探讨白宁对糖尿病肾病模型大鼠肾脏ctgf表达的影响

1 / 4 探讨白宁对糖尿病肾病模型大鼠肾脏 CTGF表达的影响 摘要： 目的 观察肾白宁对大鼠糖尿病肾病模型 CTGF 表达的影响，并探讨其作用机制。方法 大鼠腹腔麻醉下进行左侧肾脏切除术，术后 2 周按照 50mg/kg 剂量，予以 STZ 腹腔注射 ;72h 后，尾静脉取血，将空腹血糖 16.7mmol/L 者随机分为模型组、中药肾白宁组、洛汀新对照组，每组 15 只，另取 15 只为假手术组。 CTGF 检测采用免疫组化的方法。结果 12 周后光镜下可见模型组肾小球毛细血管球萎缩、球囊腔略增大、肾小球出入球小动脉有轻度内皮细胞增生及纤维化、基底 膜略增厚，远曲小管扩张，肾间质充血、水肿、血细胞浸润，并有轻度间质纤维化。模型组、中药组、对照组肾组织 CTGF 阳性表达较假手术组高，差异有显著性 (P0.05)。结论 具有滋补肝肾，益气固精，祛瘀化浊解毒之功效的肾白宁通过抑制肾 CTGF 表达，抑制细胞外基质增加和肾脏纤维化保护了肾功能延缓了 DN 的发展。 关键词： 糖尿病肾病 ;肾白宁 ;CTGF 糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症之一 ,已经成为终末期肾病的首要病因。早期的病理特征是肾脏肥大，肾小球基底2 / 4 膜增厚和系膜基质进行性积聚。几年来 ,导师应用肾白宁治疗糖 尿病肾病取得了较好的临床疗效 ,因此我们以糖尿病肾病大鼠模型作为研究对象 ,探讨肾白宁对糖尿病肾病大鼠肾损害的防治作用机制。 1 材料与方法 1.1 药物 肾白宁：由哈尔滨世一堂研究所配制成浸膏 (药物组成：黄芪 50g，熟地黄 20g，山药 15g，山茱萸 15g，牡丹皮 15g，茯苓 25g，泽泻 15g，桑螵蛸 35g，水蛭 10g，白花蛇舌草 45g，当归 15g，益母草 15g 等 )。洛汀新 (贝那普利， 北京诺华制药有限公司 批号： X1266)。 1.2 实验方法 1.2. 1 实验动物 清洁级健康 SD 雄性大鼠 (200240g)60 只。 1.2.2 糖尿病肾病模型的建立 动物适应性喂养 1 周后开始实验。随机取 15 只为假手术组，假手术组大鼠在腹腔麻醉状态下 ,背部切口 ,剥离左肾脂肪包膜 ,关闭缝合切口。其余大鼠腹腔麻醉下进行左侧肾脏切除术，术后恢复 2周。将 STZ 溶于 0.1mol/L 柠 檬酸缓冲液 (pH4.4)中，避光条件下迅速配成浓度为1%STZ 溶液。动物禁食 12h 后，按照 50mg/kg 剂量，予以 STZ腹腔注射 ;72h 后，尾静脉取血，测定空腹血糖，空腹血糖16.7mmol/L 作为 DN 大鼠成模标准。 3 / 4 1.2.3 分组与给药 造模成功后大鼠随机分为模型组、中药组、对照组及假手术组各 15 只，共 60 只。各组自造模成功第 1 天起开始给药。假手术组、模型组：给予每日1 次蒸馏水 1ml 灌胃 ;中药组 :将肾白宁浸膏溶于生理盐水，配制成混悬液，以 2.97g/(kgd)( 含生药量 )灌胃，每日 1次 ;对照组：洛汀新 (贝那普利 )溶于生理盐水，配制成混悬液， 0.9mg/(kgd) 灌胃，每日 1 次。均给药 12 周 ,每 2 周称重调整剂量。给药期间每组大鼠分笼饲养 ,随意饮水 ,食用标准动物饲料。 1.2.4 观 察 指 标 及 检 测 方 法 结 缔 组 织 生 长 因 子(Connective tissue growth factor, CTGF)检测采用免疫组化的方法，并使用图像采集系统测定阳性反应面积，每张切片随机选取 5 个视野，每组分析 15 个标本。此项内容由黑龙江中医药大学附属第一医院病理科帮助完成。 1.3 统计学处理 所有数据均以 x s 表示，采用SPSS 10.0 软件进行统计学分析。 2 结果 12 周后光镜下可见模型组肾小球毛细血管球萎缩、球囊腔略增大、肾小球出入球小动脉有轻度内皮细胞增生及纤维化、基底膜略增厚，远曲小管扩张，肾间 质充血、水肿、血细胞浸润，并有轻度间质纤维化。模型组、中药组、对照4 / 4 组肾组织 CTGF 阳性表达较假手术组高，差异有显著性(P0.05),见表 1。表 1 各组肾组织 CTGF 表达情况 注：与假手术组比较， *P 2 Roestenberg P, van Nieuwenhoven FA, Joles JA, et al.Temporal expression profile and distribution Pattern indicate a role of connective tissue growth factor (CTGF/CCN-2) in diabetic nephropathy inmice.Am J Physiol Renal Physio,XX, 290(6):F1344-F1354. 3 RiserBL,Cortes P,Denichilo M, et al.Urinary CCN2(CTGF) as a possible predictorofdiabetic nephropathy: Preliminary report.Kidney International, XX, 64: 451-