（中药学专业论文）益智健脑胶囊制剂工艺及质量标准研究.pdf

目录 中文摘要1 英文摘要3 研究论文益智健脑胶囊制剂工艺及质量标准研究 引言5ji 口j 第一部分益智健脑胶囊的制剂工艺研究 材料与方法7 结果1 6 附图2 0 附表2 2 讨论31 小结3 2 参考文献3 3 第二部分益智健脑胶囊的质量标准研究及稳定性研究 材料与方法3 5 结果4 21 = 口；7 f f z ： 附图4 7 附表5 2 讨论61 小结6 2 参考文献6 3 综述6 4 致 射71 个人简历7 2 中文摘要 益智健脑胶囊制剂工艺及质量标准研究 摘要 血管性痴呆( v a s c u l a rd e m e n t i v a ，v d ) 是由各种脑血管病所导致的 痴呆综合征。属于中医“呆病、“文痴”、“健忘等范畴。在我国，由于脑 血管病的多发，使得v d 成为高发疾病之一。迄今为止，对v d 的核心症 状即智能低下尚没有较好的解决办法。西医对血管性痴呆患者的治疗以改 善大脑血液循环、促进大脑代谢、增强神经传递功能为主要途径。总体而 言，这些药物对轻度痴呆患者能在一定程度上改善痴呆症状或延缓痴呆进 展，但收效并不明显。中医在v d 的治疗中显示了良好的前景，其疗效与 目前的西药相比具有一定优势。因此，探讨中医药治疗方法及其药物对血 管性痴呆影响的机制，将为血管性痴呆的有效防治提供必要的理论依据 本文主要是对益智健脑胶囊进行药学研究，为益智健脑胶囊在临床方 面应用安全、有效和质量可控提供理论依据。 本文将从以下几个方面进行研究： 益智健脑胶囊的制备工艺研究主要依据处方中每味药材的性质，通过 单因素考察和正交设计试验对药材的醇提取工艺和水提取工艺等进行考 察，同时对制剂成型工艺进行研究，包括喷雾干燥、颗粒的流动性、颗粒 的吸湿性、胶囊壳型号等各个参数进行考察，确定最佳制备工艺参数，优 选最佳制备工艺。 益智健脑胶囊质量标准研究从鉴别、检查和含量测定三个方面对该制 剂的质量标准进行研究。对处方中三七、人参、白芍和黄连进行了薄层鉴 别；根据中国药典2 0 1 0 年版一部附录i l 胶囊剂项下有关的各项规定 进行了检查，符合规定；对处方中君药姜黄进行姜黄素含量测定分析方法 的研究，结果表明该方法的精密度、稳定性和重现性均良好。 益智健脑胶囊质量标准草案通过对研究结果的整理，起草质量标准草 案。 益智健脑胶囊的稳定性研究按照药品注册管理办法的规定，对拟 上市包装下样品，进行了6 个月的加速稳定性和6 个月室温稳定性试验， 初步了解了本品的稳定性情况，为生产、包装、贮存、运输条件和有效期 中文摘要 的确定提供依据。对性状、鉴别、检查( 水分、崩解时限、微生物限度) 、 含量等进行了考察，结果显示样品具有良好的稳定性。 关键词：益智健脑胶囊；制剂工艺；质量标准；稳定性 英文摘要 p h a r m a c e u t i c a ls t u d yo f y i z h ij i a n n a oc a p s u l e a b s t r a c t v a s c u l a rd e m e n t i ai sc a u s e db yav a r i e t yo fc e r e b r o v a s c u l a rd e m e n t i a s y n d r o m e b e l o n g st oc h i n e s em e d i c i n e ，d e m e n t i a ，c r a z yt e x t ，f o r g e t f u l n e s s ， e t c i no u rc o u n t r y ，b e c a u s eo fm u l t i p l ec e r e b r o v a s c u l a rd i s e a s e s ，m a k i n ga h i g hi n c i d e n c eo fd i s e a s e so f v d s of 打，t h a to fm e m a i ns y m p t o mo fv d i s m e n t a lr e t a r d a t i o ni s s t i l ln oi d e a l t r e a t m e n t w e s t e r nm e d i c i n ef o r t h e t r e a t m e n to fv a s c u l a rd e m e n t i ap a t i e n t st oi m p r o v eb r a i nb l o o dc i r c u l a t i o n ， p r o m o t em e t a b o l i s mo ft h eb r a i na n de n h a n c e n e u r o t r a n s m i t t e rf u n c t i o na st h e m a j o rr o u t e o v e r a l l ，t h e s ed r u g si np a t i e n