超高效液相色谱-串联质谱法同时测定食品中麦芽酚、乙基麦芽酚、香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素.pdf

第8 卷第7 期食品安全质量检测学报 V 0 1 8N o 7 2 0 1 7 年7 月 J o u r n a lo f F o o dS a lt ya n dQ u a lit y J u l2 0 1 7 超高效液相色谱一串联质谱法同时测定食品中麦芽 酚、乙基麦芽酚、香兰素、甲基香兰素和 乙基香兰素 宁霄，何欢，金绍明，曹进4 ，丁宏4 ( 中国食品药品检定研究院，北京1 0 0 0 5 0 ) 摘要：目的采用超高效液相色谱一串联质谱法建立同时测定食品中麦芽酚、乙基麦芽酚、香兰素、甲基香 兰素和乙基香兰素5 种香精的分析方法。方法样品经甲醇提取，W o n d a S e pM A X 固相萃取柱净化。目标化 合物以0 1 甲酸甲醇溶液为流动相，在梯度洗脱条件下经I n e r t S u s t a inB ioC l8 ( 2 1m m x l5 0m m ，3u m ) 色谱柱 分离后采用电喷雾离子源( e le ct r o s p r a yio n iz a t io n ，E S I ) 正离子多反应监测模式( m u lt ip ler e a ct io nm o n it o r in g ， M R M ) 进行检测。结果5 种香精线性相关系数均大于O 9 9 ，方法定量限在0 9 1 6 2n g g 之间，在3 个加标水 平下的平均回收率为8 0 1 1 0 6 0 ，相对标准偏差不大于8 9 。结论该方法准确、灵敏，可用于液体乳、 婴幼儿配方食品、食用油、乳制品、饮料、烘焙食品等实际样品中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素、麦芽 酚和乙基麦芽酚的同时测定。 关键词：超高效液相色谱一串联质谱法；麦芽酚；乙基麦芽酚；香兰素；甲基香兰素；乙基香兰素 S im u lt a n e o u sd e t e r m in a t io no fv a n illin ，m e t h y lv a n illin ，e t h y lv a n illin ，m a lt o l a n de t h y lm a lt o linf o o d sb yu lt r ap e r f o r m a n celiq u id ch r o m a t o g r a p h y t a n d e mm a s ss p e ct r o m e t r y N I N GX ia o ，H EH u a n ，J I NS h a o M in g ，C A OJ in 4 ，D 1 N GH o n g + ( N a t io n a lI n s t it u t e s f o rF o o da n dD r u gC o n t r o l，B e ij in g10 0 0 5 0 ，C h in a ) A B S T R A C I ：O b j e ct iv e T oe s t a b lis ham e t h o df o rs im u lt a n e o u sd e t e r m in a t io no fv a n illin ，m e t h y l v a n illin ，e t h y l v a n illin ，m a lt o l a n de t h y lm a lt o linf o o d sb yu lt r ap e r f o r m a n celiq u idch r o m a t o g r a p h y - t a n d e mm a s ss p e ct r o m e t r y ( U P L C M S M S ) M e t h o d s T h es a m p le sw e r ee x t r a ct e dw it hm e t h a n o l，a n dp u r if ie dw it hW o n d a S e pM A Xs o lid p h a s ee x t r a ct io nco lu m n T h es e p a r a t io nw a sp e r f o r m e do na nI n e r t S u s t a inB ioC 18 ( 2 1m m x l5 0m m ，3p m ) co lu m n u s in gag r a d ie n te lu t io np r o g r a mw it hm o b ilep h a s eo f0 1 f o r m ic