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分子生物学1、 单选题1、当一个真核基因处于活跃(转录)时(A)A.其启动子一般不带核小体 B.整个基因一般不带核小体C.基因重的外显子一般不带核小体 D.基因中的内含子一般不带核小体2、(C)是能够我复制的小型环状DNAA.内含子 B.外显子 C.质粒 D.转座子3、下列关于转座子的描述不正确的是(A)A.所有的转座子均有IS序列 B.所有的IS元件中均包含有编码转座酶的基因序列C.IS元件末端为短的反向重复序列 D.转座可能会引起基因组DNA重排4、乳糖操纵子模型中,真正起诱导作用的是(C)A.胞外的乳糖 B.胞内的乳糖 C.别构乳糖 D.半乳糖5、以下(D)不是原核生物基因表达的转录后调控机制。 A.稀有密码子和偏爱密码子的使用 B.重叠基因对翻译偶联现象的调控C.魔斑核苷酸水平对翻译的调控 D.增强子的影响6、关于蛋白质翻译运转同步机制描述错误的是(D)A.蛋白质定位的信息存在于该蛋白自身结构中 B.绝大部分被运入内质网内腔的蛋白质都带有一个信号太C.仅有信号肽不足以保证蛋白质运转的发生D.蛋白质达到靶位置的时候,信号肽必须切除7、地球生命物质最早出现的可能是(A)A. RNA分子 B. DNA分子 C.蛋白质分子 D.质粒8、关于酵母双杂交技术,(D)描述是正确的。A.用于研究DNA与DNA的相互作用 B.用于研究DNA与蛋白质的相互作用 C.用于研究DNA与RNA的相互作用 D.用于研究蛋白质与蛋白质的相互作用9、原核细胞信使RNA含有几个其功能所必需的特征片段,它们是(D) A.启动子,SD序列,ORF,茎环结构 B.启动子,SD序列,ORF,polyA,茎环结构C.转录起始位点,SD序列,ORF,polyA,茎环结构 D. .转录起始位点,SD序列,ORF,茎环结构10、真核生物染色体组蛋白的所不具有的特征有(C)A. 进化上的极端保守性 B.组蛋白H5富含赖氨酸 C.有组织特异性 D.肽链上氨基酸分布的不对称性11、如果有一段DNA产生了+1的移码突变,则能矫正的是(B)A.突变型氨酰tRNA合成酶 B.有突变型反密码子的tRNA C.有切割一个核苷酸的酶 D.有四个碱基长的反密码子的tRNA12、内固醇激素的受体蛋白分子不具有的区域是(C)A. 激素结合区 B. 转录激活区 C.操纵区 D.DNA结合区13、在什么情况下乳糖操纵子的转录活性最高(A)A. 高乳糖、低葡萄糖 B. 低乳糖、低葡萄糖 C.低乳糖、高葡萄糖 D.高乳糖、高葡萄糖14、第三代DNA遗传标记,可能也是最好的遗传标记方法是(D)分析法A.限制性片段长度多态性(RFLP) B. 小卫星DNA C.微卫星DNA D.但核苷酸多态性(SNP)15、以下(C)对于热激活蛋白诱导的基因表达的说法是错误的。A.真核细胞的热休克蛋白在细胞的正常生长和发育中起重要作用B. Hsp70的主要功能是参与蛋白质的代谢 C.热休克蛋白参与靶蛋白活性和功能的调节,是靶细胞的组成部分 D.一般称热休克蛋白为分子伴侣或伴侣蛋白2、 多选题1、人工染色体含有必需的成分为( ABD )A.着丝粒 B. 端粒 C.质粒 D.复制起始点2、在遗传信息表达的过程中,模版DNA序列mRNA序列蛋白质氨基酸序列三者之间的关系是(BC)A. 3553NC B. 5335 NC C. 3553CN D. 5335 CN 3、 典型的原核生物启动子组成为( ABC )A. -35区 B.-10区 C.转录加起点 D.-35和-10区之间的16-19bp区间4.关于锌指结构描述正确的是( ACD )A.是一类典型的反式作用因子DNA识别/结合域B.氨基端20-30个富含碱性氨基酸结构域与DNA结合C.其Cys和His残基参与了与Zn2+的结合D.锌指环上突出的Lys和Arg残基参与DNA的结合5.增强子( AB )A.存在于启动子上游或下游B.其增强效应有严密的组织和细胞特异性C.有基因专一性D.不受外部信号的调控3、 判断题1. 高等真核生物基因中的内含子通常比外显子大很多T2. 聚合酶链式反应(PCR)中,三个核心步骤的先后顺序是“退火-变性-延伸”F3. 复杂转录单位的原始转录产物能通过多种不同方式加工成两个或两个以上的mRNA T4. 核不均一RNA是mRNA和rRNA的前提而不是tRNA的前体 F5. 反式作用因子有两个功能域,一个是转录激活结构域,一个是DNA结合结构域 T6. 人类基因组计划的成果中的核苷酸序列图,其实是分子水平上最详尽的物理图 T7. 蛋白质胞内降解的泛肽途径和消化道蛋白酶的作用相似,均不需要耗能 F8. C值通常是指一种生物双倍体基因组DNA的总量 F9. RNA剪切体是核内RNA与相应核蛋白组成的,是RNA剪接的场所。T10. 