（农药学专业论文）20伊维菌素·毒死蜱水乳剂的研制.pdf

摘要 2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的研制 论文作者：李靖 指导老师：何林教授 中文摘要 伊维菌素是一种新型抗生素类驱虫药剂，是阿维菌素的结构改造产物之一，它 是由阿维菌素的b 1 组分用威尔金森催化剂选择还原2 2 ，2 3 一位的不饱和键而制得 的。虽然伊维菌素的生物活性略低于阿维菌素，但由于伊维菌素具有稳定性更好、 毒性更低、无交互抗性等优点；经相关研究发现伊维菌素对农业害虫、害螨也具 有良好的防治效果。目前伊维菌素主要用于防治家畜寄生虫，在农业上应用较少。 因此，伊维菌素作为农药开发将具有广阔的前景。 毒死蜱属于有机磷杀虫剂，具有胃毒、触杀和熏蒸作用。在土壤中残留期较长， 在叶片上残留期较短，对地下害虫的防治效果较好，适用于叶菜、棉花、苹果、 水稻、甘蔗等作物。 为了克服伊维菌素价格较高的缺点，将伊维菌素和毒死蜱进行复配将具有良好 的应用前景。本研究在获得伊维菌素与毒死蜱最佳配比的基础上，研制出了2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂，并制定了产品质量分析方法，为扩大伊维菌素在农业 领域应用做了有益探索。主要研究方法及结果如下： 1 分别测定了伊维菌素和阿维菌素分别对甜菜夜蛾、敏感朱砂叶螨和烟草根结 线虫的室内活性，根据所测得的l c 5 0 可知阿维菌素的生物活性是伊维菌素的1 5 2 4 倍；伊维菌素和阿维菌素对朱砂叶螨阿维菌素抗性品系的l c 5 0 值分别为 0 0 8 0 m g l 、0 2 3 0 m g l ，对阿维菌素已经产生抗性的朱砂叶螨( 抗性倍数为5 4 倍) 对伊维菌素没有明显的抗性。 2 当伊维菌素和毒死蜱的配比为l ：9 、l ：1 2 3 、1 ：1 9 、1 ：3 9 、l ：7 9 和1 ：1 3 2 3 时， 对朱砂叶螨的c t c 值分别为9 5 2 2 、1 0 4 0 6 、9 9 6 4 、1 4 4 8 9 、2 9 6 9 8 和1 8 1 9 3 ；对 甜菜夜蛾的c t c 值分别为1 7 2 7 9 、1 3 7 0 4 、1 5 2 1 3 、1 8 5 9 6 、1 9 3 4 8 和1 5 9 4 8 。两 种药剂混配以后均以伊维菌素：毒死蜱= 1 ：7 9 时c t c 值最高，对朱砂叶螨和小菜蛾 的c t c 值分别为2 9 6 9 8 和1 9 3 4 8 ，增效作用最显著。 3 根据伊维菌素和毒死蜱特定比例的增效作用及伊维菌素和毒死蜱的理化性 质进行了伊维菌素和毒死蜱水乳剂的研制。最终确定了配制2 0 伊维菌素毒死 蜱水乳剂的优选配方： 2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂配方： 两南人学硕 j 学位论文 伊维菌素0 2 5 ( 质量分数，下同) 毒死蜱 1 9 7 5 有机溶剂1 5 ( a 和b ( 质量比3 ：1 ) ) 表面活性剂 8 c 防冻剂5 尿素 水补足至1 0 0 4 参照国家有关标准及结合2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂实际，制定了该产品 的质量控制指标： 外观均匀乳白色黏稠状液体 伊维菌素，质量分数 o 2 5 毒死蜱，质量分数 1 9 7 5 p h 值 6 8 乳液稳定性( 稀释2 0 0 倍)合格 持久起泡性 2 0 m l 倾倒性 合格 低温稳定性合格 热贮稳定性合格 5 参照田间药效试验准则，对实验室加工的2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂样品 进行田间药效试验。结果表明：2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂对朱砂叶螨和小菜蛾 均具有良好的田间防治效果。确定其防治朱砂叶螨和小菜蛾的田间有效成分用量 分别为4 5 9 0g h m 2 和9 0 1 3 5 鲈u n 2 。 6 2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的成本低于4 8 毒死蜱乳油和1 8 阿维菌素乳 油，而且防治效果均优于毒死蜱乳油和伊维菌素乳油，所以说本配方在农业上有 广阔的应用前景。 关键词：伊维菌素，毒死蜱，生物活性，水乳剂 u a b s t r a c t 皇曼曼蔓曼曼曼曼蔓曼曼曼曼皇曼舅曼曼皇鼍曼曼曼曼曼曼曼曼曼皇曼曼皇曼! ! ! 曼曼曼! 曼曼曼曼曼曼鼍曼i i 一i i 曼曼! 