研究冬虫夏草对抗体形成细胞的作用

1 / 4 研究冬虫夏草对抗体形成细胞的作用 摘要：目的观察冬虫夏草对小鼠抗体形成细胞的作用。方法用 100%浓度冬虫夏草浸出液定期给小鼠灌胃，然后进行小鼠抗体产生能力检测、特异玫瑰花环结形成细胞检测（ SRFC）、血清 IgG 检测。结果用药组以上 3 项免疫学指标均增高。结论冬虫夏草有明显促进抗体形成细胞的作用。 关键词： 冬虫夏草； 免疫功能；小鼠 冬虫夏草，始载于本草纲目拾遗。因其冬季为虫，夏季为草，故名。为麦角菌科真菌冬虫夏草 Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc，寄生 蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。主产于四川阿坝藏族自治州松潘、理县、茂汶羌族自治县、甘孜藏族自治州、德格、道孚、青海玉树、果洛藏族自治州及同德、同仁，云南中甸、德钦、丽江纳西族自治县等地，均为野生。主要功效：益肾补肺，止血化痰，止嗽定喘 1。本实验主要研究冬虫夏草对抗体形成细胞作用，旨在为冬虫夏草的临床应用提供科学依据。 1 器材与方法 1.1 仪器和药物 低温冷冻离心机（ Beckman,美国）；美国 Multiskan2 / 4 产全自动酶标仪；恒温水浴箱（上海）；电泳仪（上海 ）； 100目不锈钢网。冬虫夏草（购于附属医院中药房），取 100 g加水 1 000 ml，文火煎煮 2 h，去渣浓缩为 100 ml（浓度为100%）备用。 1.2 动物及分组 取 BALB/C 纯系小鼠 24 只，体重 18 22g，雌雄各半，随机分为两组，每组 12 只， 组为生理盐水对照组， 组为药物实验组。 1.3 方法 组用生理盐水灌胃， 1 次 /d， 0.5 ml/(次 只 )； 组用冬虫夏草液灌胃， 1 次 /d， 0.5 ml/(次 只 )，共灌 10次。 1.4 检测项目 1.4.1 定量溶 血分光光度测定法（ QHS） 2 本法体外测定 B 细胞产生分泌抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量（以 OD 值表示），其结果可反映机体体液免疫功能。实验第 5 天分别将 5%的绵羊红细胞 0.2 ml 注入各组小鼠腹腔内。第 11 天颈椎脱臼处死小鼠，常规取脾脏，然后脾细胞计数，调整细胞浓度至 1107/ml ，平均每组每只小鼠设 3 支试管，每管依次加脾细胞悬液， 0.2%绵羊红细胞（ SRBC）， 110 新鲜豚鼠血清（补体）各 1 ml 混匀。另外分别设补体、脾细胞以及 SRBC 对照管各 3 支，置 37 水浴3 / 4 温育 1 h， 2 000 r/min 离心 5 min。取上清液用 96 孔细胞培养板于全自动酶标仪 450 nm 波长处测 OD 值，作为 QHS 反应值。 1.4.2 特异玫瑰花环形成细胞检测（ SRFC） 3 取脾细胞 0.1 ml（ 1107/ml ）， 1%SRFC 0.1 ml，小牛血清 0.1 ml，试管内混匀， 4 放置 2 h，加结晶紫溶液20 l ，计数 500 个淋巴细胞，求出 SRFC/106 脾细胞的形成率。 1.4.3 血清 IgG 检测 3 采用对流免疫电泳实验，摘除小鼠眼球取血，分离血清，取不同稀释度血清 10 l 加 入阴极端琼脂板孔中，将琼脂板阳极端孔内加入羊抗鼠 IgG(132)10 l ，将对流免疫电泳通电 30 min 后观察结果，以血清最高稀释度仍有明显沉淀线为准。结果以稀释度表示。 2 结果 2.1 冬虫夏草对抗体形成细胞的影响 表 1 结果显示，用药组可促进抗体细胞形成，与对照组相比有显著性差异（ P 2徐叔云 . 药理学实验方法 ,第 2 版 M .北京 :人民卫生出版社 ,1992:1230.