乳糖操纵子不仅需要正调控,也需要负调控;阻遏物起负调控作用,CAP-cAMP起正调控作用 T11. 基因组文库是将某种生物细胞的整个基因组DNA切割成大小合适的片断,并与适当的载体连接,引入相应的宿主细胞中保存和扩增的技术 T12. 组蛋白乙酰化通过降低它对DNA的亲和性而提高基因转录的活性 T13. 原核生物和真核生物的DNA不都是以半保留复制方式遗传的 F14. 剪接体是由snRNP和大量的其他的蛋白质分子组成庞大的体系,负责对蛋白质进行修饰T15. 核定位序列(NLS)在介导蛋白质进入细胞核后,通常都要被立即切除 F四、请从A-J中选出最合适的选项与1-10的术语匹配1. 组蛋白 I A. 安慰性诱导物2. HnRNA G B. 2015年诺贝尔化学奖3. 操纵子 C C. 多顺反子4. Xist J D. 内含子剪接5. 拟南芥 H E. DNA结合蛋白6. 套索样结构 D F. HSP707. 分子伴侣 F G. mRNA8. 凝胶阻滞实验 E H. 模式植物9. DNA修复机制 B I. 核小体10. IPTG A J. X染色体五、问答题1.试比较真核生物与原核生物基因组DNA有何不同?答:真核生物基因组特征:具有致密的染色体结构,且染色体数量多,结构复杂;基因组大,结构复杂,DNA有多个复制起点,每个基因组中含有数万个基因;DNA顺序可分为非重复序列、中度重复和高度重复序列;真核基因具有不连续性;来源相同,结构相似,功能相关的基因常能组成单一基因簇或基因家族;还具有细胞器基因。原核基因组特征:染色体是由一个核酸分子(DNA或RNA)组成的,DNA(RNA)呈环状或线性;功能相关的基因大多以操纵子形式出现;蛋白质基因通常以单拷贝的形式存在,且一般是连续不间断的;编码RNA的基因通常是多拷贝的。2.请画出大肠杆菌乳糖操纵子的结构示意图。当大肠杆菌lacZ-或lacY-突变体生长在含乳糖的培养基上时,lac操纵子剩余的基因没有被诱导,解释是何原因?大肠杆菌乳糖操纵子是由三个结构基因A、Z和Y,以及启动子、操纵子及阻遏子等构成。3个结构基因个决定一种酶:Z基因编码-半乳糖苷酶,Y基因编码-半乳糖苷透过酶,A基因编码-半乳糖苷乙酰基转移酶。Z编码的-半乳糖苷酶是一种-半乳糖苷键的专一性酶,除能将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖外,还能水解其他-半乳糖苷(如苯基半乳糖苷)。Y编码-半乳糖苷透过酶的作用是使外界的-半乳糖苷(如乳糖)能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。A编码-半乳糖苷乙酰基转移酶的作用是把乙酰辅酶A上的乙酰基转到-半乳糖苷上,形成乙酰半乳糖。如果用乳糖作为大肠杆菌生长的唯一碳源和能源,Z基因和Y基因编码的酶是生长所必需的,Y基因编码的并非必须。因此大肠杆菌lacZ-或lacY-突变体生长在含乳糖的培养基上时,lac操纵子剩余的基因不会被诱导。3.请画出大肠杆菌色氨酸操纵子的结构示意图,简述其表达调控中的转录弱化作用。P256:在大肠杆菌trp operon,前导区的碱基序列包括4个分别以1、2、3和4表示的片段,能以两种不同的方式进行碱基配对,1 - 2和3 -4配对,或2 - 3配对,3 - 4配对区正好位于终止密码子的识别区.前导序列有相邻的两个色氨酸密码子,当培养基中Trp 浓度很低时,负载有Trp 的tRNATrp也就少,这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢,当4区被转录完成时,核糖体滞留1区,这时的前导区结构是2 - 3配对,不形成3 - 4配对的终止结构,所以转录可继续进行.反之,核糖体可顺利通过两个相邻的 色氨酸密码子,在4区被转录之前,核糖体就到达2区,这样使2 - 3不能配对,3 - 4 区可以配对形成终止子结构,转录停止.4.简述重组DNA技术的操作过程,并辅以图示。目的基因的制备(质粒DNA的提取与纯化、电泳检测目的基因片段PCR、酶切反应) 载体的制备 连接、转化、筛选、鉴定(包括酶切产物的连接、转化和筛选) 诱导表达、产物分析5.什么叫PCR?试比较PCR和DNA复制的不同点。聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。6.请画出大肠杆菌乳糖操纵子的结构示意图,并阐述其负控机制和正控机制。在乳糖操纵子调控模型中,负控诱导调节模式是主要的。具体来说,在没有诱导物,如乳糖、IPTG、ONPG等存在时,LacI基因转录产物为阻遏物单体,再结合成四聚体,它们能与O区DNA相结合,从而阻遏基因转录,当有诱导物存在时,可使阻遏物变成不能与O区相结合的非活性形式,从而RNA聚合酶可与Lac启动区相结合,起始基因转录。