探讨棕叶花提取物对动物离体子宫的兴奋作用

1 / 6 探讨棕叶花提取物对动物离体子宫的兴奋作用 摘要：目的探讨棕叶花不同提取物对家兔、豚鼠、大鼠、小鼠离体子宫的兴奋作用。方法采用 BL-410 生物机能实验系统，观察棕叶花 4 种提取物对非孕或注射己烯雌酚后家兔、豚鼠、大鼠、小鼠离体子宫的兴奋作用，并用 EC50 与益母草流浸膏进行比较。结果棕叶花正丁醇组分、水溶性组分均能使非孕或注射己烯雌酚后大鼠、小鼠、豚鼠、家兔离体子宫平滑肌的收缩频率增快、收缩幅度增强、张力明显提高，其兴奋子宫的强度比益母草流浸膏显著（ P 关键词： 棕叶花； 离体子宫； 兴奋作用 棕叶花（别名冬 叶花、柊叶花） Phrynium capitatum Willd (flower)为竹芋科（ Marantaceae）多年生本草，分布广西、广东、云南等地。全草可入药。文献记载： “ 全草味甘淡，性微寒，有清热解毒、凉血、止血和利尿之功效。 ” 广西少数民族民间有用其花治疗月经过多、血崩（功能性子宫出血）及失音等疾病之经验（广西民族药简编， 1980 广西药品检验所印行）。有文章报道棕叶花水提取物对孕或非孕小鼠、大鼠、豚鼠、家兔离体子宫及对家兔在体子宫都有兴奋作用 1，而关于其他溶剂提取物的药理研究尚未见报道。为了进 一步研究其他溶剂提取物对子宫的兴奋作用，本文采用2 / 6 BL-410 生物机能实验系统，观察棕叶花正丁醇、水溶性组分两种提取液对非孕或注射乙烯雌酚后家兔、豚鼠、大鼠、小鼠离体子宫的影响，并用 EC50与益母草流浸膏进行比较。 1 器材与方法 1.1 受试药物与试剂棕叶花采自南宁地区，晒干备用。受试药物的制备：取干棕叶花 750 g用中药材粉碎机粉碎后置 10 000 ml 圆底烧瓶中加 95%乙醇浸没，加热冷凝回流 1 h，抽滤，重复上述操作 3 次；药渣 50%乙醇浸没，热冷凝回流 1 h，抽滤，重复 3 次。合并滤液，用旋转 蒸发仪浓缩。再加适量蒸馏水使浓缩物完全溶解，置 6 000 ml 的锥形瓶中，加石油醚 1 000 ml 振摇 1 h，然后离心 15 min（ 6 000 r/min），取上层液体，如此重复 5次；剩下部分用醋酸乙酯、正丁醇、蒸馏水重复石油醚操作。所得的石油醚（为 1 号）、醋酸乙酯（为 2 号）、正丁醇（为 3 号）、水溶性组分（为 6号）旋转蒸发仪浓缩， 45 烘干后置冰箱备用。益母草流浸膏经烤箱 60 烘干，固体经磨粹后放入磨口玻璃瓶备用。 试剂：石油醚由广州化学制剂厂出品（批号 XX0501）；乙酸乙酯购自广东精密化学品公 司（批号 XX0203）；正丁醇购自广东光华化学厂有限公司（批号 XX0717）；益母草流浸膏为桂林漓江益佰制药厂产品（批号 XX0617）。 3 / 6 1.2 仪器 SYC-15超级恒温水浴（北京桑力电子设备厂）；旋转蒸发器（郑州长城科工贸有限公司）； BL-410 生物机能实验系统（成都泰盟电子有限公司）。 1.3 动物昆明种小鼠、 Wistar 大鼠、家兔、豚鼠均由桂林医学院动物室提供。 1.4 动物离体子宫标本的制备取正常或经产未孕小鼠、大鼠、豚鼠和家兔，脱颈椎处死后剖腹取出子宫，立即置于盛有营养液（小鼠用 Tyrode 2氏液、大鼠用 DeJaion氏液 3、家兔用 Krebs 氏液 2、豚鼠用 Van Dyke-Hasting 2氏液）的玻璃皿中，剥离子宫壁上附着脂肪组织，将一侧子宫角的两端分别用线结扎，按文献方法 4一端固定于通气钩上，另一端连接在张力换能器（小鼠、大鼠和豚鼠用 0 3 g，家兔用 5 g 张力换能器）上，置于含 30ml 营养液的麦氏浴槽，通入氧气，每秒通 1 2 个小气泡，麦氏浴槽恒温在 (370.5) ，张力换能器连于 BL-410生物信号采集系统，调零、定标。