t sw i t hm i l dd e m e n t i ac a l lb e i m p r o v e dt os o m ee x t e n t ，t h es y m p t o m so f d e m e n t i ao rs l o wt h ep r o g r e s so f d e m e n t i a b u tt h ee f f e c ti sn o to b v i o u s c h i n e s em e d i c i n ei nt h et r e a t m e n to f v ds h o w e dg o o dp r o s p e c t s ，a n di t se f f i c a c yc o m p a r e dw i t ht h ec u r r e n t w e s t e r nm e d i c i n eh a sc e r t a i na d v a n t a g e s t h e r e f o r e ，t h es t u d yo fc h i n e s e m e d i c i n et r e a t m e n t sa n di t se f f e c t so fd r u g so nt h em e c h a n i s mo fv a s c u l a r d e m e n t i a ，v a s c u l a rd e m e n t i aw i l lb ee f f e c t i v e t o p r o v i d et h en e c e s s a r y t h e o r e t i c a lb a s i sf o rp r e v e n t i o na n dt r e a t m e n t t h i s p a p e r i sa b o u tt h ep h a r m a c e u t i c a lr e s e a r c ho fy i z h i j i a r m a o c a p s u l e s ，i nt h ea r e ao fc l i n i c a la p p l i c a t i o no fs a f e ，e f f e c t i v ea n dp r o v i d e ab a s i s f o rq u a l i t yc o n t r 0 1 t h i sp a p e rw i l ls t u d yt h ef o l l o w i n ga s p e c t s ： f i r s t l y ，a l z h e i m e r sr e s e a r c hp r o g r e s s ：a l z h e i m e r sm a i n l ya no v e r v i e w a ta l lt i m e s ，w h i l et h e i rt r e a t m e n ti ss u m m a r i z e d s e c o n d l y ，p r e p a r a t i o nm e t h o do fy i z h i ji a n n a oc a p s u l e s m a i n l yb a s e d o n t h en a t u r eo ft h ev a r i o u sh e r b s ，b ys i n g l ef a c t o ra n do r t h o g o n a ld e s i g no f s o l v e n te x t r a c t i o no fv a r i o u sh e r b s ，a l c o h 0 1c o n c e n t r a t i o n a n dw a t e r e x t r a c t i o n ，e t c t oi n s p e c t ，a tt h es a m et i m ec a p s u l ep r e p a r a t i o np r o c e s s ， i n c l u d i n d r y i n g ，b a r t i c l ea a o b i l i t y ，m dt h ec a p s u l et y rhygroscotincludings p r a yd r y i n gp a r t i c l em ob i l i t y a n dt l a ecs u l et y p er i y g r o s c o p l c ， ， p a r t i c l e si n v e s t i g a t e dv a r i o u sp a r a m e t e r st od e t e r m i n et h eo p t i m u mp r o c e s s p a r a m e t e r s ，a n do p t i m a lp r e p a r a t i