此外,正调控模式也有体现,大肠杆菌中的代谢蛋白cAMP-CRP是激活Lac转录的重要成分,当有效应物如葡萄糖存在时,cAMP浓度很低,从而转录不能进行,即此调控为正控阻遏调节。六、简答题1.什么是顺式作用原件,请列举2个。顺式作用元件是指对基因表达有调节活性的DNA序列,它作为一种原位顺序,其活性只影响与其自身处在同一个DNA分子上的基因;同时,这种DNA序列通常不编码蛋白质,多位于基因旁侧或内含子中。简单的说,顺式作用元件是指影响自身基因表达活性的DNA序列(如转录启动子和增强子)。2.请列出五种RNA,并简要说明其主要功能。1转运RNA tRNA 转运氨基酸 2核蛋白体RNA rRNA 核蛋白体组成成 3信使RNA mRNA 蛋白质合成模板 4不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前体 5小核RNA snRNA 参与hnRNA的剪接 6小胞浆RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分 7反义RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用 8核 酶 Ribozyme RNA 有酶活性的RNA3.PCR的中文名为什么?简述PCR的原理。聚合酶链式反应DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。4.请简述一个编码基因有不同表达产物的可能机制。一个基因转录起始位点的选择不同可导致产生不同类型的酶;同一个基因,相同的初始mRNA,但由于5端,内含子及3末端等选择的不同,使成熟的mRNA也不同,结果编码了功能不同的蛋白。5.简述tRNA三级结构特点与其功能之间的关系。tRNA三级结构是在二级结构的基础上经过进一步折叠扭曲形成倒L形。 此结构反映了tRNA的生物学功能,因为tRNA上所运载的氨基酸必须靠近位于核糖体大亚基上的多肽合成位点,而tRNA的反密码子必须与小亚基上的mRNA相配对,所以两个不同的功能基团最大限度分离。这个结构很可能满足了蛋白质合成过程中对tRNA的各种要求而成为tRNA的通式,tRNA的性质由反密码子决定。该结构形成双螺旋,碱基配对增加,有利于碱基堆积力的增强,空间位阻效应减小,利于与氨基酸结合,利于实现转运功能。6.什么是反式作用因子,请列举2个。反式作用因子是指其基因产物将从合成的场所扩散到其发挥作用的其他场所,游离的基因产物扩散至目标场所的过程为反式作用。调控转录的各种蛋白因子总称反式作用因子。其编码基因与其识别或结合的靶核苷酸序列不在同一个DNA分子上。如RNA聚合酶。7.什么是转座子?简述其遗传学效应。:转座是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。转座时发生的插入作用有一个普遍的特征,那就是受体分子中有一段很短的约3-12bp的被称为靶序列的DNA会被复制 ,使插入的转座子位于两个重复靶序列之间。靶序列的复制可能起源于特定内切酶所造成的粘性末端。 转座的生物学意义:、转座引起插入突变;、转座产生新的基因;、转座产生染色体畸变;、转座可引起生物进化,产生新的遗传性状引起插入突变:失活、极性突变或者为基因组的某些序列提供转录起始的顺式元件 引起染色体畸变:染色体的断裂、缺失和倒位 生物进化的动力:引入新的基因、造成外显子的移动和改组11. 简述亮氨酸拉链的结构特征。亮氨酸拉链结构域通常被定义为一行4-7个周期重复的亮氨酸残基,其距离大约跨越8个螺旋转弯,通式为L-x(6)-L-x(6)-L-x(6)-L,有时典型的亮氨酸残基会被异亮氨酸或缬氨酸所代替。结构分析发现亮氨酸拉链由平行的卷曲螺旋型螺旋构成,它们通过亮氨酸侧链的疏水作用互相缠绕,亮氨酸统一排列在螺旋的一侧,而所有带电荷的氨基酸残基排在另一侧。当2个蛋白质分子平行排列时,亮氨酸之间相互作用形成二聚体,形成“拉链”。在“拉链”式的蛋白质分子中,亮氨酸以外带电荷的氨基酸形式同DNA结合。亮氨酸拉链的二级结构分析可以发现,该结构域呈“螺旋-环-螺旋”的结构,利于形成同源二聚体。12. 原核生物转录后调控的主要机制有哪些?a、mRNA自身结构元件对翻译起始的调节。b、mRNA稳定性对转录水平的影响。c、调节蛋白的调控作用。d、反义RNA的调节作用。e、稀有密码子对翻译的影响。f、重叠基因对 翻译的影响。g、翻译的阻遏。h、魔斑核苷酸水平对翻译的影响。13. 简述大肠杆菌的启动子结构成分。原核生物启动子:上游控制元件(UCE)+核心启动子=扩展的启动子 UCE:即-40-70区,能与CAP-
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