抗体药物的研究和应用.ppt

抗体药物的研究和应用,沈倍奋 军事医学科学院基础医学研究所,(轻链),(重链),抗原,抗原,治疗用抗体发展的三个阶段,单克隆抗体,基因工程抗体,多克隆抗血清,已在欧美得到批准上市的治疗用抗体,NH2,COOH,CD20,B,N,T,M,RBC,P,PreB,ProB,+,+,actB,B blast,PC,Rituxan(美罗华）,美罗华治疗非何杰金氏B淋巴瘤的 临床试验,EGFR,HER4,HER3,HER2,HER2,HER2,HRG,NRG-2 NRG-3,BTC EPR HB-EGF,EGF TGF AR,人表皮生长因子家族成员及其配体,Herceptin + 化疗治疗乳腺癌的疗效,单独化疗 Herceptin + 化疗,有效率 32% 50% 中位有效期 6.1月 9.1月 1年死亡率 33% 22% 中位生存时间 20.3月 25.1月,抗血小板凝集的原理图,ReoPro的疗效,ReoPro治疗组 对照组,术后1月综合 6% 14.6% 风险率 术后6月综合 7.4% 15.9% 风险率,可用抗体治疗的疾病,移植排斥,肿瘤,自身免疫病,心血管疾病,感染性疾病,过敏性疾病,银屑病： IL-8，CD11a，ICAM-3，CD80，CD2，CD3 RA： Complement（C5），TNF-，CD4 Crohn，s 病： TNF- 溃疡性结肠炎： 47 SLE： C5，CD40L 多发性硬化症： VLA4，CD40L,治疗性抗体的靶分子,自身免疫性血液系统疾病： CD64（FcR） 哮喘： IL5，IL4，IgE，CD23 GVHD： CD147，CD2， 同种移植物排斥： CD3，CD25，2 integrin CD4，CD147，CD40L，CD18 中风： 2 integrin 青光眼手术： TGF-2,肿瘤 卵巢癌： CA125 结肠癌： 171A 肺癌： GD3表位 头颈部癌： EGFR 乳腺癌： HER2/neu 肉瘤： V3 integrin CLL： CD52 AML： CD33 NHL： CD20，CD22，HLA，HLA DR,阻断和中和作用 诱导细胞凋亡 诱导抗独特型网络 补体介导的细胞毒 依赖抗体的细胞毒 影响信号传导 免疫调节 利用抗体的靶向性,抗体药物作用原理,理想的抗体药物的性质,高特异性和高亲和力（Kd=1081010L/M） 对人没有免疫原性，不诱导HAMA反应 游离抗体不激活补体 一旦结合到靶抗原上，能诱导效应功能 细胞系稳定，适合在无血清培养基中进行 大规模培养 抗体符合生物制品标准,SDA批准进入临床的体内诊断用抗体,131I-抗人肝癌单克隆抗体(HAb18、Hepama-1） 99mTc-抗人小细胞肺癌单克隆抗体（2F7）,SDA批准进入临床的治疗用单抗,抗T细胞免疫毒素 抗C-ALL免疫毒素 131I-抗肝癌单克隆抗体 抗人CD25单克隆抗体 抗乙脑单克隆抗体 抗流行性出血热抗体 抗人CD3单克隆抗体 抗人IL-8单克隆抗体,我国体内诊断和治疗用抗体的研制,问 题 异源蛋白导致产生抗抗体，影响靶向性和效果 靶部位摄取的量太低 效应功能弱 在体内被清除速度快,对 策 抗体人源化 改变抗体大小 连接毒素、放射性同位素、药物 抗体人源化,抗体治疗存在的问题及对策,抗体药物改造的方向,抗体人源化和人源抗体制备 改变抗体分子大小 增强抗体亲和力 增强抗体效应功能,鼠抗体人源化或人源抗体的制备途径,鼠单抗恒定区的人源化：人鼠嵌合抗体 鼠单抗可变区的人源化：重构抗体或改型抗体 表面氨基酸残基的“ 人源化” 抗体库技术 表位印模选择（epitope imprinted selection) 转基因动物,鼠抗体可变区,人抗体恒定区,人鼠嵌合抗体,人抗体可变区,重构抗体,L,L,H,H,VL,VH,Fd,Fv,Fab,Fab,Fc,F（ab）2,抗体分子的基本结构和各种分子片段,Minibody,scFv,Diabody,抗体及其片段分子的特性,抗CEA抗体和抗体片段在肿瘤和 血液中的比值,0,10,20,30,40,50,60,70,0,10,20,30,40,50,60,小 时,比值,scFv,minibody,diabody,完整抗体,偶连细胞毒物质,连接放射性同位素(131I、99mTc） 连接植物或细菌毒素（ricin、PE40） 连接细胞毒性药物（C1027、柔红霉素）,免疫毒素,C,C,V,C,V,C,C,C,SPDP,SPDP,Ricin A,Ricin A,（-FcRI-Ricin A）,双特异性抗体的特点 将免疫细胞锚着于肿瘤部位，提高肿瘤部位的效靶比。 不受MHC的限制，直接激活免疫细胞的杀瘤机制。,正在进行临床试验的双特异性抗体,BsAb 特异性 临床阶段 病种 BIS-1 CD3 x EGF-R phase I renal OC/TR CD3 x folate R phase II ovarian SHR-1 CD3 x CD19 phase I B-C HRS-3/A9 CD16 x CD30 phase I-II H D 2B1 CD16 x Her-2/neu phase I tumor MDX-H210 CD64 x Her-2/neu phase I-II tumor MDX-447 CD64 x EGF-R phase I-II tumor,双特异性抗体,抗人肝癌单抗 /抗人 CD3单抗 抗Her2/neu单抗/抗人CD16单抗 抗人CD20单抗/抗人CD3单抗,CH1,CH2,CH3,IL-2,scFv,IL-2,免疫细胞因子(Immunocytokine),抗体融合蛋白,抗人Her2/neu单抗-IL-2,CTLA-4-Ig,抗纤维蛋白-ProUK,抗活化血小板-UK,细胞内抗体：在细胞内合成并作用于细胞内组分的抗体,细胞核,EGFR,EGFR,EGFR,细胞内抗体的作用机理,阻断靶蛋白的活性部位