o np r o g r a m s 皇 英文摘要 t h i r d l y ，s t a b i l i t y r e s e a r c ho fy i z h i j i a n n a o c a p s u l e ：a c c o r d i n g t h e a p p r o v a lo fn e wp h a r m a c e u t i c a l s ，t h ep r o v i s i o n st oc h a r a c t e r ，i d e n t i f i c a t i o n ， i n s p e c t i o n ( w a t e r ，d i s i n t e g r a t i o n ，a n dm i c r o b i a ll i m i t s ) ，a n dc o n t e n ti n s p e c t i o n p r o g r a mf o rt h ep r e p a r a t i o no fp r e f e r r e dc o n d u c ts t a b i l i t ys t u d i e s ，t h er e s u l t s s h o w e dg o o ds t a b i l i t yp r e p a r a t i o np r o c e s s f o u r t h l y ，q u a l i t ys t a n d a r dr e s e a r c h ：f r o mt h ei d e n t i f i c a t i o n ，e x a m i n a t i o n a n dd e t e r m i n a t i o no ft h et h r e ea s p e c t so ft h eq u a li t ys t a n d a r d so fp r e p a r a t i o n p r e s c r i p t i o ni nt u r m e r i c ，p a n a xg i n s e n g ，w h i t ep e o n yr o o ta n dn o t o g i n s e n g w e r e i d e n t i f i e d ；u n d e r ”c h i n e s ep h a r m a c o p o e i a 2 0 0 5 e d i t i o nu n d e r a p p e n d i xi lc a p s u l e sw e r et h ep r o v i s i o n sr e l a t i n gt oi n s p e c t i o n ，c o m p l i a n c e ； o nd r u gj i a n g h u a n go ft h ep r e s c r i p t i o n o fd e t e r m i n a t i o no fc u r c u m i nc o n t e n t o ft u r m e r i cf o ra n a l y s i sm e t h o d s ，t h er e s u l t ss h o wt h a tt h em e t h o dp r e c i s i o n ， s t a b i l i t ya n dr e p r o d u c i b i l i t ya r eg o o d f i f t h l y ，d r a f to f t h eq u a l i t ys t a n d a r d ：t h r o u g ht h ec o l l a t i o no fr e s u l t s ， d r a f t i n go ft h ed r a f tq u a l i t ys t a n d a r d s k e yw o r d s ：y i z h i ji a n n a oc a p s u l e ；p r e p a r a t i o np r o c e s s ；q u a l i t y s t a n d a r d s ；s t a b i l i t y ；p h a r m a c e u t i c a lr e s e a r c h 4 研究论文 益智健脑胶囊制剂工艺及质量标准研究 引言 血管性痴呆( v a s c u l a rd e m e n t i a ，v d ) 是一组由脑血管疾病导致的获得 性智能及认知功能障碍综合征，是老年性痴呆的常见病因之一。患者的遗 忘及认知障碍与脑血管病事件有时间与空间的相互关联。病程波动，呈阶 梯性进展；造成认知功能呈进行性下降，伴记忆功能、定向力、注意力、 语言功能、视空间功能、运用能力、运动自控和行为等缺损，可由临床表 现及神经心理检查证实；患者功能缺损的程度足以妨碍日常生活，由不完 全由脑卒中引起的躯体功能障碍所致。现在，v d 分为卒中后血管性痴呆、 单一重要部位梗死性痴呆、皮层下缺血性血管性痴呆、混合性痴呆四类。 