a cida n dm e t h a n o ls o lu t io n T h e5k in d so f co m p o n e n t sw e r ed e t e r m in e dint h em o d e so fe le ct r o s p r a yp o s it iv eio n iz a t io n ( E S I + ) a n dm u lt ip ler e a ct io nm o n it o r in g ( M R M ) R e s u lt s T h eco r r e la t io nco e f f icie n t so f5k in d so fco m p o n e n t sw e r em o r et h a n0 9 9 T h e1 im it so f + 通讯作者：曹进，研究员，主要研究方向为食品安全检测。E m a il：ca o j in n if d co r g cn 丁宏，主任药师，主要研究方向为食品、保健食品以及化妆品安全检测。E m a il：d in g h o n g n if d co r g cn + C o r r e s p o n d in ga u t h o r ：C A OJ in ，P h D ，R e s e a r ch e r ，N a t io n a l I n s t it u t e sf o rF o o da n dD r u gC o n t r o l，N o2 ，T ia n t a n x ili，D o n g ch e n gD is t r ict ， B e ij in g1 0 0 0 5 0 ，C h in a ，E - m a il：ca o j in n if d co r g cn D I N GH o n g ，C h ie fP h a r m a cis t ，N a t io n a lI n s t it u t e sf o rF o o da n dD r u gC o n t r o l，N o2 ，T ia n t a n x ili，D o n g ch e n g D is t r ict ，B e ij in g1 0 0 0 5 0 ，C h in a E m a il：d in g h o n g n if d co r g cn 2 5 5 6食品安全质量检测学报 第8 卷 q u a n t it a t io n ( L O Q s ) w e r e0 9 - 1 6 2n g g T h ea v e r a g er e co v e r ie sa t3s p ik e dle v e lsr a n g e df r o m8 0 1 1 0 6 0 w it h t h er e la t iv es t a n d a r dd e v ia t io n s ( R S D s ) le s st h a n8 9 C o n clu s io nT h ee s t a b lis h e dm e t h o diSa ccu r a t ea n d s e n s it iv e ，a n ds u it a b lef o rt h es im u lt a n e o u sd e t e r m in a t io no fv a n illin ，m e t h y lv a n illin ，e t h y lv a n illin ，m a lt o l a n de t h y l m a lt o linm ilk ，in f a n tf o r m u laf o o d ，e d ib leo il，d a ir yp r o d u ct s ，b e v e r a g e sa n db a k e dg o o d s K E YW O R D S ：u lt r ap e r f o r m a n celiq u idch r o m a t o g r a p h y - t a n d e mm a s ss p e ct r o m e t r y ；v a n illin ；m e t h y lv a n illin ；e t h y l v a n illin ；m a lt o l；e t h y l m a lt o l 1 引言 香兰素、乙基香兰素、甲基香兰素、麦芽酚和乙基麦 芽酚是食品中重要的增香剂。因其具备弥补食品本身味道 缺陷、赋予或加强其生动滋味 的特点，而被广泛应用于 食品，特别是乳制品、烘焙食品、饮料和食用油中。但是， 过量摄人香兰素会导致头晕、恶心、呼吸困难，甚至损伤 肝、。