肝素抗凝血浆对钒酸盐氧化法测定总胆红素的影响.doc

肝素抗凝血浆对钒酸盐氧化法测定总胆红素的影响 张伟雯杨凤啸：广州医科大学附属第三医院广东广州510150 【摘要】目的 探讨肝素抗凝血浆对钒酸盐氧化法测定总胆红素（TotalBilirubin，TB）结果的影响。方法采用钒酸盐氧化法平行测定300例患者的血清和肝素抗凝血浆标本中TB含量，并对两种方法的检测结果进行分析和比较。结果肝素抗凝血浆致钒酸盐氧化法测定TB结果降低。TB含量在1?7300mol/L范围内，肝素抗凝血浆的TB检测结果普遍低于血清245mol/L；随着TB浓度的升高，检测结果的偏差越大；血清TB值y对于肝素抗凝血浆TB值?x?的校正公式为：?y?=1?1974?x?+2?2047；线性试验和方法比较试验均显示两者具有良好的相关性。结论肝素抗凝血浆致钒酸盐氧化法测定TB结果降低。 【关键词】肝素钒酸盐氧化法总胆红素 【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofheparinonthetotalbilirubinleveldetectedbyvanadateoxidationmethod. MethodsVanadateoxidationmethodwasappliedtodetecttotalbilirubininarangeof300heparinanticoagulantplasmaandserumsamples. ResultsHeparinmadelowresaltinthedetectionofvanadateoxidationmethod;thetotalbilirubininheparinanticoagulantplasmawaslowerthanserum. ConclusionInordertoensuretheaurateandrisibleresult;theserumsamplesshouldbeadoptedinsteadofheparinanticoagulantplasmasamples. 【Keywords】Heparin,VanadateOxidationMethod,TotalBilirubin 【Authorsaddress】TheThirdAffiliatedHospitalofGuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou,GuangdongProbince510150PRC? doi:10.3969/j.issn.1671-332X.xx.06.030 胆红素是老化的红细胞中血红蛋白经过单核-吞噬细胞系统处理后的代谢产物，血液中胆红素的改变能反映出机体中某些脏器（如肝脏、胆囊、肾脏等）的功能状况?1?。其准确有效的测定有助于判断黄疸的程序和类型。长期以来，人们一直在寻找测定胆红素行之有效又适合临床需求的方法，而钒酸盐氧化法测定胆红素的诞生，恰恰解决了这方面的需求，因此，钒酸盐氧化法也成为目前各临床实验室测定胆红素中应用较为普遍的方法之一。由于钒酸盐氧化法使用的反应起动剂（钒酸盐）本身呈浅黄绿色，在450nm处有一定的吸光度（A值），反应启动后的读点比实际值略高，从而使反应前后的A值减小，这种差异在A值变化较小的低值总胆红素（TotalBilirubin，TB）的检测中易于体现出来。在临床生化检测工作中，血清的分离需要2030min，若对一些急诊项目的检测尝试以肝素抗凝血浆取代血清，可以减少等待血清分离的时间，实现结果的快速报告?2?。但在测定过程中我们发现，用肝素抗凝血浆代替血清测定TB时（钒酸盐氧化法），其测定结果往往偏低。为进一步解释此现象，笔者收集300份来本院就诊的患者的血清和肝素抗凝血浆标本进行TB的测定，分析比较两者之间的差别，以评价肝素抗凝血浆是否满足于临床实验室的检测需求。? 1材料与方法? 1.1仪器? 日立Hitachi7170全自动生化分析仪。? 1.2检测试剂与器材? 利德曼生化股份有限公司生产的总胆红素测定试剂盒-TBIL（钒酸盐氧化法；Lot：305062D）。主要组成成分R1：柠檬酸缓冲液（100mM），反应促进剂（1mmol/L），表面活性剂（2mmol/L）；R2：磷酸缓冲液（10mM），偏钒酸钠（4mmol/L）。阳普医疗科技股份有限公司生产的普通真空管和肝素抗凝管。? 1.3检测原理? 在pH3?0附近，表面活性剂和钒酸作用于胆红素，使之氧化成胆绿素，而此时胆红素所持有的黄色减少，由此测定钒酸盐氧化前后450nm处吸光度差值求出样本中胆红素浓度?3?。 1.4方法? 1.4.1标本采集选择300例来我院就诊的患者，采用真空采血针按常规方法采集两管静脉血：一管为普通真空管，离心分离血清；另一管为肝素抗凝管，离心分离血浆。2h内完成检测。另以每100l同一患者的血清和肝素抗凝血浆标本分装，置于-20冰冻避光保存。? 1.4.2实验操作采用同一仪器，同一试剂，同一方法，同一操作人员，尽可能做到其它条件一致。分别对300份血清和肝素抗凝血浆标本平行测定其TB含量，并将结果记录下来，进行对比分析。? 1.4.3线性试验取无明显脂血溶血的高TB病人血清和肝素抗凝血浆标本各一例，用钒酸盐氧化法测得血清TB=335?1mol/L，血浆TB=286?4mol/L。对两例标本用生理盐水进行2、4、8、16、32、64倍稀释，共计取得7个不同浓度