中医学自古并没有“血管性痴呆之名，而是将其称之为“白痴 、“愚痴”、 “呆病、“武痴”等。有关本病的记载最早见于先秦时期的左传。明代 医家张景岳首先提出“痴呆”是一独立性疾病。痴呆的病位在脑其本在肾。 痴呆以虚实错杂痰瘀多见。情志因素也与本病的发生有一定的关系。现今， 有关v d 的辨证分型论述比较详尽的是田金n t l 】在“血管性痴呆辨证量 表”( s ds v d ) 翅j 分的七个类型，即肾精亏虚、痰浊阻窍、瘀血阻络、肝阳 上亢、火热内盛、腑滞浊留、气血亏虚。在治疗方法上不外乎补肾、涤痰、 化瘀、疏肝、补肺等法。然而，由于v d 病因病机错综复杂，气痰瘀并见 者甚多，故现今对于v d 的临床治疗多倾向于选择补虚、破瘀、化痰三者 相结合的治法【2 】。 本文主要是对益智健脑胶囊进行药学研究，为益智健脑胶囊在临床方 面的安全性、有效性和质量可控性提供一定的理论依据。主要根据处方中 各个药材的性质，通过单因素考察和正交设计试验对各药材的提取溶媒、 醇浓度和水提工艺等进行考察，同时对胶囊制备过程包括喷雾干燥、颗粒 的流动性、胶囊型号以及颗粒的吸湿性等各个参数进行考察，确定了最佳 工艺参数及最优制备工艺。 本文从鉴别、检查和含量测定三个方面对益智健脑胶囊的质量标准进 行研究。对处方中自芍、黄连、三七和人参进行鉴别；并根据中国药典 2 0 1 0 年版一部附录i l 胶囊剂项下有关的各项规定进行了检查，结果符合 规定；对处方中君药姜黄进行姜黄素含量测定分析方法的研究，结果表明 研究论文 该方法的精密度、稳定性和重现性均良好。在对研究结果的详细地整理后， 起草了益智健脑胶囊质量标准草案。 按照药品注册管理办法的规定，以性状、鉴别、检查( 水分、崩 解时限、微生物限度) 、含量等项目的考察对样品进行了1 2 个月长期和 6 个月加速稳定性研究，结果显示该样品基本稳定性。 研究论文 第一部分 益智健脑胶囊的制剂工艺研究 材料与方法 l 材料与仪器 1 1 材料 姜黄，姜科植物姜黄c u r c u m al o n g al 的干燥根茎，经鉴定为正品。 石菖蒲，为天南星科植物石菖蒲a c o r n st a t a r i n o w i is c h o a 的干燥根茎， 经鉴定为正品。 三七，五加科植物三七p u n a xn o t o g i n s e n g ( b u r k ) f h c h e n 的干燥根 及根茎，经鉴定为正品。 人参，五加科植物人参p a n a xg i n s e n gc a m e y 的干燥根及根茎， 经鉴定为正品。 制何首乌，何首鸟( 蓼科植物何首乌p o l y g o n u mm u l t i f l o r u m t h u n b 的 干燥块根) 的炮制加工品，经鉴定为正品。 黄连，毛莨科植物黄连c o p l i sc h i n e n s i sf r a n c h 的干燥根茎，经鉴定 为正品。 白芍，毛莨科植物芍药p a e o n i al a c t i f l o r ap a l l 的干燥根，经鉴定为正 口 日口。 茯苓，多孔菌科真菌茯苓p o r i ac o c o s ( s c h w ) w o l f 的干燥菌核，经 鉴定为正品。 远志，远志科植物远志p o l y y a l a t e n u i f o l i aw i l l d 的干燥根，经鉴定为 正品。 以上药材均购自安国以岭中药饮片厂，经河北以岭医药研究院中药标 本室田青存主任药师鉴定，经过全检符合中国药典规定。 姜黄素对照品( 批号：1 1 0 8 2 3 2 0 0 6 0 3 ，供含量测定用，购自中国药 品生物制品检定所) 人参皂苷r 9 1 对照品( 批号：1 1 0 7 0 3 2 0 0 7 2 6 ，供含量测定用，购自 中国药品生物制品检定所) 人参皂苷r e 对照品( 批号：1 0 7 5 4 2 0 0 8 2 2 ，供含量测定用，购自中 国药品生物制品检定所) 研究论文 人参皂苷r b l 对照品( 批号：l1 0 7 0 4 2 0 0 4 2 0 ，供含量测定用，购自 中国药品生物制品检定所) 三七皂苷r l 对照品( 批号：11 0 7 4 5 2 0 0 4 1 5 ，供含量测定用，购自中 国药品生物制品检定所) 2 ，3 ，5 ，4 四羟基二苯乙烯2op d 葡萄糖苷对照品( 批号： 11 0 8 4 4 2 0 0 6 0 7 ，供含量测定用，购自中国药品生物制品检定所) 黄连对照药材( 批号：1 2 0 9 1 3 2 0 0 4 0 7 ，供鉴别用，购自中国药品生 物制品检定所) 芍药苷对照品( 批号：1 1 0 7 3 6 2 0 0 8 3 3 ，供含量测定用，购自中国药 品生物制品检定所) 远志对照药材( 批号：1 2 0 9 8 9 2 0 0 5 0 5 ，见别用，购自中国药品生物 制品检定所) 流动相所用乙腈和甲醇均为色谱纯，其余试剂、试药均为分析纯，水 为纯水 1 2 主要仪器 仪器：h p l c 泵( a g i