肾：麦芽酚具有弱的致突变活性和诱导细胞死亡的毒 性作用，且可以控制人体内铁和铝的含量水平【2 J ，因此麦 芽酚含量是评价食品安全的一个重要指标。我国标准G B 2 7 6 0 2 0 1 4 食品安全国家标准食品添加剂使用标准 3 中严格规定了较大婴儿和幼儿配方食品中香兰素的使用限 量，并明确指出在灭菌乳、0 至6 个月婴幼儿配方食品、 植物油脂等1 4 类新鲜原味食品中不得添加。然而，不法商 贩为了达到以次充好、以假乱真的目的，在食品中违法添 加此类物质。“香精奶粉”、“香精油”等事件引起了广泛关 注。因此，基于日常监管需要，建立相应的检测方法迫在 眉睫。 目前，我国尚无食品中香兰素、乙基香兰素、甲基香 兰素的标准检测方法，而相关文献报道检测成分单一，且 前处理方法主要集中于对烟草、奶粉等个别基质的研究 4 - 6 1 。从检测技术看，报道中提及的高效液相色谱法【7 。0 1 、 分光光度法1 1 1 、电化学法1 2 1 、气相色谱法 1 3 及离子色谱法 1 4 应用于食品的定量检测易受到复杂基质中其他组分的 干扰。此外，普通色谱检测方法的检出限较高，容易造成 对超范围添加样品的误判。近年来，陆续有文献报道以液 相色谱一串联质谱法同时测定香兰素及其衍生物的方法 1 5 - 1 7 ，但要求质谱同时实现正离子扫描模式和负离子扫描 模式的切换，对检测仪器配置要求高，推广普及受限，且 采用同一种内标定量多种物质，准确性很难保证。 本研究针对上述问题建立超高效液相色谱串联质谱 法( u lt r ap e r f o r m a n celiq u idch r o m a t o g r a p h y t a n d e m m a s s s p e ct r o m e t r y ，U P L C M S M S ) 实现了对婴幼儿配方食品( 乳 粉、米粉、果蔬泥、肉泥) 、食用油、乳制品( 液态乳、酸 奶、奶酪) 、饮料、烘焙食品等食品中麦芽酚、乙基麦芽酚、 香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素5 种香精的同时测定， 为食品安全性监管提供了技术支撑。 2 材料与方法 2 1 材料 市售液体乳、婴幼儿配方食品、食用油、乳制品、饮 料、烘焙食品6 种基质样品共1 8 份。 2 2 试剂与仪器 5 种香精标准物质：麦芽酚( 含量9 9 O ) 、乙基麦芽酚 ( 含量9 9 0 ) 、香兰素( 含量9 9 ) 、甲基香兰素( 含量9 9 0 ) 、 乙基香兰素( 含量9 9 0 ) ，均购自北京百灵威科技有限公 司；甲醇、甲酸( 色谱纯，德国M e r ck 公司) ；氨水( 2 6 ) ( 分 析纯，国药集团化学试剂有限公司) 。 1 2 9 0 6 4 6 0 型超高效液相色谱串联质谱仪( 配电喷雾 电离源，美国A g ile n t 公司) ；A L 2 0 4 电子天平( 瑞士M e t t le r T o le d o 公司) ；高速离心机( 日本H it a ch 公司) ；超声波提取 器( 武汉中科公司) ；W o n d a S e pM A X 固相萃取小柱( 日本岛 津公司) ；涡旋混合器( 英国S t u a r t 公司) 。 2 3 实验方法 2 3 1 溶液的配制 ( 1 ) 标准储备液( 1 0m g m L ) ：分别准确称取麦芽酚、乙 基麦芽酚、香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素0 Ig ( 精确 至0 0 0 0 1g ) ，甲醇溶解并定容至1 0 0m L ，制成1 0m g m L 标准储备液。4 避光保存，可使用3 个月。 ( 2 ) 混合系列标准工作液：分别准确吸取麦芽酚、乙基 麦芽酚、香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素标准储备液，用 空白基质提取液稀释，配制成不同浓度的系列标准工作溶 液。其中，麦芽酚浓度分别为1 0 、5 0 、1 0 0 、5 0 0 、1 0 0 0n g m L ； 乙基麦芽酚浓度分别为1 、5 、1 0 、5 0 、1 0 0n g m L ；其余3 种组分浓度分别为2 、1 0 、5 0 、1 0 0 、2 0 0n g m L 。临用时 配制。 ( 3 ) 氨水溶液：取2 0m L 氨水，用水定容至1 0 0m L 。 ( 4 ) 氨化甲醇溶液：取2 0m L 氨水，用3 0 甲醇定容至 1 0 0 m L 。 