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课前自主预习案1 基因工程基础梳理系统化知识点一基因工程的基本工具 知识点二基因工程的基本操作程序 知识点三蛋白质工程 基能过关问题化一、判一判1有关工具酶的判断(1)限制酶只能用于切割目的基因。()(2)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。()(3)DNA连接酶能将两碱基间通过氢键连接起来。()(4)Ecoli DNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端。()(5)限制酶也可以识别和切割RNA。()(6)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶。()2有关载体的判断(1)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因。()(2)每个质粒DNA分子上至少含一个限制酶识别位点。()(3)质粒是小型环状DNA分子,是基因工程常用的载体。()(4)载体的作用是将携带的目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在并表达。()(5)外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制。()3有关基因工程原理与操作的判断(1)设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列。()(2)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列。()(3)为培育抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体。()(4)抗虫基因即使成功地插入植物细胞染色体上也未必能正常表达。()(5)检测目的基因是否成功表达可用抗原抗体杂交技术。()(6)应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其是否完全表达。()4有关基因工程的应用及蛋白质工程的判断(1)将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株。()(2)利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品,如人的血清白蛋白,这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中。()(3)由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用。()(4)蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质。()(5)蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构。()二、议一议1选修3 P6“寻根问底”DNA连接酶和DNA聚合酶的作用相同吗?试简要说明。提示:不相同。DNA连接酶连接的是两个DNA片段,而DNA聚合酶连接的是单个的脱氧核苷酸。2下图中的图1和图2分别表示的是EcoR限制酶和Sma限制酶的作用示意图,据图分析: (1)请说出EcoR限制酶和Sma限制酶识别的碱基序列及切割的位点。提示:EcoR限制酶识别的碱基序列是GAATTC,切割位点在G和A之间;Sma限制酶识别的碱基序列是CCCGGG,切割位点在G和C之间。(2)以上实例说明限制酶有何特性?提示:说明限制酶具有专一性。3据图分析抗虫棉的培育过程 (1)该基因工程中的目的基因和载体分别是什么?一般情况下,为什么要用同一种限制酶处理目的基因和载体?提示:目的基因是Bt毒蛋白基因,载体是Ti质粒。用同一种限制酶处理目的基因和载体,可以获得相同的黏性末端,便于构建基因表达载体。(2)该实例中,采用何种方法导入目的基因?为什么目的基因可以整合到染色体的DNA上?提示:采用的方法是农杆菌转化法,由于Ti质粒上的TDNA可转移到受体细胞且能整合到受体细胞的染色体DNA上,而目的基因又插入到了TDNA上,所以目
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