皇 t h er e s e a r c ho ni v e r m e c t i n c h l o r i f o s2 0 e m u l s i o ni n 彤i t e r c a n d i d a t e ：l ij i n g s u p e r v i s o r ：p r o f h el i n a b s t r a c t i v e r m e c t i ni san e wa n t i b i o t i c si n s e c t i c i d e ，w h i c hi so n eo ft h ep r o d u c t so u to f a v e r m e c t i ns t r u c t u r a lt r a n s f o r m a t i o n i ti sm a d ef r o ma v e r m e c t i nb 1c o m p o n e n ti n w h i c ht h e2 2 ，2 3 b i tu n s a t u r a t e db o n dw e r er e d u c e ds e l e c t i v e l yb yw i l k i n s o nc a t a l y s t a l t h o u g h ，i v e r m e c t i nh a sal o w e rb i o l o g i c a la c t i v i t yt h a na v e r m e c t i n ，i td o e sb ew i t ha b e t t e rs t a b i l i t y , l o w e rt o x i c i t y , a n dn oc r o s s r e s i s t a n c e m a n yr e s e a r c h e r sh a v ef o u n d t h a ti v e r m e c t i na l s oh a sg o o dc o n t r o le f f e c ta g a i n s ta g r i c u l t u r a li n s e c t s ，a n dm i t e s a tt h e p r e s e n tt i m e ，i t sm a i n l yu s e df o rp r e v e n t i o na n dc o n t r o lo fl i v e s t o c kp a r a s i t e s ，a n d r a r e l ya p p l i e di na g r i c u l t u r e t h e r e f o r e ，t h ed e v e l o p m e n to fi v e r m e c t i na sap e s t i c i d e w i l lh a v eb r o a dm a r k e tp r o s p e c t s c h l o r p y r i f o sb e l o n g st oo r g a n o p h o s p h a t ep e s t i c i d e s ，w i t hi n s e c t i c i d a la c t i c i t i e si n s t o m a c hp o i s i o n i n ga c t i o n ，c o n t a c tt o x i c i t y , a n df u m i g a t i o ne f f e c t i t sr e s i d u a lp e r i o di s l o n gi nt h es o i l ，b u ts h o r tw h e n o nt h el e a v e s t h e r e f o r e ，i th a sab e t t e rc o n t r o le f f e c to n i n s e c t si ns o i l ，w h e ng r o w nw i t hl e a f yv e g e t a b l e s ，c o t t o n ，a p p l e s ，r i c e ，s u g a rc a n ea n d o t h e rc r o p s b u tt h ep r i c eo fi v e r m e c t i ni sv e r yh i g hw h i c hl i m i tt h em a r k e t i no r d e rt o o v e r c o m et h es h o r t c o m i n g s ，t h ec o m p o u n d so fi v