2 _ 3 2 色谱条件 色谱柱：I n e r t S u s t a inB ioC 1 8H P 柱( 2 1m m x l5 0m m ，3 儿m ) ；流速O 3m L m in ；柱温3 0 ；进样量为2 此；流动 相：A 为0 1 甲酸水溶液，B 为甲醇；梯度洗脱程序：0 4 m in ，2 0 B ： 4 1 0 m in ，2 0 B 5 0 B ； 1 0 11 m in ， 第7 期 宁霄，等：超高效液相色谱串联质谱法同时测定食品中麦芽酚、乙基麦芽酚、香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素 2 5 5 7 5 U B 9 0 B ；1 1 - 1 2m ln ，9 0 B ；1 2 - 1 3m in ，9 0 B 2 0 B o 2 3 3 质谱条件 离子源：电喷雾离子化( e le ct r o s p r a yio n iz a t io n 。E S I ) iE 离子模式；雾化气温度：4 0 0 ；雾化气流速：3L m in ；喷 雾气压力：4 5p s i；毛细管电压：5 5 0 0v ；多反应监测扫描 ( m u lt ip ler e s p o n s em o n it o r in gs ca n n in g ，M R _ M ) 采集参数见 表1 。 表15 种物质的相对分子质量和超高效液相串联质谱分析参数 T a b le1R e la t iv em o le cu la rm a s s e sa n dU P L C - M S ，M S p a r a m e t e r sf o r t h ef iv eco m p o u n d s 注：+ 表示定量离子。 2 3 4 样品的预处理 固体样品粉碎均匀，液体和半固体样品混合均匀， 备用。 2 3 5 样品的提取及净化 ( 1 ) 乳制品、饮料、食用油、烘焙食品：称取2g 样品( 精 确至0 0 1g ) ，置于5 0 m L 离心管中，加甲醇至2 0 m L ，涡旋 振荡2m in ，超声处理2 0m in ，1 0 0 0 0r m in 离心5m in 。取 上清液2m L ，用氨水溶液定容至2 0m L ，作为待净化液。 依次用甲醇、水溶液、氨水溶液各5m L 活化平衡小柱，取 待净化液上样，弃去流出液，依次用氨水溶液和氨化甲醇 溶液各5 m L 淋洗小柱，减压抽干小柱5 r a in ，5 m L5 甲酸 甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，4 0 下氮吹至近干，残留物 用甲醇溶解定容至1m L ，过O 2 2 岬微孔滤膜后，供 U P L C M S M S 测定。 ( 2 ) 乳粉、婴幼儿配方食品：称取2g 样品( 精确至 0 0 1g ) ，置于5 0m L 离心管中，加入5m L 水，涡旋振荡 3 0S ，以下操作同2 3 5 1 “加甲醇至2 0m L U P L C M S M S 测定”。 3 结果与分析 3 1 提取溶剂的优化 考虑到5 种待测物均易溶于醇，故本研究分别选取甲 醇、甲醇水( 1 ：1 ，矽功和乙醇作为提取溶剂，以常见基质乳 粉为研究对象，加标回收率作为评价指标，进行比对实 验。由于厂家会采用一些分子包埋技术来保护乳粉和婴幼 儿配方食品的营养成分，因此在加入提取溶剂前，先添加 水分散浸润样品，以增加待测组分的包埋释放。结果如图 1 所示，以甲醇为提取溶剂时，5 种香精的回收率均较高， 且重现性好，因此，本研究选择甲醇作为提取溶剂。 黧 E E 香兰素甲基香兰索乙基香兰素麦牙酚乙基麦芽酚 图15 种香精不同溶剂提取效果 甲醇提取 甲醇水提取 乙醇提取 舳 弛 如 如 加 m 0 2 5 5 8食品安全质量检测学报第8 卷 3 2 提取方法的优化 以甲醇作为提取溶剂，分别考察了涡旋振荡2 、5 、 1 0m in 和超声5 、1 0 、2 0m in2 种提取方式。实验证明， 各待测组分的回收率与超声时间成正比，3 种涡旋时间 对其影响无明显差异，鉴于乳粉和婴幼儿配方食品的 特殊制备技术，为了使不同性状的样品均达到最佳分 散效果，考虑将2 者结合，先涡旋振荡2m in ，再超声 提取2 0m in 。 3 3 净化方法的优化 由于食品种类繁多，基质复杂，蛋白质的含量较高， 用水对样品进行浸润处理时会带人大量的水溶性蛋白质， 若不对样品提取液进行净化，可能会影响待测化合物的定 性和定量分析结果，因此需按“2 3 5 ”方法对提取液净化处 理，分别以浓度为2 5 0n g g 的乳粉、豆浆及食用油加标样 品为研究对象，从净化效果和萃取效率方面进行考察。考 虑到待测组分为弱酸性，所以选择了I n e r t S e pM A l、 W o n d a S e pM A X2 种具备强阴离子交换作用的固相萃取小 柱和I n e r t S e pH L B 反相固相萃取小柱，实验结果见图3 。 