提取物致突变实验研究论文

1 / 4 提取物致突变实验研究论文 1 材 料 1.1 药品与动物杜仲提取物主要成分绿原酸，张家界恒兴生物科技公司提供。昆明种小鼠购于湖南中医学院实验动物中心，批号： 990218 。注射用环磷酰胺：上海华联制药有限公司，批号： 030504。叠氮钠（ NaN3）：上海试剂一厂，批号： 990706。鼠伤寒沙门氏菌株（ TA97， TA98， TA100，TA102）购于中国农科院兽医药品监察所。 1.2 主要仪器 ES-C300A电子天平：湘仪天平仪器厂。组织匀浆器：北京玻璃仪器厂。 2 方法与结果 2.1 小鼠骨髓嗜多染红细胞（ PCE）微核试验小鼠 60只，体重（ 282 ） g，雌雄各半，随机分为 6组。杜仲提取物稀释液设为 1.28， 0.64， 0.32， 0.16 g/kg 4 个剂量组，阴性对照为蒸馏水，两次灌胃给予受试物。阳性对照为环磷酰胺（ CP） 40 mg/kg 体重，两次腹腔注射间隔 24 h，第 2次给受试物后 6 h，颈椎脱臼处死动物。按国家标准 4取骨髓制片，每只动物计数 1 000个嗜多染红细胞，微核率以百分率表示。结果见表 1。 表 1 杜仲提取物对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率实验（略） 2 / 4 与阴 性对照组比较， *P 0.01， P 0.05； n=10 由表 1可知，实验组雌、雄小鼠微核发生率为 0.39%0.43%，阴性对照组为 0.43%，阳性对照组为 4.38%，实验组与阴性对照组比较，微核发生率均无差异显著性（ P0.05），阳性对照组与阴性对照组比较，差异性显著（ P 2.2 杜仲提取物对小鼠精子畸形的试验 雄性小鼠 60只，体重（ 3035） g，随机分为 6 组，实验组剂量为 1.28， 0.64， 0.32，0.16 g/kg体重与阴性对照组（生理盐水），经口腔给予。阳性对照组用环磷酰胺 40 mg/kg体重腹腔注射。各组 1 次 /d，连续 5 d 给予受试物。于首次给药后第 35 天，颈椎脱臼处死小鼠，按纪云晶 5方法制片。每组计数 2 000 个精子，计算其畸形率。结果见表 2。 表 2 杜仲提取物对小鼠精子畸形的影响（略） 与阴性对照组比较， *P 0.01， P 0.05； n=10 由表 2可知，实验组小鼠的精子畸形率为 7.6% 8.3%，阴性对照组为 7.8% ，阳性对照组为 71.8%，实验组与阴性对照组比较差异无显著性（ P0.05），阳性对照组与阴性对照组比较差异极显著（ P 2.3 Ames试验按 Ames 标准方法 6对鼠伤寒沙门氏突变型菌株 TA97， TA98， TA100， TA102进行增菌培养后进行鉴定，所采用的 4个菌株特性均与 Ames3 / 4 试验标准相符。在加与不加活化物的条件下进行平板掺入法试验。杜仲提取物用双蒸馏水稀释为 500， 400， 300， 200 g/皿 4 个剂量组，阳性对照为叠氮钠（ NaN3） 10 g/ 皿，阴性对照为双蒸馏水 100g/ 皿，每个剂量组重复做 2 个平皿，结果见表 3。 表 3 杜仲提取物对 TA平均回变菌落数的影响（略） +S9:加 S9活化物， -S9:不加 S9活化物 表 3可知，不同剂量的杜仲提取物，无论加或不加 S9活化系统，其回变菌落数与阴性对照组（双蒸馏水）比较，均无高于自发回变菌落数的 2倍，而阳性对照组菌落数均高于阴性对照组的 2 倍以上。 3 讨论 不同剂量杜仲提取物对小鼠 PCE的试验表明，杜仲提取物稀释液对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率未见明显影响（ P0.01）。说明本品对细胞染色体无诱变作用。对小鼠精子畸形的影响试验，结果表明，杜仲提取物稀释液对小鼠精子畸形发生率未见明显影响（ P0.01），说明本品对小鼠精子无畸形诱变作用 ，戚向阳等 7用杜仲粉对小鼠精子进行的药理作用研究结果表明，杜仲粉对小鼠精子不产生畸变4 / 4 作用，其结果与本研究结果一致。 采用鼠伤寒沙门氏突变型菌株 TA97， TA98， TA100，TA102 进行回复突变试验，结果表明，不同剂量的杜仲提取物，无论加或不加 S9 活化系统，其回