增益调节 G=50，时间常数 T=DC，滤波调节 F=30Hz，扫描速度 S=16.00s/div 4。稳定 10 min后，进行实验。 1.5 给药方法待标本稳定 10 min 后，加入正丁醇组分（ 0.1 g/ml）不同剂量，先测出兴奋子宫的最低有效量，然后按最低有效量依次增加剂量，直至子宫收缩达到最大效4 / 6 应，每次加药后观察和记录 10min 离体子宫收缩活动，更换营养液，冲洗 3次，再加下一个浓度。小鼠最终浓度为 0.163.3 mg/ml，大鼠最终浓 0.33 3.3 mg/ml，家兔最终浓度为0.33 2.00 mg/ml，豚鼠最终浓度为 0.03 0.40 mg/ml。水溶性组分、益母草流浸膏组分均按上述方法操作。 2 结果 2.1 对小鼠、大鼠离体子宫平滑肌的影响 正常或经产未孕小鼠、大鼠各 8 只， 3 号与 6 号均能引起大鼠、小鼠离体子宫兴奋，使小鼠、大鼠离体子宫收缩频率、收缩振幅和收缩张力增加。大鼠子宫在剂量大于 2.67 mg/ml时出现强直，小鼠子宫在剂量大于 2.00 mg/ml 时出现强直，并维持 20 min 以上，用营养液冲洗后子宫可复原。结果见图 1 2。小鼠在最终浓度为 0.16 3.3 mg/ml 的浓度范围内呈量 -效关系，大鼠子宫在最 终浓度为 0.33 3.3 mg/ml的浓度范围内呈量 -效关系，在无自动节律收缩的子宫肌段， 3 号、 6 号均可使小鼠、大鼠离体子宫产生节律性地收缩。注射己烯雌酚后的小鼠（ 0.2 mg/kg）、大鼠（ 0.5 mg/kg）上述作用更为明显。结果见图 3 4。 益母草流浸膏浓缩物无论对孕或非孕大鼠、小鼠离体子宫作用不明显。 2.2 对妊娠家兔离体子宫平滑肌的影响妊娠家兔 4只，共实验 4次，结果一致， 3号与 6号均能引起家兔子宫5 / 6 的兴奋，使子宫肌的收缩频率、收缩振幅和收缩张力增加。在最终浓度为 0.33 2.00 mg/ml 的浓度范围内呈量 -效关系。结果见图 5 6。 2.3 对正常豚鼠离体子宫平滑肌的影响未孕成年豚鼠 8只，小剂量最终浓度为 0.03 mg/ml，就能引起豚鼠离体子宫的兴奋，使无自主收缩的子宫出现收缩。随着剂量的增加，离体子宫的收缩频率和幅度加快和增强。在剂量大于最终浓度为 0.33 mg/ml 时出现强直，这表明豚鼠对 3 号和 6 号更为敏感。结果见图 7 8。 2.4 计算 EC50 以每次加入药物后兴奋子宫平滑肌的最大效应为 100%，求出药物兴奋子宫的量效关系，以振幅的百分数为 y轴，以最终浓度为 x轴，代入回归 方程 y=ax+b，经计算机（ Windows98, Microsoft Excel 数据分析工具）求出 a 和 b，再求出平均 50%的效应即 EC50。结果见表 1。表 1 正丁醇组分和水溶性组分及益母草流浸膏对不同动物离体子宫的 EC50（略） 3 讨论 实验结果表明，棕叶花正丁醇组分、水溶性组分均能使非孕或注射己烯雌酚后大鼠、小鼠、豚鼠、家兔离体子宫平滑肌的收缩频率增快、收缩幅度增强、张力明显提高，提示这两种提取物均含有兴奋子宫平滑肌的活性物质。通过水溶性6 / 6 组分、正丁醇组分对小鼠、大鼠离体子宫 EC50 的比较，前者兴 奋子宫作用比后者稍强（见表 1），提示活性物质在水溶液中含量比在正丁醇稍多。通过注射己烯雌酚后的比较（见表 1），其结果表明雌激素对两种组分的子宫平滑肌兴奋有增强作用；与益母草流浸膏 EC50 的比较，其兴奋子宫作用明显强于益母草（ P 2徐叔云 ,卞如濂 ,陈 修 ,等 .药理实验方法学 ,第 3版 M .北京 :人民卫生出版社 ,2002:1584. 3 Ian Kitehen Textb