分子生物学A-答案2009.doc

学院 专业 姓名 学号 年级 密封线第X页 共X页聊城大学生命科学学院0809学年第一学期期末考试2008级分子生物学试题（闭卷及A卷）题号一二三四五总分复核人得分一、翻译并解释名词（每题2分，共20分）：得分阅卷人1、Intron：内含子。（1分）是指基因中的片断，该片断可被转录，但转录产物经拼接后被除去，即在成熟的mRNA中不包含内含子。（1分） 2、Reverse transcription：反转录。（1分）是指以RNA为模板，在依赖于RNA的DNA聚合酶作用下合成cDNA的过程。（1分） 3、RNA polymerase：RNA聚合酶。（1分）以DNA为模板合成RNA的酶。（1分） 4、Translation：蛋白质翻译。（1分）。核糖体与mRNA结合，并将后者的遗传信息按照三联体密码原则指导多肽链的合成。（1分） 5、Promoter：启动子。（1分）位于基因的上游，可与转录因子结合并决定转录的起始位点的一段DNA。 （1分） 6、Genomics：基因组学。（1分）研究生物基因组和如何利用基因的一门学问。（1分） 7、RNA splicing：RNA 拼接。（1分）是指真核生物的前体RNA经去除内含子后，再将外显子按顺序拼接成成熟的mRNA的过程。（1分） 8、Transformation: 转化。（1分）细胞吸收外源DNA， 表达后改变受体细胞的性质。（1分） 9、 Southern blot：DNA印迹杂交。（1分）DNA片段经电泳分离后，经变性、转膜和与核酸探针杂交，用于检测目的DNA的方法。（1分） 10、 RNA Interference(RNAi)：RNA干涉。（1分）RNA干涉是通过双链RNA的介导特异性地降解相应序列的mRNA,从而导致转录后水平的基因沉默。（1分） 二、选择题（每题2分，共20分）：得分阅卷人1、证明DNA是遗传物质的实验是（A）A. Griffith的肺炎双球菌转化； B. 细菌中断杂交； C. Morgan的果蝇杂交；D. Mendel的豌豆杂交2、核糖体的成分包括： ( D) A. rDNA+蛋白质; B. 核糖体蛋白； C. RNA+核酶； D. rRNA+核糖体蛋白3、可用于标记DNA的放射性同位素是：（D） A. 35S； B. 132I； C. 60Co D. 32P4、今有a，b，c，d四种蛋白质，其分子体积由大到小的顺序是abcd，在凝胶过滤柱层析过程中，最先洗脱出来的蛋白质一般应该是(A ) A.a B.b C.c D.d5、以下那种分子属于顺式作用（cis-acting）元件？（C）A. RNA polymerase； B. DNA polymerase； C. promoter； D. reverse transcriptase 6、下列叙述不正确的是：（A） A. 对应于20种氨基酸的只有20种密码子； B. 每个核苷酸三联体编码一个氨基酸； C. 不同的密码子可能编码同一个氨基酸； D. 密码子的第三位具有可变性。7、DNA合成仪合成DNA片断时，用的原料是(A )A.4种dNTP；B.4种NTP；C.4种dNDP；D.4种脱氧核苷的衍生物8、用于分析DNA的电泳方法是（B） A.双向电泳; B.Agarose gel； C. SDS-PAGE； D. 脉冲场电泳9、在诱导型表达质粒中，接受诱导调控的DNA组分是：（B） A. Enhancer; B. Promoter; C. Structural genes; D. Leader sequence 10、DNA的物理图谱（physical map）是指DNA分子经以下哪种酶作用后片段的排列顺序？（B） A. ligase; B. restriction endonucleases； C. T4 DNA polymerase; D. exonucleases三、问答题（每题12分，共60分）：得分阅卷人1、 下图为一质粒（pBS）的图谱，请简要叙述将一外源基因克隆入该载体的过程（可用箭头图显示），并举出至少一种方法筛选阳性克隆的简要步骤。答：1）基因克隆过程：PCR扩增外源基因（两引物两端分别含有KpnI和SacI酶切位点） pBSKpnI和SacI酶切连接酶，连接反应 pBSX（X表示外源基因）转化细菌,再含氨苄青霉素的培养基上筛选 阳性克隆。（8分）2）阳性克隆的筛选（以下方法任选一种）：a.PCR方法：以外源基因或载体上KpnI和SacI二位点以外的DNA序 列设计引物，进行菌落或以质粒为模板的PCR。以得到预期PCR带为阳性克隆；（4分）b酶切法：以上转化菌提取质粒，经KpnI和SacI双酶切，电泳后得到预期大小的DNA带为阳性克隆。（或4分） 2、 请你尽可能多地列举RNA生物功能的种类。答：mRNA,指导蛋白质翻译（2分）； tRNA, 携带氨基酸合成多肽链（2分）；rRNA, 核糖体RNA，为核糖体的组成成分（2分）；microRNA,调控基因表达的一类小RNA（2分）；核酶，用于描述具有催化活性的RNA, 即化学本质是核糖核酸(RNA), 却具有酶的催化功能。（2分）；病毒RNA，许多病毒的基因组RNA。具有编码蛋白质的功能。（2分）3、 简要叙述高等真核生物DNA（包括基因）组成的特点。答：高等真核生物DNA（包括基因）组成的特点：1）DNA的大部分组成为重复序列；（2分）2）编码基因往往具有内含子（intron）和外显子（exon）；（2分）3）有些基因可编码多个蛋白；（2分）4）同一基因具有2个以上拷贝，许多基因含有多基因家族；（2分）5）基因表达及调控成分复杂；（2分）6）DNA与组蛋白和非组蛋白组成染色体结构。（2分）4、 简述cDNA文库的构建过程。答：提取细胞总RNA（1.5分）过oligo(dT)柱，分离mRNA（2分） 加反转录酶合成cDNA第一链加RnaseH部分降解mRNA（1.5分）加DNA合成酶合成cDNA第二链（2分）加末端转移酶（Terminal transferase）和dCTP在cDNA链3端加上oligo(dC) （1.5分）加含有oligo(dG)粘性末端的载体和连接酶（2分） 转化大肠杆菌。（1.5分）5、 列举至少1种可用来检测、鉴定转基因动(或植物)的基因表达的分子生物学检测方法的简要步骤。答： 1）Northern blot检测转基因转录： 提取动、植物细胞总RNA（2分）琼脂糖凝胶电泳（2分） 变性RNA并经虹吸或电场转移至硝酸纤维素或尼龙膜（2分）用短RNA片断封闭，加RNA或DNA探针（放射性或生物标记）杂交（2分）显色或放射自显影（2