l e n t g 1 311 aq u a tp u m p ) ；紫外检测器( a g i l e n t g 1 3 1 4 av w d ) ；自动进样器( a g i l e n tg 1 3 1 3 a a l s ) ；柱温箱( a g i l e n t g 1 3 1 6 ac o l c o m ) ；脱气机( a g i l e n tg 1 3 7 9 ad e g a s s e r ) ；色谱柱 ( b i s c h o f fc 1 8 ，5 9 r n ，4 6 x 1 5 0 m m ；w a t e r ss y m m e t r yc 1 8 ，5 u m ， 4 6 x 1 5 0 m m ；p h e n o m e n o nc 1 8 ， 5 u m ，4 6 x 2 5 0 m m ；) 紫外分析仪s h i m a d z uu v - 2 5 5 0 超声波清洗器( k q 2 5 0 e ，2 5 0 w ，昆州市超声仪器有限公司) 电子分析天平( a g l 3 5 ) 电子恒温水浴锅( 天津市泰斯特仪器有限公司) k q 2 5 0 型超声波清洗器( 昆山市超声仪器有限公司，功率2 5 0w ， 频率4 0k h z ) 2 方法 2 1 剂型选择 本方以汤剂形式应用于i 临床，但汤剂制备工艺简单，有效成分溶出不 充分，服用量大，口感差，并且不便于携带。在保证制剂的稳定性、可控 性及疗效提高的基础上，重新选择制备工艺，改进剂型，以便更好的发挥 研究论文 该药的社会价值和经济价值。根据处方中药味性质及最终制定的提取工 艺，选择了胶囊剂作为本处方的剂型。 2 2 工艺预试验单味药材提取溶剂优选 2 2 1 姜黄提取溶媒的考察： 2 2 1 1 试验设计 采用单因素试验法，以姜黄素为考察指标，选取5 0 乙醇、6 0 乙 醇、7 0 乙醇、8 0 乙醇、9 0 乙醇为考察因素，进行试验【引。 2 2 1 2 实验方法： 取姜黄药材，洗净，干燥，粉碎至5 毫米左右颗粒。称取6 0 克，平 行试验，各加8 倍量溶媒，回流提取2 小时，滤过，加各自溶媒定容至 5 0 0 m l 。备用。 供试品溶液的制备：各精密吸取1 0 m l ，加各自溶媒定容至1 0 0 m l ， 摇匀，用微孔滤膜( 0 4 5 9 m ) 滤过，即得。 对照品溶液的制备：精密称取姜黄素对照品适量，加甲醇制成每l m l 含o 0 6 4 8 m g 的溶液，即得。 色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈2 冰 醋酸溶液( 4 9 ：5 1 ) 为流动相；检测波长为4 3 0 n m ；流速：1 0 m l m i n 。 测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2 山，注入液相色 谱仪，测定，即得。 2 2 2 三七提取溶媒的考察 2 2 2 1 试验设计： 采用单因素试验法，以人参皂苷r b l 、人参皂苷r 9 1 、三七皂苷r l 为考察指标，选取水、4 0 乙醇、5 0 乙醇、6 0 乙醇、7 0 乙醇、8 0 乙醇为考察因素，进行试验【4 】o 2 2 2 2 试验方法： 取三七药材，净选干燥，粗碎。称取3 0 9 ，在平行操作的条件下，加 8 倍量溶媒加热回流提取2 小时，提取液过滤，加各自溶媒定容至2 5 0 m l 。 备用。 供试品溶液的制备：各精密吸取1 0 m l ，加各自溶媒定容至1 0 0 m l ， 摇匀，用微孔滤膜( 0 4 5 9 i n ) 滤过，即得。 对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷r b l 适量加甲醇制成每l m l 研究论文 含0 3 4 m g 的溶液；精密称取人参皂苷r g l 适量加甲醇制成每l m l 含o 3l m g 的溶液；精密称取三七皂苷r 1 适量加甲醇制成每l m l 含o 1 4 3 2 m g 的溶液， 即得。 色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：2 0 3 n m ； 流速：1 0 m l m i n 。流动相：按t a b l el 进行梯度洗脱。 测定法：分别精密吸取对照品溶液1 0 山和供试品溶液各2 9 l ，注入液 相色谱仪，测定，即得。 2 3 工艺选择依据 益智健脑胶囊是在总结多年临床经验，结合中医药理论并经临床验证 疗效确切的治疗血管性痴呆的中药新制剂，依据该处方的组方及其功能主 治进行了其中各味药材提取工艺选择，选择依据如下： 2 3 1 姜黄： 具有破血行气，通经止痛之功效。主含脂溶性成分( 姜黄素和挥发油， 包括姜黄烯、榄香烯等) 和水醇两溶性成分( 姜黄酮、芳香黄酮等具有行 气通经之作用) 。现代药理研究表明，姜黄素能够抑制血小板环氧酶活性， 减少炎性物质p g s 的生成，具有抗心肌缺血的作用，是抗凝血的活性成 分【5 】。