e r m e c t i na n dc h l o r p y r i f o sw i l lh a v ea g o o dp r o s p e c t i nt h i ss t u d y , w en o to n l yd e v e l o p e dt h eb e s tr a t i oo fi v e r m e c t i na n d c h l o r p y r i f o s ，b u ta l s oa b t a i n e dt h ei v e r m e c t i n c h l o r p y r i f o s2 0 e m u l s i o n i nw a t e r , a n d h a dap r o d u c tq u a l i t ya n a l y s i s ，w h i c hw a sv a l u a b l ef o re x p a n d i n gt h ea p p l i c a t i o no f i v e r m e c t i ni nt h ef i e l do fa g r i c u l t u r e t h em a i nr e s e a r c hm e t h o d sa n dr e s u l t sa r ea s f o l l o w s ： 1 t h eb i o a c t i v i t yo fi v e r m e c t i na n da b a m e c t i nw e r em e a s u r e dt ol a p h y g m ae x i g u a h u b n e r , t e t r a n y c h u sc i n n a b a r i n u s ( b o i s d u v a l ) a n dm e l o i d o g y n ei n c o g n i t a c h i t w o o d ，r e s p e c t i v e l y a c c o r d i n gt ol c s 0 ，t h eb i o a c t i v i t yo fa b a m e c t i nw a s1 5 t o 2 4t i m e sm o r et h a nt h a to fi v e r m e c t i n t h el c s 0v a l u eo fr e s i s t a n ts t r a i n so fz c i n n a b a r i n u st oi v e r m e c t i na n da b a m e c t i nw a s0 0 8 0 m g l ，0 2 3 0 m g lr e s p e c t i v e l y i i i 两南大学硕f j 学位论文 t h ea b a m e c t i nr e s i s t a n ts t r a i n so fzc i n n a b a r i n u s ( 10t i m e s ) w a sn or e s i s t a n c et o i v e r m e c t i n 2 w h e nt h er a t i oo f i v e r m e c t i nt oc h l o r p y r i f o si s1 ：9 ，l ：1 2 ，1 ：1 9 ，1 ：3 9 ，1 ：7 9 ，1 ：1 3 2 2 ， t h ec t cv a l u e so fzc i n n a b a r i n u sw e r e9 5 2 2 ，1 0 4 0 6 ，9 9 6 4 ，1 4 4 8 9 ，2 9 6 9 8 ， 1 8 1 9 3 ，r e s p e c t i v e l y ；t h ec t c v a l u e so f t h el e x i g u aw e r e1 7 2 7 9 ，1 3 7 0 4 ，1 5 2 1 3 ， 18 5 9 6 ，19 3 4 8 ，15 9 4 8 ，r e s p e c t i v e l y f r o mt h er e s u l t ，t h ec t cv a l u e sw a sh i g h e s t w h e nt h er a t i ow a s1 ：7 9 s o ，t h e r ew a sas i g n i f i c a n ts y n e r g i s m 3 a c c o r d i n gt o as p e c i f i c p r o p o r t i o no fi v e r m e c t i na n