DNL细胞制备及抗瘤机制.ppt_第1页
DNL细胞制备及抗瘤机制.ppt_第2页
DNL细胞制备及抗瘤机制.ppt_第3页
DNL细胞制备及抗瘤机制.ppt_第4页
DNL细胞制备及抗瘤机制.ppt_第5页
已阅读5页，还剩14页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

DNL细胞制备及抗瘤机制,徐骎口腔临床免疫教研室口腔肿瘤生物实验室,第一部分DNL细胞的制备,一、概况,口腔颌面部肿瘤综合序列治疗免疫治疗是重要手段之一机体细胞免疫主要执行抗肿瘤免疫效应抗肿瘤的免疫细胞NK，LAK，TIL，DNL等,NKnaturekillercells自然杀伤细胞LAKlymphokineactivatedkillercells淋巴因子激活的杀伤细胞TILtumorinfiltratinglymphocyte肿瘤浸润性淋巴细胞DNLdraininglymphnodelymphocyte肿瘤引流区淋巴结细胞,TIL与DNL相同点1）邻近肿瘤2）强大的抗肿瘤效应，比LAK细胞高50-100倍3）良好的基因治疗载体不同点1）来源不同2）TIL细胞数量少，易污染DNL细胞数量多,二、实验目的,1、掌握从淋巴结中分离、培养、扩增DNL的基本方法2、明确DNL与TIL的异同点,三、实验材料,1、材料：口腔鳞癌颈清淋巴结2、器材：显微镜、离心机、超净台、培养皿、离心管、吸管、培养瓶、尼龙网（200目）3、试剂：培养液（RPMI1640）、Hanks液（含1000u/ml青、链霉素，1000u/ml两性霉素）,四、实验内容,1、DNL的分离淋巴结,酶消化法0.5%胶原酶、0.02%DNA酶、0.05%透明质酸酶机械法,密度梯度离心,DNL,2、DNL的培养和扩增1）培养液RPMI1640+rIL-22000u/ml2）培养条件DNL6106/ml，37，5%CO23）3-5天换液，每次换液加入rIL-22000u/ml，细胞浓度保持在6106/ml,四、实验内容,细胞计数,血细胞计数器：手工计数细胞Coulter计数仪：自动计数,10,9,10,12,（10+9+10+12）/4*104=10.25*104/ml(稀释倍数),第二部分DNL抗瘤机制,以往的研究表明：DNL分泌穿孔素肿瘤细胞通透性增加最新研究证实：CTL分泌穿孔素和颗粒酶A（granzymeA）granzymeA激活下游信号传导通路肿瘤细胞凋亡,DNL体外杀伤口腔鳞癌细胞的作用观察MTT法原理：1、MTT二甲基噻唑二苯基四唑溴盐2、活细胞线粒体脱氢酶MTT结晶形成少，反映活细胞少，杀伤肿瘤细胞作用强,不可溶性紫色甲臜,DMSO溶解，检测OD值
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论