1 0 0 9 0 邑 8 0 瓣 娶 回 7 0 5 0 由于W o n d a S e pM A X 在以苯乙烯二乙烯苯为基体的基础 上键合了季铵基团，在阴离子交换的同时兼具反相作用， 既对5 种物质具有很好的富集回收率，又能去除大量水溶 性蛋白质，净化效果明显优于另外2 种。因此，选择 W o n d a S e pM A x 小柱进行净化。 确定使用W o n d a S e pM A X 固相萃取小柱后，首先尝 试了通用方法进行净化，依次用甲醇、水活化平衡后，先 用水清洗极性大的杂质，再用甲醇清洗极性小的杂质，最 后用2 甲醇洗脱。但结果发现，由于待测化合物均为弱酸 性，尤其是香兰素p K a 为1 0 ，所以在中性环境下不易保留， 极易随清洗液流失。因此，增加氨水溶液的平衡步骤，并 用氨水将清洗液调至碱性，使目标物始终处于碱性环境， 增加其在小柱上的保留。同时，降低清洗液中的有机相比 例，将纯甲醇换为3 0 甲醇水溶液，增加目标物在小柱上 的非极性吸附能力。最后，由于清洗液碱性较强，需要中 和碱性并使洗脱液呈酸性，通过对比经0 2 、0 5 、1 、 5 不同比例的甲酸甲醇洗脱后样品的回收率，最终确定 洗脱液为5 甲酸甲醇。优化前后回收率提高了1 2 3 5 1 5 ， 具体结果见表2 。 涡旋2 m in涡旋5 m in涡旋1 0 r a in超声5 m in超声1 0 m in超声2 0 m in 图25 种香精不同方式提取效果 F ig 2 T h ee f f e cto fd if f e r e n tm e t h o d sO ilt h ee x t r a ct io no f5k in d so fs p ice s 表2 提取方法优化效果比较 T a b le 2 C o m p a r is o no fo p t im iz a t io nr e s u lt so f e x t r a ct io nm e t h o d s 一香兰素 艨一甲基香兰素 乙基香兰素 一麦牙酚 ”一m 。z 基差溯 第7 期 宁霄，等：超高效液相色谱一串联质谱法同时测定食品中麦芽酚、乙基麦芽酚、香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素 2 5 5 9 A B 甲基香兰素 图3使用W o n d a S e pM A X 固相萃取小柱前( A ) 后( B ) 的净化效果 F ig 3P u r if r in ge f f e ct sb e f o r e ( A ) a n da f t e r ( B ) u s in gW o n d a S e pM A XS P Eco lu m n 3 4 检测条件优化 3 4 1色谱条件的选择 本研究首先比较了水乙腈和水甲醇流动相体系，发 现以水一甲醇作为流动相时，5 种化合物分离效果理想，但 响应值较低，故在水相中加入0 1 甲酸，以增加E S I + 模式 下化合物的电离。实验表明，响应值得到明显改善，但继 续增加有机酸的添加浓度，对色谱峰的保留行为无显著影 响。以不同流速、配比和梯度程序分离待测物后，发现采 用0 1 甲酸甲醇水溶液进行梯度洗脱，5 种香精在1 0m in 内获得良好的分离及峰形。 3 4 2 基质效应 分析物与基质中非挥发性样品提取物的相互作用会 产生一定的信号增强或抑制。本研究发现，采用E S I 源测 定香精时有较强信号抑制的基质效应，按照M a t u s z e w s k i 等【16 】建立的数学模型评定基质效应的影响，采用提取后添 加法：比较2 种不同条件下的信号峰面积平均值，其中S 为标准品溶液的色谱峰面积，为样品基质提取后添加标 准溶液的色谱峰面积，基质效应( m a t r ixe f f e ct ，M E ) = S 2 S a x l0 0 。当M E 为1 0 0 时，表明没有绝对基质效应；当 M E 大于1 0 0 时，表明有信号增强；当M E 小于1 0 0 时， 表明有信号抑制。本实验测定香精的M E 在3 0 1 0 5 范 围内，存在较强的基质效应，故采用空白基质提取液配制 系列标准工作液来减小基质效应对定量结果的影响。 3 4 3 质谱条件的选择 从麦芽酚的化学结构式可以看出其吡喃酮环上有1 个甲基和1 个羟基，流动相中游离氢离子易进攻羟基形成 m z1 2 7 0 母离子。当碰撞电压小时，麦芽酚母离子脱去一 个水分子形成m z1 0 9 1 子离子，当碰撞电压增大时，电子 在环内传递吡喃酮环发生裂解并结构重组，形成m z5 3 2 子离子；乙基麦芽酚在电压小时，母离子脱去一个甲基正 离子形成m z1 2 6 1 分子，电压增大时，母离子也发生环裂 解并结构重组形成m z7 1 1 子离子。 从香兰素的化学结构式可以看出其苯环上有羟基、甲 氧基和醛基3 个基团，流动相中游离氢离子易进攻稳定性 最差的醛基形成m z1 5 3 2 母离子 M + H + 。