dc h l o r p y r i f o s a n dt h e p h y s i c o c h e m i c a lp r o p e r t i e so ft h et w op e s t i c i d e se m u l s i o n si nw a t e r , r e s e a r c hw a sm a d e o nt h ep r e p a r a t i o no f2 0 o fi v e r m e c t i n c h l o r p y r i f o se m u l s i o n si nw a t e r , a n dt h e s a t i s f a c t o r yf o r m u l a t i o na sf o l l o w s ： f o r m u l a t i o n so f2 0 i v e r m e c t i n c h l o r p y r i f o se w ： i v e r m e c t i n0 2 5 ( m a s sf r a c t i o n ，t h es a m ea sf o l l o w s ) c h o r t y r i f o s 19 7 5 s o l v e n t15 ( a ：b = 3 ：1 ) e m u l s i f i e r8 c a n t i f r e e z e5 u r e a 勋f e r a d d t o1 0 0 4 a c c o r d i n gt ot h er e l e v a n tn a t i o n a ls t a n d a r d sa n d2 0 w a t e re m u l s i o no fi v e r m e c t i n c h l o r p y r i f o s ，t h eq u a l i t yc o n t r o li n d e x e so ft h ep r o d u c tw a sd e v e l o p e d a sf o l l o w s ： a p p e a r a n c e m i l k yw h i t ev i s c o u sl i q u i d i v e r m e c t i n o 2 5 c h o r t y r i f o s 19 7 5 p h v a l u e 6 8 e m u l s i o ns t a b i l i t y ( d i l u t e d2 0 0t i m e s ) a c c e p t a b l e p e r s i s t e n tf o a m i n g 2 0 m l d u m p i n go f a c c e p t a b l e s t a b i l i t ya f t e rc o l ds t o c k p i l e a c c e p t a b l e s t a b i l i t ya f t e rw a r ms t o c k p i l e a c c e p t a b l e 5 b a s e do nt h ef i e l de f f i c a c yt r i a ln o r m s ，t h ef i e l dt r i a l so fi v e r m e c t i n c h l o r p y r i f o s 2 0 e ww e r ec o n d u c t e d t h er e s u l t ss h o w e dt h a t2 0 i v e r m e c t i n c h l o r p y r i f o se w h a das i g n i f i c a n te f f e c to nt h ec o n t r o lo fzc i n n a b a r i n u sa n dpx y l o s t e l l a n ed o s a g e s o ft h ee ww e r e4 5 9 0g h m 2a n d9 0 13 5g h m 2w h e ni nc o n t r o lo ft c i n n a b a r i n u sa n dp x y l o s t e l l a i v a b s t r a c t 6 t h ec o s to f2 0 i v e r m e c t i nc h l o r p y r i f o se ww a sl e s st h a n4 8 c h l o r p y r i f o se c a n d1 8 a v e r m e