姜黄素不溶于水，易溶于乙醇，经溶媒优选，工艺中采用高浓度乙 醇为溶媒进行提取。 2 3 2 石菖蒲： 具有化湿开胃，开窍豁痰，醒神益智的功效。主要含有挥发性成分， 挥发油中主要为细辛醚，其次为黄樟油素、丁香油酚。药理研究表明，石 菖蒲的水提取物具有镇静、镇痛、及抗惊厥的作用，细辛醚有安定作用及 抗惊厥作用，并有促智及平喘作用，丁香油酚有一定的中枢抑制作用，故 工艺采用提取挥发油，水煎液与其它药液合并【6 】。 2 3 3 远志： 具有安神益智，祛痰消肿之功效。主要含有远志酸、远志皂苷( 7 种 三萜皂苷) 、氧杂葸酮类、糖类及生物碱类成分。据资料报道，远志水提 取物能促进体力和智力，对脑有保护作用；咕吨酮糖苷及酰基糖具有抗痴 呆作用，故工艺中采用水为溶媒进行提取 7 1 。 2 3 4 人参： 具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，益血生津，安神益智的功效。 研究论文 主要含皂苷类( 其中以原人参二醇型和原人参三醇型含量较多) 和多糖类 成分。药理研究表明，人参具有许多生物活性物质，但其对补气作用及在 动物体内能增进r n a 和蛋白质的合成，对中枢神经有双向调节，有强心， 促智作用的均为“人参皂苷”成分，此成分在水及醇中均能溶解。人参多糖 能够提高机体免疫力，由于人参为贵细药材，故工艺中采用直接粉碎入药， 代替赋形剂【8 】。 2 3 5 三七： 具有散瘀止痛，消肿定痛的功效。三七中含多种与人参皂苷相类似的 成分及三七皂苷、三七素( 为止血有效成分) 。现代药理研究表明，三七 总皂苷及三七素有止血活血作用，对缺血后的脑细胞有保护作用，对急性 脑缺血的脑组织神经细胞膜及血管膜的稳定性有保护作用【9 】。以上皂苷类 成分在水及醇中均能溶解，经溶媒优选，工艺中采用低浓度乙醇为溶媒进 行提取。 2 3 6 白芍： 具有平肝止痛，养血调经，敛阴止汗的功效。主要含有芍药苷、牡丹 酚、芍药新苷等有效成分。此类成分在水中均能溶解，故工艺中采用水提 取。 2 3 7 制何首乌： 具有补肝肾，益精血，乌须发，强筋骨的功效。主要含有羟基葸醌类 衍生物、卵磷脂、二苯乙烯苷类化合物等成分。现代药理学证明，二苯乙 烯苷类化合物具有抗衰老、降低胆固醇、抗疲劳、提高免疫功能、降血脂、 防治动脉硬化及保肝等作用；工艺中采用低浓度乙醇为溶媒提取【1 0 1 。 2 3 8 黄连： 具有清热燥湿，泻火解毒的功效。主要有效成分为生物碱( 小檗碱、 药根碱、巴马亭、黄连碱、甲基黄连碱等多种生物碱) 。现代药理研究表 明，小檗碱具有抗病原微生物、抑制血小板聚集等作用。工艺中采用低浓 度乙醇为溶媒提取【1 1 】。 2 3 9 茯苓： 具有利水渗湿，健脾宁心的功效。主要有效成分为多糖类和三萜类成 分。据资料报道，茯苓多糖有较好的镇静作用，对慢性精神分裂症患者血 清磷酸肌酸激酶c p k 活性有较好作用。故工艺中采用水提取【1 2 】【1 3 】。 研究论文 2 4 醇提部分工艺考察 醇浓度的确定：根据姜黄提取溶媒考察结果，姜黄素在8 0 乙醇中 的溶解度明显高于在其它溶媒中的溶解度，因此确定姜黄的提取溶媒为 8 0 乙醇。根据三七提取溶媒考察结果可知，5 0 乙醇、6 0 乙醇、7 0 乙醇、8 0 乙醇提取的皂苷含量相差不大；确定三七、制何首乌、黄连采 用6 0 乙醇为溶媒一并提取。 2 4 1 姜黄提取工艺考察： 2 4 1 1 正交实验设计：选取影响提取物收率的提取次数( a ) 、提取时间 ( b ) 、加醇量( c ) 为考察因素，以姜黄素的含量为指标，按t a b l e 2 所 列因素水平，进行试验【1 4 】。 2 4 1 2 实验方法：取药材，净选干燥，称取姜黄6 0 9 ，粉碎，以8 0 乙 醇为提取溶媒。按l 9 ( 3 4 ) 正交表平行试验，回流提取，提取液过滤，合 并，浓缩，加8 0 乙醇定容至1 0 0 0 m l ，备用。 2 4 1 3 姜黄素含量测定方法 供试品溶液的制备：精密吸取正交试验样品溶液，微孔滤膜( o 4 5 眦n ) 滤过，即得。 对照品溶液的制备：精密称取姜黄素对照品适量，加甲醇制成每l m l 含0 1 2 9 6 m g 的溶液，即得。 色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈2 冰 乙酸( 4 9 ：51 ) ；检测波长：4 3 0 n m ；流速：1 0 m l m i n 。 测定法：分别精密吸取对照品溶液4 9 l ，供试品溶液各l p l ，注入液 相色谱仪，测定，即得。 2 4 2 三七等药材提取工艺考察： 2 4 2 1 正交实验设计： 选取影响提取物收率的提取次数( a ) 、提取时间( b ) 、加醇量( c ) 为考察因素，以人参皂苷r b l 的含量为指标，按t a b l e 3 进行试验。 2 4 2 2 实验方法： 取药材，净选干燥，粗碎，按处方配比，称取三七1 0 9 、黄连1 5 9 、 何首乌1 5 9 ，以6 0 乙醇为提取溶媒。在平行操作的条件下，按l 9 ( 3 4 ) 正交表，回流提取，提取液过滤，合并，浓缩，加6 0 乙醇定容至1 0 0 0 m l 。 