当碰撞电压小 时，母离子脱去1 个C O 分子形成m z1 2 5 0 子离子，当碰 撞电压大时，母离子同时脱去1 个C O 分子和1 个C H ，O H 分子形成m z9 3 1 子离子。甲基香兰素和乙基香兰素的裂 解原理同香兰素。 2 5 6 0 食品安全质量检测学报第8 卷 将标准品配制成1 0 0n g m L 的溶液，通过流动注射泵 连续进样，调谐质谱参数。使用E S I 源分别在正离子模式 下进行全扫描，以选择适当的定性、定量离子和电离方式。 结果表明：香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素、麦芽酚和 乙基麦芽酚母离子 M + H + 为响应强度最高的离子。在确定 母离子后，采用子离子扫描方式进行二级质谱分析。分别 选取丰度最强和次强的碎片离子作为定量离子和辅助定性 离子。进一步优化碰撞能量、透镜电压等质谱参数，使各 分析化合物的响应最大化。但因甲基香兰素和乙基香兰素 为同分异构体，m z1 3 9 2 为其共有的丰度最强碎片离子， 为减少实际检测中对这2 种化合物的错误识别，增加定量 准确性，故分别选择丰度次强的碎片离子m z1 2 4 1 和9 3 0 作为甲基香兰素和乙基香兰素的定量离子。 3 5 分析方法的评价 3 5 1 方法的线性范围、检出限和定量限 采用基质匹配夕 标法定量分析5 种香精。分别以乳 粉、婴幼儿配方食品、食用油、乳制品、饮料、烘焙食品 的空白样品提取液配制不同浓度范围的香精混合标准溶液， 在优化的方法条件下进行测定，以峰面积( y ) 为纵坐标，质 量浓度伍n g m L ) 为横坐标，绘制标准曲线。麦芽酚 ( 1 0 1 0 0 0n g m L ) 、乙基麦芽酚( t - 1 0 0n g m L ) 、香兰素、甲 基香兰素和乙基香兰素( 2 2 0 0n g m L ) 5 种待测物均具有良 好的线性关系p 0 9 9 ) ，以3 倍信噪E L ( S N ) 确立方法的检 出限( 1 im ito fd e t e ct io n ，L O D ) 为0 9 - 1 6 2I t g k g ，以1 0 倍信 噪比( 彤) 确立方法的定量限( 1 im ito fq u a n t if ica t io n ，L O Q ) 为2 8 - 4 8 7g g k g ，结果见表3 。 3 5 2 方法的回收率与精密度 分别在空白样品中添加3 个浓度水平的标准溶液，每 个浓度水平分析6 次，进行回收率和精密度实验。3 个添 加水平的回收率为8 0 1 1 0 6 ，R S D ( n = 6 ) 为1 3 8 9 ， 结果见表4 。 表35 种香料的线性方程、相关系数( ，) 、检 艰( L O D s ) $ f l定量限( L o Q s ) T a b le 3L in e a re q u a t io n s ，co r r e la t io nco e f f icie n t s ( ，) ，lim it so fd e t e ct io n ( L O D s ) a n dlim it so fq u a n t if ica t io n ( L O Q s ) o f5k in d so fs p ice s 第7 期 宁霄，等：超高效液相色谱串联质谱法同时涣0 定食品中麦芽酚、乙基麦芽酚、香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素 2 5 6 1 表45 种香精的加标回收率与精密度伽= 6 ) T a b le4R e co v e r ie sa n dr e la t iv es t a n d a r dd e v ia t io n s ( R S D s ) o f5k in d so fs p ice s 仰= 6 ) 3 5 - 3 买际样品的测定 为考察方法的普遍适用性，本实验随机抽取市售液 体乳、婴幼儿配方食品、食用油、乳制品、饮料、烘焙食 品6 种基质样品共1 8 份，应用本方法进行测定。结果显示， 有1 2 种样品检出香兰素，其含量为3 9 - 1 2 2 7 t g k g ，4 种样 品检出乙基香兰素，其含量为5 5 1 0 8m g k g ，9 种样品检 出麦芽酚，其含量为0 6 4 2 1m g k g ，5 种样品检出乙基麦 芽酚，其含量为0 7 3 4 6m g k g 。 4 结论 本研究建立了U P L C M S M S 检测食品中香兰素、甲 基香兰素、乙基香兰素、麦芽酚和乙基麦芽酚的分析方法， 通过对前处理方法的选择及色谱、质谱条件的优化，实现 了液体乳、婴幼儿配方食品、食用油、乳制品、饮料、烘 焙食品6 类复杂样品基质中5 种香精的同时检测，适用范 2 5 6 2食品安全质量检测学报第8 卷 围广泛；且该方法易于普及，仅利用单一的E S I + 扫描模式， 具有灵敏度高、准确度和精密度好、专属性及确证性可靠 的优点，可为我国相关食品安全的检测、预警和控制提供 必要的技术支持。 