c t i ne c ，a n dt h ec o n t r o le f f e c tw a sb e t t e rt h a nc h l o r p y r i f o sa n d i v e r m e c t i ne c s ot h ef o r m u l ah a sab r o a dp r o s p e c ti na g r i c u l t u r e k e yw o r d s ：l v e r m e e t i n ，c h l o r p y r i f o s ，b i o l o g i c a la c t i v i t y , e m u l s i o ni nw a t e r v 独创性声明 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中己加了 特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁 在文中作了明确说明并表示衷心感谢。 学位论文作 埔 t 签字日期：纱。年多月弓日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规 定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允 许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院( 筹) 可以将学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：口不保密， 口保密期限至年月止) 。 学位论黼签名存茚摊名：们抓 签字日期：少，口年莎月乡日 签字日期： l 矿p 年多月岁日 第阴章2 0 伊绗菌素毒死蜱水乳剂的研制 2 5 水质的影响 对已经筛选出的配方用不同硬度水质的水配制样品，然后对样品进行指标检 测，确定适合该配方的水质。 3 结果与分析 3 1 溶解的筛选结果 以2 1 中的方法测试了伊维菌素+ 毒死蜱混合物( 1 ：7 9 ) 在不同溶剂中的溶解情 况见表4 2 ，结果发现混合药剂在a 、二甲苯、丙酮、乙酸乙酯、b 中溶解较好， 由于b 极性较强，所以不能单独作为水乳剂的溶剂。丙酮的挥发性较强不能在实 际生产中应用，a 对两种药剂的混合物溶解性比二甲苯的好，直接舍去丙酮和二甲 苯。所以就用a 和b 、乙酸乙酯以不同比例进行复配，结果表明复配溶剂对原药在 常温下有很好的溶解效果。 表4 - 2 伊维菌素+ 毒死蜱在不同溶剂中的溶解情况( 溶剂量为2 5 9 计) t a b l e4 - 2t h ed e t e r m i n a t i o nr e s u l to fi v e r m e c t i nm i x e d w i t hc h o r p y r i f o si nd i f f e r e n ts o l v e n t 溶剂溶解性溶剂溶解性 注：溶解性一栏中。+ + + ，”分别代表，。少量沉淀。、。溶解。 对溶解情况较好的溶剂检测其冷贮稳定性( 见表4 3 ) ，结果表明选a 和b ( a ：b = 3 ：1 ) 为混合溶剂时，低温冷贮无结晶，溶解效果最好。 1 7 两南人学硕 ：学位论文 表4 - 3 溶剂筛选的结果 t a b l e4 3t h ed e t e r m i n a t i o nr e s u l to fs o v l v e n t 3 2 乳化剂的筛选结果 供试乳化剂对混剂的乳化效果见表4 4 。从表中可以看出，供试乳化剂单体除 c 效果较好外，大多不能获得良好效果。 表4 - 4 乳化剂单体筛选结果 乳化剂名称结果标记2 4 h 后结果判定 1 8 第阳章2 0 伊维苘紊毒死蜱水孚l 削的研制 由表中可以看出，乳化剂c 符合要求，下面对乳化剂c 不同含量进行筛选( 表4 5 ) ： 表4 5 不同乳化剂含量对水乳剂稳定性的影响 坠曼! 呈堡：主! 鲢皇堡垡旦堡i 堡堡堕! 坠丛墼坐! 竺垒旦! 曼堕q 翌! 坠! 垒尘i ! i 丝q 曼型 c 含量( )热贮常温结论 由表4 5 可知，乳化剂c 含量为8 时加工的样品，可以达到水乳剂稳定性要 求，我们确定该配方中乳化剂c 的含量为8 。 3 3 防冻剂的筛选结果 按照2 3 的方法，将制剂中防冻剂的含量定为5 ，对防冻剂进行筛选，结果 1 9 两南大学硕1 ：学位论文 曼蔓曼曼蔓曼| 一一 一 i i 曼曼鼍曼皇曼皇 如下表4 6 ： 表4 - 6 防冻剂筛选结果 t a b l e4 6t h er e s u l t so fa n t i f r e e z e tt ob es c r e e n i n g 防冻剂名称常温 热贮( 5 4 士2 c )冷贮( 0 - j ：2 c ) 由上表可以看出防冻剂尿素的防冻效果最好，将有效成分含量定为2 0 ，乳化 剂c 的含量定为8 ，对防冻剂的不同含量进行筛选结果如表4 7 ： 表4 - 7 不同防冻剂含量对水乳剂稳定性的影响 里坐! 