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文档简介
丙型肝炎病毒基因分型检测,艾迪康医学检验中心,1,丙型肝炎病毒(HepatitisCVirus;HCV),黄病毒科丙型肝炎病毒属,球形有包膜的RNA病毒,直径50nm病毒基因为单股正链RNA,链全长约10Kb,2,传播途径:经胃肠道外传播(似HBV)是引起输血后慢性肝炎和肝硬化的主要原因潜伏期:15-150天无症状HCV携带者和慢性丙肝者多见易感人群感染HCV后,慢性化的比例高达50%以上免疫力不牢固,3,丙型肝炎是由于感染丙型肝炎病毒而导致肝脏发生炎症坏死和纤维化的一种传染病,部分丙型肝炎患者可以发展为肝硬化甚至肝癌,故此病对患者健康威胁极大,4,6种基因分型,意义不同,HCV存在着许多基因型,在世界不同地区主要分为6个基因型,用数字1-6表示;50个亚型,用英文字母来表示。我国常见的丙肝基因型为1b和2a,其中以1b为主;6型主要见于香港和澳门地区。,5,丙肝基因分型临床意义,HCV基因型与其致病性、肝细胞癌(HCC)发生及干扰素(IFN)疗效有一定关系。由于每一基因型均可分布在各期肝病中,因此HCV基因型不能作为评价肝病严重程度的一个指标。1型丙肝使用干扰素治疗较难获得应答,治疗时间要长,治疗剂量要大,合并用药剂量也要加大。,6,肝硬化及肝癌患者HCV-1b型明显高于慢性肝炎。HCV-1b型复发丙型肝炎其肝病较其他基因型为重。HCV基因型1a、2a合并HBV感染的发生率较高,大部分(74%)急性肝炎患者为基因型1a;基因型4感染易引起失代偿性肝脏并发症;基因型3a感染与肝脏脂肪变的关系较为密切。同样的治疗进程,基因型2、3感染患者对干扰素的持续病毒学应答率是基因型1感染患者的2-3倍,与基因型1感染患者相比,低剂量的利巴韦林联合聚乙二醇干扰素-治疗对感染基因型2、3的慢性丙型肝炎患者疗效较好,丙肝基因分型临床意义,7,艾迪康检测丙肝基因分型项目(一),PCR法检测丙肝基因分型方法学:实时荧光PCR法检测3个基因型(1、2和3型)每周三上午检测,周四报告样本要求:血浆或血清1ml,8,艾迪康检测丙肝基因分型项目(二),测序法检测丙肝基因分型方法学:PCR产物直接测序法检测1-6型HCV及其亚型(1a,1b,1c,2a,2b,2c,2i,2k,3a,3b,4a,5a,6a,6b,6k共15种)报告时间:4个工作日(外省要加上物流时间)样本要求:血浆或血清1ml,9,HCV基因分型(直接测序法),上图显示该患者为HCV-IIa型感染,采用利巴韦林联合聚乙二醇干扰素-将得到较理想治疗效果,10,特点:1、采用高效逆转录酶及高保真PCR,灵敏度和保真度均达到国内先进水平,可对低至103拷贝的HCV病毒进行基因分型2、可分析-及其亚型共15种,有针对性指导临床用
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