第二节_细菌的营养与生长繁殖.ppt

（一) 化学元素,一、细菌细胞的化学组成,碳、氢、氮、氧、磷、硫等,有机物元素：,无机离子：,钾、钠、铁、镁、钙等,（二） 化学成分,占细胞总重量70%-90%,主要的固形成分，占40%-80%,水:,蛋白质：,核酸：,糖类，脂类和维生素,dna：3%，rna：10%,二、细菌需要的营养物质及生理功能,碳源 氮源 无机盐 生长因子 水,三、吸收营养物质的方式,略。,四、细菌的营养类型,略。,五 细菌的生长繁殖,3、ph： 一般最适为7.0-7.6,2、温度：一般最适温度为37,1、营养物质,4、对气体要求,5、渗透压：嗜盐菌需在高浓度的nacl（3%）生长,（一） 生长繁殖的条件,对o2要求：专性需氧菌 微需氧菌 耐氧菌 兼性厌氧菌 专性厌氧菌 对co2要求： 5% co2,水 碳源 氮源 无机盐 生长因子, 细菌的繁殖方式,二分裂法,生长方式：,代时：单个细胞完成一次分裂所需要的时间 大多数细菌的代时约2030min,速度,六、细菌的人工培养,（一）细菌培养的条件,充足的营养物质 合适的酸碱度 合适气体 合适温度,（二）培养基,人工配制的满足细菌及其他微生物生长繁殖和（或）积累代谢产物的营养基质,根据物理性状类分类,液体培养基：用于增菌。 半固体培养基：检测细菌的动力和短期保存菌种。 固体培养基：用于分离、纯化和保存菌种，做病原学诊断和产生菌苗用于预防。主要用于鉴定。,1 基础培养基,555,3 选择培养基,4 鉴别培养基,2 营养培养基,5 厌氧培养基,根据营养和用途分类,（三）细菌的培养方法及生长现象,1.固体培养法,菌落：单个细胞在固体培养基表面经过培养形成肉眼可见的微生物集团。,菌落照片,菌落的特征： （包括大小、形状、颜色、边缘、质地、透明度、光泽、表面、湿润度等）,菌苔：,菌苔：微生物密集生长所形成的。其作用是可用来保存菌种。,固体培养基中,菌落r型,菌落（s型）,菌苔,表面光滑、湿润、边缘整齐（新分离细菌）,表面粗糙、干燥、表面皱纹或颗粒状、边缘不齐（陈旧菌落）,s光滑型菌落,r粗糙型菌落,粘稠、有光泽、似水 珠样，多见有厚荚膜或丰富粘液层的细菌,m粘液型菌落,菌落类型,液体培养基中,沉淀生长,混浊生长,表面生长,2.液体培养法,半固体中,混浊生长,沿穿刺线生长,有鞭毛 细菌,无鞭毛 细菌,3.半固体培养法,4、培养方法 取检菌标本或细菌接种于适宜培养基,37培养箱,18-24h,大量细菌生长繁殖,分离培养 纯培养,分离培养：将培养物划线接种在固体培养基表面，使原混杂的细菌在固体培养基表面散开，形成分离的单个菌落。 纯培养：从固体培养基中挑出一菌落，移种到另一培养基中，此时生长出来的细菌称纯种，这种培养方法为纯培养。 如果某一培养物是由单一微生物细胞繁殖产生的，就称之为该微生物的纯培养物（pure culture)。,接种工具,（四）细菌的生长繁殖规律和生长曲线,生长曲线：细菌在有限的体系中的生长成为群体生长，具有一定的规律性，描述细菌群体在整个培养期间的菌数变化规律的曲线称之为生长曲线。 将少量单细胞的纯培养，接种到一恒定容积的液体培养基中，在适宜条件下培养，定时取样，测菌量。以培养时间为横座标，培养物中活菌数的对数为纵座标，可绘制为生长曲线，根据其将细菌的群体生长繁殖分为迟缓期、对数期、稳定期和衰退期,（1）迟缓期（lag phase）,a 现象：1-4h，活菌数没增加，曲线平行于横轴。 b.原因：由于细胞进入新环境,细胞数目无增长，甚至有所下降有一个适应过程，进行大量的酶（诱导酶）的生成。 c.细胞特点:细胞的新陈代谢非常旺盛，个体体积显著增大，但不分裂繁殖，为细胞分裂作准备。,d.此期长短：与菌种遗传特性、菌龄、接种量、培养条件有关。 e.意义：在实际工作中，缩短lag phase 的措施： 1）加大接种量（群体优势-适应性增强） 2）先用对数期的种子（此时细胞分裂旺盛） 3）调整培养基的成分，使种子基含有发酵培养基的成分 4）选用繁殖快的菌种,（2）对数期(log phase),1. 现象： 8-18h，又称指数期，生长迅速，细胞数目以几何级数增加，其对数与时间呈直线关系。 2.细胞特点：此时细胞的大小、形态、染色性、生理特征等均趋于一致，代谢活跃，对外界环境因素的作用敏感。生长速率高，代时稳定。研究细菌的性状时应选用该期的细菌。,(3)稳定期（stationary phase):,b.细胞特点: 有害物增加，死亡数增加，细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物在此期产生，细胞内开始贮藏物质。稳定期细胞数目及产物积累达到最高。,a.现象： 活菌数目不增不减，生长速率趋于0,曲线有一下降的