呈垒：21 监皇壁垡q 尘壁丝堕垫! i 丛皇垄里q 璺堡坐塑些! 业迪yq ! 里型 尿素的含量( )常温 热贮( 5 4 + 2 1 2 )冷贮( o 士2 ) 从上表可以看出，尿素的防冻效果最佳，最后将整个制剂中防冻剂含量定为 5 。 3 42 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂加工方法的筛选 采用不同的方法加工水乳剂样品，最后确定的方法是转相法，此法在配制水 乳剂时有一个转相的过程，这样所形成油珠会更小，整个体系更加稳定。具体过 程是先将原药用溶剂完全溶解之后加入表面活性剂，充分混合形成均匀透明的油 相，然后将防冻剂加入水中搅拌均匀形成均一的水相。在油相搅拌的过程中，将 水相慢慢加入油相，当开始时由于水较少，形成的是w o 性乳液，随着水量的不 断增加，体系逐渐由w o 乳液转变成o w 乳液。 2 0 第阴帝2 0 f 7 维茼豢毒死蜱水乳剂的研制 鼍- = mm 鼍曼曼曼曼曼曼皇曼曼曼曼! 曼曼! 皇曼! ! ! 曼蔓曼曼曼曼曼曼曼曼蔓! 曼! ! 曼曼! 曼! 曼曼量皇曼曼曼皇皇鼍曼曼曼曼曼皇曼曼曼! 曼曼曼曼 3 5 水质的影响 由下表4 8 可以看出，用蒸馏水、去离子水、自来水、硬水( 1 7 1 m g l ) 、标 准硬水( 3 4 2 m g l ) 都能配制出合格的水乳剂，只有硬水( 6 8 4 m g l ) 配制的样品 在热贮过程中会出现分层现象。通过不同水质对2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的试 验结果表明所选定配方对水质具有较强的适应性。 表4 - 8 不同水质对2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂稳定性的影响 鲨堡垒：苎! 熊曼壁垡q ! 鱼i 堡丝堕! 堂皇! g 坠曼! 塑yo nt h es t a b i l i t yo f e w 一一一 水质情况起始外观冷藏外观热贮外观结论 4 结果与讨论 4 1 一种原药要加工成水乳剂时，首先要考虑原药的理化性质是否符合水乳剂的要 求，水乳剂要求原药在水中的溶解度小于1 0 0 0 m g l ，熔点小于6 0 。c 。在开始着手 研究2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的同时，我们也考虑了伊维菌素的熔点较高的情 况。但是借鉴阿维菌素水乳剂研制成功的例子，最终决定开展研究并取得了成功。 其次是溶剂的筛选，溶剂是水乳剂能否研制成功的前提。水乳剂对溶剂的要求极 为严格。本配方在研制的过程中遇到的问题是：非极性溶剂对伊维菌素的溶解性 效果较差，如果单纯选用非极性溶剂，制剂中的油相必定占很高的含量，进而导 致了制剂中水的含量就降低，这样就增加了制剂的成本。另外含水量太少不易稳 定而且可能就形成油包水型乳液。极性溶剂对伊维菌素和毒死蜱都有良好的溶解 效果，但是加工出的2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的样品在热贮、冷贮过程中会出 现析油、分层等现象。在本实验中通过大量的实验发现：极性溶剂和非极性溶剂 复配作为2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的溶剂时制剂的分散性和稳定性都较好。 4 2 在水乳剂研制过程中的难点和重点是乳化剂的选择，适宜的乳化剂会使水乳 剂在贮存期间不仅外观保持均匀乳白色粘稠状液体，即使在冷、热变化的条件下， 也不会发生相变，是水乳剂稳定必不可少的重要组成部分。 4 3 水乳剂和乳油最大区别是它以水为介质。不同水质对水乳剂的稳定性有一定 的影响；就本配方而言，蒸馏水、去离子水、自来水、1 7 1 m g l 硬水、和3 4 2 m g l 硬水配制出的样品均能安全通过热贮、冷贮。只有6 8 4 m g l 硬水配制出的样品在 2 1 两南大学硕f 学位论文 冷贮过程中会出现分层现象。说明水的硬度对水乳剂的稳定性还是有一定的影响， 同时也说明了本配方对水质的适应范围较广。 第五章2 0 伊维蔺素毒死蜱水乳剂的质帚检测 了分析方法 孽曼曼曼曼蔓曼皇曼曼曼! 