结: 灭菌的后果是无菌； 消毒的是病原微生物； 抑菌生长，防腐繁殖。,2019,-,85,二 物理消毒灭菌法,1、焚烧：废弃物、尸体 2、灼烧：接种环、试管口 3、干烤：（160170，2h）玻璃器皿 4、 红外线（0.71000um波长的电磁波）：医疗器械,（一）热力灭菌法,2019,-,86,(二)湿热灭菌法,1、巴氏消毒法： 61.1-62.8 30min 或71.715-30s,主要用于牛乳消毒。 2、煮沸法： （100 ，5min）食具、注射器等消毒,2019,-,87,3、高压蒸汽灭菌法： 压力 103.4 kPa（1.05kg/cm2） 温度 121.3 时间 15-20 min 效果 杀灭包括芽胞在内所有微生物 应用 所有耐高温、高压、耐湿的物品,2019,-,88,（三） 辐射杀菌法,紫外线 原理 波长200-300nm的紫外线具有杀菌作用， 其中265-266nm杀菌力最强。 特点 紫外线穿透力弱。 应用 手术室、传染病房和无菌室的空气消毒,2019,-,89,微波： 1、波长为11000mm的电磁波。 2、不能穿透金属表面，灭菌效果不可靠。 3、用于非金属器械及食具消毒。,2019,-,90,电离辐射 （包括高速电子、射线和射线） 具有较高的能量和穿透力，对微生物有致死作用。 常用于大量一次性医用塑料制品的消毒；亦可用于食品、药品和生物制品的消毒或灭菌。,2019,-,91,用物理阻留的方法除去液体或空气中的细菌, 真菌。 常用滤器：薄膜滤器、玻璃滤器、石棉滤器（Seitz） 特点：只能除去细菌，真菌, 不能除去病毒、支原体、L型细菌。 应用：用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素，以及空气的