各用。 研究论文 2 4 2 3 含量钡0 定方法 人参皂苷r b l 的含量测定【1 5 】： 供试品溶液的制备：精密吸取5 0 m l ，蒸至近干，残渣加水2 0 m l 溶解， 分数次转移至分液漏斗中，用乙醚萃取3 次，每次2 0 m l ，弃去醚层，水 层用水饱和正丁醇萃取5 次( 2 0 ，2 0 ，2 0 ，1 5 ，1 5 m 1 ) ，合并正丁醇层， 用正丁醇饱和的氨试液洗涤3 次，每次1 0 m l ，再用正丁醇饱和的水洗涤2 次，每次1 0 m l ，将碱洗液与水洗液合并，用水饱和正丁醇1 5 m l 萃取一次， 分取正丁醇层与前正丁醇萃取液合并，挥干，残渣加2 0 乙腈溶解，转 移至1 0 m l 容量瓶中，定容至刻度，摇匀，用微孔滤膜( o 4 5 9 m ) 滤过， 即得。 对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷r b l 适量加甲醇制成每l m l 含0 3 4 m g 的溶液，即得。 色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：2 0 3 n m ； 流速：1 0 m l m i n 。流动相：按t a b l e4 进行梯度洗脱 测定法：分别精密吸取对照品溶液1 0 山和供试品溶液5 9 l 、1 0 9 l ，注 入液相色谱仪，测定，即得。 2 4 3 验证实验 称取药材姜黄6 0 9 ，按最佳工艺a 3 8 3 c 3 组合条件和选定工艺a 2 b ( 32 ) c 3 的组合条件进行重复验证对比实验，测定姜黄素含量。 2 5 水提部分工艺考察 2 5 1 正交实验设计： 选取影响提取物收率的提取次数( a ) 、提取时间( b ) 、加水量( c ) 为考察因素，以芍药苷的含量为指标，按t a b l e5 进行试验【1 6 1 。 2 5 2 实验方法： 取药材，净选干燥，粗碎，按处方配比，称取白芍2 0 9 、茯苓1 5 9 ， 远志2 5 9 。在平行操作的条件下，按l 9 ( 3 4 ) 正交表，回流提取，提取液 过滤，合并，浓缩，定容至1 0 0 0 m l 。 2 5 3 含量测定方法【1 7 】 供试品溶液的制备：精密吸取正交试验溶液各5 m l ，加水定容至 1 0 0 m l ，摇匀，用微孔滤膜( 0 4 5 9 m ) 滤过，即得。 对照品溶液的制备：精密称取已干燥至恒重芍药苷对照品适量，加甲 研究论文 醇制成每l m l 含1 8 0 8 p g 的溶液，即得。 色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈一水 ( 1 4 ：8 6 ) ；检测波长：2 3 0 n t o ；流速：l m l m i n 。 测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2 0 9 l ，注入液相色 谱仪，测定，即得。 2 5 4 验证实验： 取药材，净选干燥，粗碎，按处方配比，称取白芍2 0 9 ，茯苓1 5 9 ， 远志2 5 9 ，按最佳工艺a 2 8 3 c 3 组合条件和选定工艺a 2 8 2 c 2 的组合条件进 行重复验证对比实验，测定芍药苷的含量。 2 6 石菖蒲提取挥发油考察试验【1 8 】： 2 6 1 浸泡时间的考察： 取石菖蒲药材l o o g ，三份，各加水6 0 0 m l ，每隔5 分钟观察一次药材 的浸润程度，以浸泡至透心为标准，记录时间。 2 6 2 加水量对出油率的影响： 取石莒蒲l o o g ，十二份，分为四组，分别8 倍量、l o 倍量、1 2 倍量、 1 4 倍量水，浸泡4 5 分钟，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，各提取5 小时， 计算出油率。 2 6 3 蒸馏时间对出油率的影响： 取石菖蒲2 0 0 9 ，三份，加1 2 倍量水浸泡4 5 分钟，用水蒸气蒸馏法 提取挥发油，计算出油率。 2 7 人参粉碎工艺考察 称取人参三份，每份1 0 0 0 9 ，分别进行粉碎，过1 0 0 目筛，得细粉， 称重，计算出粉率。 2 8 制剂成型工艺研究： 流化床喷雾制粒是一种新型的制粒技术，集混合、制粒、干燥等工序 在一台设备中完成，具有生产工艺简单，自动化程度高，工艺参数明确， 条件可控，辅料用量少等优点，所得的颗粒粒度均匀，色差小，且适合大 生产，因此我们对喷雾制粒工艺条件进行了考察。 2 8 1 相对密度的考察： 按制备工艺提取3 0 个处方量药材，分为3 份，分别浓缩到相对密度 1 0 5 、1 1 0 、1 1 5 左右；取人参粉过1 0 0 目筛，按1 0 倍处方量称取1 8 7 5 k g 研究论文 为底料，用d l b 3 型多功能制粒包衣机制粒，以在2 号筛4 号筛之间颗 粒、颗粒的收率和姜黄素的含量为指标进行评价。 