丹参对大鼠抗疲劳抗缺氧作用研究.docx

丹参对小鼠抗疲劳耐缺氧作用的研究 摘要 目的：探讨丹参对小鼠抗疲劳耐缺氧的影响。方法：给实验组小鼠分别注射低剂量，高剂量的丹参溶液，对照组注射等量生理盐水处理7d 后，各组小鼠分别进行抗疲劳游泳实验和常压密闭缺氧实验。测定小鼠耐缺氧时间，游泳时间及缺氧、运动后肝脏血液的丙二醛、尿素氮含量、超氧化物歧化酶活性的改变情况。结果：游泳实验中，与对照组比较,实验组小鼠的游泳能力增强了，并且随着剂量的增加，小鼠的游泳能力相应增强。说明丹参对小鼠有一定的抗疲劳作用。耐缺氧实验中，与对照组相比，实验组并没有表现出丹参有耐缺氧作用，耐缺氧时间反而比较低。结论：丹参具有一定的抗疲劳作用，抗缺氧作用效果不好。关键词 丹参；小鼠；抗疲劳；耐缺氧To study the effect of Salvia miltiorrhiza on mice anti fatigue and hypoxia学院：临床医学院 专业：临床医学 College: Guilin Medical College clinical medicine specialty班级：2011级医本二班 Class: the class two grade 2011 medicine学号、姓名： 1111204 杨相应 1111208 徐梁（组长）Student ID, name: 1111204 Yang Xiangying 1111208 Xu Liang (leader)1111265龚莉 1111266 李秋琴 1111504 李春艳1111265 Gong Li 1111266 Li Qiuqin 1111504 Li ChunyanAbstract Objective To investigate the effect of Salvia miltiorrhiza on anti fatigue and hypoxia tolerance in mice. Method the mice in the experimental group were injected with low dose, high dose of Salvia miltiorrhiza solution, the control group was injected with physiological saline 7d after treatment, mice are anti fatigue swimming test and normobaric hypoxia experiment. Determination of the hypoxia tolerance time of mice swimming time and hypoxia, changes of MDA, after exercise, liver blood urea nitrogen content, the activity of superoxide dismutase. Results the swimming experiment, compared with the control group, the experimental mice swimming ability is enhanced, and as the dose increased, the mice swimming ability enhancement. Description Danshen have anti fatigue effects on mice. Hypoxia tolerance experiment, compared with the control group, the experimental group did not show the salvia miltiorrhiza with hypoxia, hypoxia tolerance time but relatively low. Conclusion Salvia miltiorrhiza has some anti fatigue, anti anoxia effect is not good. 关键词 丹参；小鼠；抗疲劳；耐缺氧keyword Salvia miltiorrhiza; mice; anti fatigue; hypoxia tolerance1、材料、试剂、仪器和实验动物1.1 药品 丹参注射液1.2 试剂 丙二醛测定试剂盒、尿素氮测定试剂盒和超氧化物歧化酶测定试剂盒1.3 器械、仪器 腹腔注射器、小鼠玻璃游泳缸、广口瓶、电子分析天平、722型分光光度测定仪、匀浆机、离心机、离心管、秒表等1.4 实验动物 清洁级单一雄性昆明种小鼠84只及基础饲料2、实验方法2.1 分组与给药实验动物分组：选用单一雄性昆明种小鼠84只, 游泳实验和常压耐缺氧实验中各设空白对照组、药物低，高组，共6组，每组14只小鼠（见表1）。药物低、高剂量组每天分别按80ml/kg、160ml/kg的浓度给予0.4ml药液，腹腔注射（即高剂量组注射0.4ml注射液，低剂量组的就在0.2ml注射液的基础上加0.2ml生理盐水混匀后注射，以求各组注射相同体积药水）。空白对照组给予同体积的生理盐水腹腔注射，每天腹腔注射1次，连续7天 ，基础饲料自由摄食;一天换水1次。表1. 