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临床免疫检测中的常见问题及对策研究 令海英常俊峰 1.甘肃省天水市武山县中医院，甘肃天水741306;2.天水四七医院，甘肃天水741000 摘要目的研究在免疫检测中经常存在的问题，以及相应的解决对策。方法选取xx年3月xx年4月我院免疫检测标本的13个相关项目用酶联免疫吸附试验方法的检测结果，同时对检验结果的影响因素进行分析和探究，并选择多重线性回归分析。结果有很多因素都会对临床免疫检测结果产生一定的影响，其中实验室中的湿度和温度，标本合格与否，试剂、标准品的质量，清洗过程等都有重要的因素。结论在临床免疫检验中只有严格执行检验操作规程、严格控制每一个细节，才能够提高检验的质量，得到准确地结果。 关键词临床免疫检验；常见问题；解决策略 R446.6A1672-5654（xx）03（c）-0104-02 免疫结果是医生对疾病诊断的一个重要依据，因此要必须提高免疫的检验质量。通过多年的临床研究发现，影响检验结果出现误差有很多因素，其中实验室中的湿度和温度，标本合格与否，标准品的质量，清洗过程等最为关键。由于免疫检验结果的重要性，因此对这些影响因素进行分析，提出相应的解决策略，使检验的准确性得以提高，才能保证临床对疾病准确地诊治。选取xx年3月xx年4月我院免疫检验的相关资料进行研究，现报道如下。 1资料与方法 1.1一般资料 选取xx年3月xx年4月我院免疫检测标本的13个相关项目用酶联免疫吸附试验方法检测的相关资料进行研究，检验的项目中有乙型肝炎的标志物，激素的标志物等13个相关项目，其中样本有1480份。对实验室进行相关的调查研究，内容有工作人员相关的素养，有学历、资历、从业时间、职称、经验等。对相关的仪器设备进行调研，包括洗液、维修、校正情况和操作的规范性。实验室的湿度、温度和卫生情况，试剂储存，标准品的质量，标本合格与否，清洗过程等。对实验操作的每个环节进行跟踪，严格控制。 1.2质量控制的方法 1.2.1仪器设备的控制在免疫检测之前对相关的仪器进行校准和检查。包括水浴箱、酶标仪、离心机，移液器、96孔板也要定期检查，减少和防止误差的出现。 1.2.2试剂的选择对试剂的有效时间和储存条件需要认真核对，尽量减少各种因素造成对结果的影响。如果有自配的试剂，在检测前要相应的鉴定，合格后再进行使用。 1.2.3标本控制标本采集严格按操作规程进行，包括采血时间、采血姿势、止血带使用方法，送检时间等都要严格控制。若患者服用的药物中有激素类的，要对采集时间更加严格，例如，促卵泡的激素、黄体激素以及生长激素，一定要特殊处理。 1.2.4室内质量的控制在检测时选择第三代的夹心法酶联的测试盒，首先检测相关的标记物，检验时注意规范的操作，避免出现污染的情况。 1.2.5检测后的控制检测工作完成后，工作人员要复查检验的结果，对于出现差异的数据要及时与相关科室核实。在检测结果得出后要将检验结果和标本进行相应的保存，可以在需要时查询。 1.3统计学分析 对本文出现的数据均采用SPSS14.0统计学软件进行检验，采用t对计量资料进行检验，采用2计数资料进行检验，P0.05差异有统计学意义。 2结果 对相关结果进行多元线性的回归分析，方程式为：y=0.604+0.0031+0.0382+0.0393+0.0034+0.0155+0.0316。关键的影响因素为实验室的适度和温度、标本和标准品的质量，清洗过程，试剂反应平衡常和操作人员的素质有关，由于影响较大，差异有统计学意义（P0.05），具体数据见表1。 表1多元性的回归结果 3讨论 只有在免疫检验中减少误差，提高检验质量，才能为医生对疾病的诊断提供科学有效的依据。