2 8 2 主风机温度的考察： 主风机温度对颗粒的影响较大，因此对主风机温度进行了考察，按制 备工艺提取3 0 个处方量药材，分别浓缩至相对密度1 0 5 1 1 0 ；取人参粉 过1 0 0 目筛，按1 0 倍处方量称取1 8 7 5 k g 为底料，用d l b 。3 型多功能制 粒包衣机制粒，以在2 号筛4 号筛之间颗粒、颗粒的收率和姜黄素的含量 为指标进行评价。 2 8 3 物料温度的考察： 物料温度对颗粒的影响较大，因此对物料的温度进行了考察。按制备 工艺提取3 0 个处方量药材，分别浓缩至相对密度1 0 5 1 1 0 ；取人参粉过 1 0 0 目筛，按l o 倍处方量称取1 8 7 5 k g 为底料，用d l b 3 型多功能制粒 包衣机制粒，以在2 号筛一4 号筛之间颗粒、颗粒的收率和姜黄素的含量为 指标进行评价。 2 8 4 颗粒流动性测定： 采用固定漏斗法测定休止角。将三个漏斗串联固定于水平位置的坐标 纸上适宜高度处( 注意勿使上一个漏斗的出口对准下一个漏斗出口) ，小 心地将混合好的颗粒沿漏斗壁倒入最上面的漏斗上，直到最下面形成的颗 粒圆锥体接触到最下面的漏斗为止，测出圆锥体底部的直径，计算休止角。 2 8 5 颗粒的吸湿性测定： 在胶囊剂车间的生产环境中( 洁净级别l o 万级、测定时温度为1 9 。c 、 湿度3 0 ) ，将已知水分( 4 8 ) 的颗粒平铺于不锈钢盘中，厚度约5 m m ， 每间隔l 小时取一份样品，测定水分。 2 8 6 胶囊壳型号及规格的确定 根据临床日生药服用量，结合工艺研究及患者依从性，确定胶囊壳型 号及规格。 2 9 中试试验： 取处方量的1 0 倍量投料，按确定工艺流程进行制备了三批中试样品， 并按照中国药典胶囊剂项下中的有关规定对三批样品进行了检验，测定了 姜黄素含量。 研究论文 结果 1 单味药材提取溶剂优选考察结果 1 1 姜黄提取溶剂优选结果 试验结果表明，姜黄素在不同浓度的乙醇中均有一定的溶解度，但在 8 0 乙醇中溶解度最大。故选择采用8 0 乙醇提取姜黄，结果见f i g 1 与 t l b l e6 。 1 2 三七提取溶剂优选结果 试验结果表明，以人参皂苷r b l 、人参皂苷r 9 1 、三七皂苷r 1 三者总 量计，水和4 0 乙醇提取的皂苷含量明显低于5 0 乙醇、6 0 乙醇、7 0 乙醇、8 0 乙醇提取的皂苷含量，而5 0 乙醇、6 0 乙醇、7 0 乙醇、 8 0 乙醇提取的皂苷含量相差不大。从节约成本及充分提取角度考虑，故 采用6 0 乙醇作为提取溶剂，结果见f i g 2 与t a b l e 7 。 2 醇提工艺部分考察结果 2 1 正交试验结果及分析 正交试验结果表明，三个因素对姜黄素的含量考察指标影响大小顺序 为：提取次数( a ) 加醇量( c ) 提取时间( b ) 。最佳工艺为a 3 8 3 c 3 ， 即加1 0 倍量8 0 乙醇，提取3 次，每次2 小时。a 因素，随着提取次数 的增加，姜黄素的含量也相应增加，但从i in i i i 增幅变小，故定为提取2 次。b 因素对姜黄素的影响不大，考虑到溶剂对药材的浸润和渗透时间， 故将提取时间选为第一次2 小时、第二次1 5 小时。c 因素对姜黄素含量 的影响介于a 因素与b 因素之间，加入的乙醇量6 、8 倍时差异不大，但 加入1 0 倍量时，姜黄素含量显著增加，因此选择加1 0 倍量溶媒进行提取。 故经优选后确定的工艺为a 2 b ( 3 2 ) c 3 ，即加8 0 乙醇提取2 次，第一次加 1 0 倍量提取2 小时，第二次加1 0 倍量提取1 5 小时。试验结果见t a b l e 8 ， 方差分析见t a b l e 9 。 2 2 醇提工艺验证结果 试验结果表明，最佳工艺a 3 8 3 c 3 和选定工艺a 2 b ( 3 。2 1 c 3 的姜黄素的 含量指标差距不大；但选定工艺所需时间更短，消耗能量也大为降低，故 选定a 2 b ( 3 ，2 ) c 3 为提取工艺，即药材加1 0 倍量8 0 乙醇提取2 次，第一 次提取2 小时，第二次提取1 5 小时。结果见t a b l e l 0 。 研究论文 2 3 三七等药材提取工艺考察结果 由正交实验结果可知：以人参皂苷r b l 的含量为考察指标时，三个因 素的影响大d j f 顷序为：提取次数( a ) 提取时间( c ) 加醇量( b ) 。 最佳工艺为a 3 8 3 c 3 ，即加1 0 倍量6 0 乙醇提取3 次，每次2 小时。结果 见t a b l e l1 ，方差分析见t a b l e l 2 。 3 水提部分试验考察结果 3 1 正交试验结果分析 直观分析表明，以芍药苷为考察指标，最佳工艺为a 2 8 3 c 3 ，即加1 0 倍量水提取2 次，每次2 小时。方差分析表明，a 因素对芍药苷的含量有 显著性影响，因此选择提取2 次；b 因素对芍药苷的含量无显著性影响， 且i i 到m 均增幅较小，为了缩短生产周期，选择提取1 5 小时；c 因素对 芍药苷的含量亦无显著性影响，从生产成本角度考虑，选择加8 倍量水。 故经优选后确定的工艺为a 2 8 2 c 2 ，即加8 倍量水提取2 次，每次1 5 小时。 试验