实验动物分组（共6组，每组14只） 空白对照组 低剂量组 高剂量组 游泳实验常压耐缺氧实验 2.2指标测定方法2.2.1 负重游泳实验：小鼠连续给药7d后，每组小鼠于末次腹腔注射前禁食12h，在末次给药1h后将小鼠放入游泳箱内做力竭游泳实验。小鼠尾部负重为体重5%的小铁夹,放入自制玻璃游泳缸游泳, 水深约为35cm，水温25摄氏度,计取游泳开始到小鼠游泳疲劳而沉入水中8s不能浮起为止的时间为游泳时间。并立即取出肝脏,制作肝脏匀浆，离心机分离取上清备用。2.2.2 常压耐缺氧实验：小鼠连续给药7d后, 每组小鼠于末次腹腔注射前禁食12h，在末次给药1h后将小鼠放进250ml的密封性好的磨口玻璃瓶内,将用纱布包好的15g钠石灰装入瓶内,将小鼠放入瓶内后立即用凡士林密封盖紧,当小鼠开始出现全身性痉挛症状时,立即开启瓶盖,将动物取出。记录从密封至小鼠发生全身性痉挛的时间。并立即取出肝脏,制作肝脏匀浆，离心机分离取上清备用。2.2.3生化指标检测：采用肝脏匀浆上清,按照试剂盒的方法分别测定以下血生化指标：丙二醛(MDA)含量, 尿素氮(BUN)含量, 超氧化物歧化酶(SOD)活性。2.2.4 统计学分析：所有实验数据均在SPSS软件包上进行处理,实验测定结果以平均数标准差(MeanSD)表示,显著性检验为t检验, 与正常对照组比较显著性水平为P0.05以*表示。3、结果表2 丹参对小鼠游泳能力和常压耐缺氧能力的影响组别n剂量游泳时间(s)耐缺氧时间（s）对照组1402491191298324低剂量组1480ml/kg2621041101288高剂量组14160ml/kg3341651007241*注：*.与对照组比较，p 0.05结果：表2的结果应显示,与对照组比较,用药组小鼠的游泳能力增强了。并且随着剂量的增加，小鼠的游泳能力相应增强。常压耐缺氧实验用药组无明显效果。表3丹参对运动后小鼠血液中疲劳代谢物指标的影响组别n剂量MDA(nmol/ml)BUN(mmo/L)SOD(U/mgprot)对照组1400.690.315.630.37318.92111.31低剂量组1480ml/kg1.310.386.070.86355.7853.25高剂量组14160ml/kg1.490.266.020.62333.5682.21结果：表3结果应显示,与对照组比较,实验组小鼠运动后的尿素氮含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性升高。 表4常压耐缺氧实验小鼠血液中谢物指标的影响组别n剂量MDA(nmol/ml)BUN(mmo/L)SOD(U/mgprot)对照组1401.240.555.860.28506.1132.15低剂量组1480ml/kg1.120.196.260.72409.7987.34高剂量组14160ml/kg1.450.626.350.86342.8198.10结果：表4结果应显示,与对照组比较,实验组小鼠运动后的尿素氮含量、丙二醛增加。超氧化物歧化酶活性显著降低,并且随着剂量的增加，降低得越显著。4、讨论本次实验中，分别给对照组，实验组小鼠连续7天注射生理盐水，低剂量丹参溶液，高剂量丹参溶液。游泳实验中，与对照组比较,实验组小鼠的游泳能力增强了，并且随着剂量的增加，小鼠的游泳能力相应增强。说明丹参对小鼠有一定的抗疲劳作用。耐缺氧实验中，与对照组相比，实验组并没有表现出丹参有耐缺氧作用，耐缺氧时间反而比较低。当机体过度运动时, 机体相对缺氧, 主要通过糖酵解系统供能来满足骨骼肌收缩的能量需要, 产生大量乳酸进人血液, 使血液PH值下降, 反过来抑制骨骼肌细胞内的糖酵解过程, 使肌肉疲劳而引起运动能力下降。因此控制血乳酸的快速增长, 提高细胞耐氧性，对缓解疲劳,提高运动能力是非常重要的。大量研究表明，体内糖原的水平与耐久力密切相关，糖原储备明显影响运动能力 ，糖原贮备的提高有利于机体耐力速度的提高，并减少蛋白质和含氮化合物的分解，肌糖原储备越多，运动时间越长。随着体内糖储备的减少，机体动用体内脂肪，蛋白质的量增加，以补充机体运动所需能量，运动以后，机体相对缺氧，糖原及脂肪，蛋白质分解不完全，产生相应的醛类，酮类，尿素代谢产物。机体相对缺氧时，会产生较多的氧自由基，引发脂质过氧化反应，生成的脂过氧化物代谢产物丙二醛含量增量。能量不足时，机体动用到蛋白质的分解增加，生成的尿素含量增加。血清尿素氮的增量，提示机体蛋白质供能的程度。超氧化物歧化酶能增加氧自由基的去路，从而保护细胞免受损伤。使用药物，超氧化物歧化酶活性升高，提示药物能提高SOD活性，抗氧化作用明显；超氧化物歧化酶活性下降，提示药物会降低SOD活性，引起细胞损伤。因此，通过血生化实验测定缺氧、运动后肝脏血液的丙二醛、尿素氮含量、超氧化物歧化酶活性的改变情况，反应丹参到底有没有抗疲劳，耐缺氧的作用。抗疲劳游泳实验血生化指标证明丹参并没有抗疲劳作用，但在负重游泳实验则表明丹参有一定的抗疲劳作用；血生化指标证明丹参有一定的耐缺氧的作用，但在常压密闭缺氧实验中实验组的耐缺氧作用却呈负相关作用。抗疲劳游泳实验和常压密闭缺氧实验与其对应的血生化实验不成正相关，原因有很多，这可能与腹腔注射，连续用药时间，药物剂量及实验操作等出现很多不是很令人满意的地方有关。参考文献 【1】王亚坤，孙文敬，刘敬泽. D-核糖对大鼠负载游泳后胰岛素、去甲肾上腺素、肾上腺素的影响及其抗疲劳、抗缺氧能力研究. 食品