参考文献 1 陶保华，储小军，赖世云，等婴幼儿配方粉中香兰素和乙基香兰素的 检测方法比较明食品安全质量检测学报，2 0 1 3 ，4 ( 2 ) ：4 2 1 4 2 6 T a oB H C h uX J L a iS Y , e ta 1 C o m p a r is o no fq u a n t if ica t io nm e t h o d so f v a n illina n de t h y lv a n illininin f a n tf o r m u la J JF o o dS a fQ u a l，2 0 13 ， 4 ( 2 ) ：4 2 1 _ 4 2 6 【2 迟秋池，李晓雯，何家今，等高效液相色谱法同时测定豆浆中麦芽 酚、乙基麦芽酚、香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素5 种香料叨食 品安全质量检测学报，2 0 1 6 ，7 ( 7 ) ：2 6 9 0 - 2 6 9 5 C h iQ C ，L iX WH eJ J ，e t 口，S im u lt a n e o u sd e t e r m in a t io no f m a lt o l，e t h y l m a lt o l，v a n illin ，m e t h y lv a n illina n de t h y lv a n illinins o y ab e a nm ilkb y h ig hp e r f o r m a n celiq u idch r o m a t o g r a p h y J JF o o dS a fQ u a l，2 0 1 6 ，7 ( 7 ) ： 2 6 9 0 - 2 6 9 5 【3 】G B2 7 6 0 - 2 0 1 4 食品安全国家标准食品添加剂使用标准 s 】 G B2 7 6 0 2 0 1 4N a t io n a ls t a n d a r d sf o rf o o ds a f e t y - S t a n d a r d sf o rt h eu s eo f f o o da d d it iv e s s 4 任呼博，别振英，蔚亦沛，等H P L C 法同时测定烟用添加剂中的香兰 索、乙基香兰素、麦芽酚和乙基麦芽酚 J 分析试验室，2 0 1 4 ，3 3 ( 8 ) ： 9 5 0 - 9 5 4 R e nH B ，B ieZ Y , W e iY P ，e la 1 S im u lt a n e o u sd e t e r m in a t io no fv a n illin ， e t h y l- v a n illin ，m a lt o l a n de t h y lm a t o lincig a r e t t ea d d it iv e sb y h ig h p e r f o r m a n celiq u idch r o m a t o g r a p h y J C h inJA n a lL a b ，2 0 1 4 ，3 3 ( 8 ) ： 9 5 0 - 9 5 4 5 肖锋，张毅，陈沛金，等高效液相色谱- 串联质谱法同时测定婴幼儿 配方食品中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素 J 】食品安全质量检测 学报，2 0 1 4 ，5 ( 1 1 ) ：3 4 3 l一3 4 3 6 X ia oF ，Z h a n gYC h e nP J ，e ta 1 S im u lt a n e o u sd e t e m f in a t io no fv a n illin ， m e t h y l v a n illina n de t h y lv a n iliminin f a n tf o r m u la sb yh ig hp e r f o r m a n ce liq u idch r o m a t o g r a p h y t a n d e mm a s ss p e ct r o m e t r ym e t h o d J 】JF o o dS a f Q u a l，2 0 1 4 ，5 ( 1 1 ) ：3 4 3 1 - 3 4 3 6 6 唐韵熙，白亚敏，毛庆，等芝麻油、芝麻调和油中乙基麦芽酚 H P L C M S M S 分析 J 分析试验室，2 0 1 