研究棕榈叶中黄酮类化合物的提取工艺

1 / 5 研究棕榈叶中黄酮类化合物的提取工艺 摘要：目的 研究棕榈叶中黄酮类化合物的提取条件。方法将棕榈叶严格控制在一定温度和 pH 值条件下，浸提浓缩测吸光度。结果以 70%乙醇溶液浸取棕榈叶，提取温度为 65 ，固液比为 130 ，提取时间为 2 h，提取率最高。结论 棕榈叶中黄酮类化合物的最佳提取条件为：提取温度 65 ，提取时间 2 h，固液比 130 。 关键词 : 棕榈叶；黄酮类化合物；提取工艺 棕榈为热带及亚热带树种，产地分布在印尼、马来西亚和南非等国，我国秦岭以南、长江中下游地区及华南沿海均有栽培。棕榈中 富含黄酮类化合物，而生物类黄酮类化合物具有抗氧化、延缓衰老、防癌抗癌、抗炎症反应以及增强机体免疫力等多种生物活性 1，在原产地大量棕榈叶都作为废弃物而未被合理利用。棕榈叶中黄酮类化合物的提取直接决定着其药用价值。文章对影响浸取的主要因素进行研究。 1 器材 无水乙醇、芦丁、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等均为分析纯国产试剂。棕榈叶由马来西亚灵芝仙公司提供。 2 / 5 日本岛津 UV-120-02 紫外分光光度计，回流冷凝器，Sartorius BS124s 电子分析天平，常用电子天平，电热恒温水浴加热锅，植物 粉碎机，恒温鼓风干燥箱， pH 计等。 2 方法 定量称取棕榈叶置于回流冷凝装置中，加入浸提剂乙醇，严格控制在一定地温度和 pH 值条件下，浸取 3 次， 3 h/次，将浸取液合并后抽滤浓缩，并置于冷冻干燥机中制成粉末状。配取定量试液和不同浓度的芦丁溶液分别同步做与硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等的显色反应，然后以芦丁作为标准溶液，用分光光度计在 510 nm 处测定吸光度，计算浸取液中总黄酮类化合物的含量及浸取率。 3 结果与分析 黄酮类化合物在花、叶、果等组织中，一般多以苷的形式存在，而在木部坚硬组织中，则多 为游离苷元形式存在。黄酮苷类以及极性稍大的苷元（如羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查耳酮等），一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混和溶剂进行提取 2。极性溶剂中，乙醇的使用安全性高，价格较低，可回收利用，故本研究选定乙醇水作为提取溶剂。分别考察了乙醇浓度、提取温度、料液比、提取时间等因素对浸取率的影响。 3.1 浸提剂乙醇质量分数的确定 考虑到温度过高会使黄酮类化合物氧化，过低会降低3 / 5 提取率，故在确定提取剂质量分数时，初步选取在 55 ， 65下进行实验。称取 5 份（ 5 g）棕榈叶粉置于具塞试管中，分别加入体积分数为 20%， 40%， 60%， 80%， 90%的乙醇各 15 ml，在 55 ， 65 恒温水浴锅中提取 2 h，过滤后分别取 1ml提取液，用同浓度的提取液定容至 25 ml，分别取出 0.2 ml，采用 NaNO2-Al(NO3)3 -NaOH 显色法，进行显色反应，然后以芦丁作为标准液，用分光光度计在 510 nm 处测定吸光度，进行分析，结果如图 1 所示。 由图 1 可知：随着乙醇浓度的提高，黄酮类物质提取量也随之增加，在乙醇浓度为 70%处提取量出现峰值，当乙醇浓度大于 70%，提取量减少，故本实验采用质量分数 70%的乙醇作为提取剂。 3.2 最佳提取条件的确定根据棕榈叶提取率的主要影响 因素：固液比，提取温度，提取时间，笔者设计了 3因素 3 水平的正交实验来确定最佳提取条件，其因素水平设置（见表 1）。实验方法如下：称取棕榈叶 10 g 于回流冷凝装置中，用质量分数 70%乙醇在所选取的条件下提取 2 次， 3 h/次，合并两次滤液后浓缩，定容，移取一定量定容后的试样进行显色反应并用分光光度计分析，计算提取率，实验结4 / 5 果与分析结果见表 2 3。表 1 正交实验因素及水平（略）表 2 正交实验 结果分析（略）表 3 方差分析（略） 正交实验结果表明，以 70%乙醇溶液浸取棕榈叶时，最佳提取条件为 A2B3C2。即提取温度为 65 ，固液比为 130 ，提取时间 2 h。由表 2 可知， RARBRC,提取温度之间存在的差异相对显著，随提取温度的升高，提取率有所降低，则说明若温度过高，黄酮类化合物的结构可能会受到破坏，造成活性成分分解。 4 结论 通过以上实验结果确定，用 70%乙醇提取棕榈叶中黄酮类化合物的最佳提取工艺条件为：提取温度 65 ，固液比130 ，提取时间 2h。 【参考文献】 1覃 仁辉，张梦军，吴世容，等 .银杏中黄酮类化合物的提取及其医药学应用 J .长沙大学学报， XX