因此在进行相关的免疫测定时，要按照相关的规定进行规范的操作1。通过对影响检验结果的相关因素进行分析后，采取一系列的控制策略。室内质量主要包括对样本的可靠处理，以及结果报告和相应的解释，在实验报告中要保证简洁性和完整性，在进行相关工作时要保证严谨的工作态度，避免出现应付的情绪2。在每个项目中都要有质控，无论自制还是购买的，根据具体的情况进行质控的选择，有些项目没有相应的质控品，因此要对混合血清进行自制。质控的频率和使用的数量要根据检测项目进行决定，不可以随意进行相关的质控，否则也会对检测结果造成负面的影响。 标准品质量出现变异较为常见现象，这就会造成检验结果的误差。这种异常的情况大多是由于使用不当和运输储存造成的，对于一些需要冷冻保存的没有进行及时的分装，在多次冻融的情况下，出现逐步变质的情况3。在对冻干的标准品进行复融时要保持较缓的摇匀，最终将内容物进行完全的溶解，不要进行剧烈的振摇4。标准品较为适宜的保存温度为4，有些工作人员使用不按照规范进行，一般会将整盒取出，在室温环境中进行放置，随用随取，没有对时间进行良好的控制，反复几次后，就会导致定标出现部分变质的现象，因此操作人员在每次对标准品进行取用时，每次仅取一次量。因此要对标准品选择定标，从而减少其出现变异的情况5。实验室工作人员会在相同情况下得出不同的结果，对于操作不熟练的工作人员，会增加实验结果出现失误的情况。因此要对操作人员进行充分的培训，定时进行操作上的指导和学习，还要进行相关的测试，促进操作人员业务学习的积极性。通过多年的临床研究发现，酶标板在4使放入孵箱，与25时放入孵箱，会出现10min的差异，而将实验室的温度设置为1825，能够得到较为准确的检测结果。当室内的湿度小于40%时，会出现较为明显的静电现象，而且塑料材质的器皿会出现带电微粒，这样容易使样品出现污染的情况，因此室内的湿度一般设置为30%60%6。由此说明对实验室的环境进行良好的设置较为重要。在研究中表明，平衡时间小于30min和大于30min具有较大的差异，因此说明检测结果与试剂的平衡时间有较为密切的关系，从而需要将试剂在室温中进行30min的平衡，使试剂的温度和室温保持一致。其中标本的质量也有较大的影响，要避免标本采集使出现细菌污染、凝聚不全、溶血和贮存较长时间的情况，减少外源性因素的干扰。清洗过程为影响因素中较为重要的一种，当检验完成后要及时倒出洗液，并对洗液桶选择蒸馏水进行洗净，防止造成假阳性的出现。对检测使用的设备要定期进行维修、校准，保证检验结果的准确性。对水浴箱和加样器都要在计量校准后才可使用。只有对上述的各种情况进行严格的控制，才能减少导致检测结果失误的相关因素，提高检测结果的可靠性，进而提高临床医生对疾病诊断的准确性。由于检验结果有出现假阳性等的可能，若患者的具体体征与检验结果有较大的差异时，第一时间与检验人员进行沟通，为了保证对疾病准确的诊断，可进行相关复检。 综上所述，在临床免疫检测中要按照相关的规定进行规范的操作，尤其把握实验室中的湿度和温度，试剂反应的平衡时常，标准品以及标本的质量，操作人员的素质和清洗过程，只有对上述情况进行严格控制，才能减少检测中的失误，提高检验结果的准确性。 参考文献 1葛明,姚建林,张东浩.基于SERS标记免疫检测的再生性研究J.光谱学与光谱分析,xx,30(27):173-174. 2杨寿旺,李睿,周振达,等.ELISA质控存在的问题探讨J.中国国境卫生检疫杂志,xx,34(15):134-135. 3刘爽,王伟,刘小雷.一种高通量免疫检测抗生素残留方法的建立J.中国抗生素杂志,xx,37(23):131-132. 4董莉,张保平,王永祥,等.参加室间质评加强免疫