6 ，3 5 ( 4 ) ：4 6 8 - 4 7 1 T a n gY X ，B a iY M ，M a oQ ，e ta 1 D e t e r m in a t io no f e t h y lm a lt o lins e s a m e o ilb y R P L C - M S M S J C h inJ A n a lL a b ，2 0 1 6 ，3 5 ( 4 ) ：4 6 8 - 4 7 1 7 P 6 r e z - E s t e v eE ，L e r m a - G a r ciaM J ，F u e n t e sA ，e ta lC o n t r o lo f u n d e cla r e d f la v o r in go fco co ap o w d e r sb yt h ed e t e m a in a t io no fv a n illina n de t h y l v a n illin b y H P L C 3 3 F o o d C o n t r o l，2 0 1 6 ，6 7 ：1 7 1 1 7 6 8 李素琴，赵贞，刘丽君，等高效液相色谱法检测乳制品中7 种添加剂 m 乳业科学与技术，2 0 1 6 ，3 9 ( 4 ) ：2 2 2 5 L iS Q ，Z h a oZ ，L iuL J ，e ta 1 D e t e ct io no f7a d d it iv e sind a ir yp r o d u ct sb y h ig hp e r f o r m a n celiq u idch r o m a t o g r a p h y J 】JD a ir yS ciT e ch n o l，2 0 1 6 ， 3 9 ( 4 ) ：2 2 - 2 5 【9 A liL ，P e r f e t t iG D ia ch e n k oG R a p idm e t h o df o rt h ed e t e r m in a t io no f co u m a r in ，v a n illin ，a n de t h y lv a n illininv a n illae x t r a ctb yr e v e r s e d p h a s e liq u idch r o m a t o g r a p h yw it hu lt r a v io le td e t e ct io n J JA O A CI n t ，2 0 0 8 ， 9 1 f 2 ) ：3 8 3 籍芳，孙玉慧，李天宝，等奶粉中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素 的测定 J 食品研究与开发，2 0 1 5 ，3 6 ( 1 3 ) ：7 9 8 1 J iF ，S u nY H ，L iT B ，e ta lD e t e r m in a t io no f v a n illin ，m e t h y lv a n illina n d e t h y lv a n illin in m ilk p o w d e r J F o o d R e s D e v , 2 0 1 5 ，3 6 ( 1 3 ) ：7 9 8 1 N i Y N ，Z h a n gG W 。K o k o tS S im u lt a n e o u ss p e ct r o p h o t o m e t r ic d e t e r m in a t io no fm a lt o l，e t h y lm a lt o l，v a n illina n de t h y lv a n illininf clo d s b ym u lt iv a r ia t eca lib r a t io na n da r t if icia ln e u r a ln e t w o r k s J F o o dC h e m ， 2 0 0 5 ，8 9 ( 3 ) ：4 6 5 - 4 7 3 彭少华，马文华，狄俊伟分光光度法、高效液相色谱法和伏安法测定 麦芽酚和乙基麦芽酚 J 光谱实验室，2 0 0 5 ，2 2 ( 4 ) ：6 8 0 6 8 2 P e n gS H ，M aW H ，D iJ W D e t e r m in a t io no fm a lt o la n de t h y lm a lt o lb y s p e ct r o p h o t o m e t r yH P L Ca n dv o lt a m m e t r y J C h inJS p e e t r o s c L a b ， 2 0 0 5 ，2 2 ( 4 ) ：6 8 0 -