曼曼曼鼍皇曼量曼曼曼皇曼曼曼曼鼍曼曼曼曼曼曼皇曼im _ =- - 皇葛 第五章2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的质量检测与分析方法 1 材料 1 1 供试药品 9 5 5 4 伊维菌素原粉( i v e r m e c t i n ，i v m ，河北威远动物有限公司药业) 9 5 毒死蜱原粉( c h l o r p y r i f o s ，山东华阳科技股份有限公司) 1 2 供试药剂 伊维菌素标样 9 9 、毒死蜱标样 9 9 ( 天津市东方绿色技术发展公司提供) 、 甲醇( 色谱级) 、水( - - 次蒸馏水) 、标准硬水。 1 3 仪器 l c 一1 0 a t 高效液相色谱仪( 带紫外可变波长检测器) c l s 从一l c l o 色谱数据处理机日本岛津公司 微量进样器：5 0 u l 、1 p 1 容量瓶：5 0 m l 、2 5 m l ，经校正；重庆玻璃仪器厂 移液管：l m l ，经校正； 试样过滤器：0 4 5 u m 油性过滤器 t g 3 2 8a 型光学读数分析天平 r i s e - 2 0 0 6 型激光粒度分析仪 波清洗仪器 具塞量筒 恒温箱 安瓿瓶 制冷器 p h 值测定仪 2 质量检测与分析方法 2 1 外观 湘仪天平仪器厂超声 济南润之科技有限公司 u l t r a s o n i k 长沙玻璃仪器厂 广东市医疗设备厂 长沙玻璃仪器厂 青岛海尔冰箱制造厂 上海第二分析仪器厂 水乳剂是要求外观为乳白色粘稠状液体，这一特征实际反映了体系中农药液 滴的分散度或粒径，是保证制剂物理稳定性的先决条件。 2 22 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂有效成份分析 2 2 1 伊维菌素的分析方法侧 两南人学硕i 学位论文 2 2 1 1 色谱条件 流动相：甲醇+ 水= 9 0 + 1 0 ( v v ) 进行滤膜脱气过滤； 流速：1 o m l m i m 柱温：3 0 ； 检测波长：2 4 5 n m ； 进样量：2 5 9 l ； c 1 8 柱，反相。 2 2 1 2 标准溶液的配制 称取伊维菌素标准品0 0 3 0 0 9 ( 精确至0 0 0 0 2 9 ) 于5 0 m l 具塞容量瓶中，用 甲醇溶解( 溶解不彻底，可以用超声波清洗器震荡溶解) 并用甲醇和水的混合液 定容；用移液管准确取出1 0 m l 溶液加入2 5 m l 具塞量筒中，用甲醇和水的混合液 定容，摇匀，备用。 2 2 1 3 操作步骤 称取水乳剂样品0 5 0 0 0 9 ( 精确至0 0 0 0 2g ) ，置于l o o m l 容量瓶中，用甲醇 溶解并稀释至刻度，摇匀。在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针伊 维菌素标样溶液，直至相邻两针伊维菌素峰面积均相对变化小于1 5 后。按照标 样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样。 2 2 1 4 结果计算 将测得的两针样品溶液以及样品前后两针标准溶液中伊维菌素峰面积之比分 别进行平均，含量( ) 按下式计算： x l = ( a 2 m l x p ) ( a i x m 2 ) a 。一一标样溶液两次进样时伊维菌素峰面积的平均值； a 2 - 试样溶液两次进样时伊维菌素峰面积的平均值； m , - - 一标样的质量，g ； m 2 一试样的质量，g ； p 一标样中伊维菌素的质量分数( ) 。 2 2 2 毒死蜱的分析方法 2 2 2 1 色谱条件 流动相：甲醇+ 水= 9 0 + 1 0 ( v v )进行滤膜脱气过滤； 流速：1 o m l m i n ； 柱温：3 0 ； 检测波长：2 3 0 n t o ； 2 4 第五章2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的质帚柃测与分析方法 进样量：2 5 1 a l ； c 1 8 柱，反相。 2 2 2 2 标准溶液的配置 称取毒死蜱标准品0 0 5 0 0 9 ( 精确至0 0 0 0 2 9 ) 于5 0 m l 具塞容量瓶中，用丙 酮溶解定容，摇匀； 2 2 2 3 操作步骤 操作步骤同本章2 2 1 3 2 2 2 4 结果计算 计算方法同本章2 2 1 4 2 2 3 分析方法的线性范围 将伊维菌素标样和毒死蜱标样分别配成0 1 m g l 、0 5 m g l 、l m g l 、5 m g l 和 io m g l 系列浓度，按上述色谱操作条件进行分析。以伊维菌素和毒死蜱标样峰面 积为横坐标、浓度为纵坐标绘制标准曲线。 2 2 4 回收率测定 回收率实验采用农业部药检所推荐的方法嘲3 。在已知含量的样品中，分别加 入一定量的毒死蜱和伊维菌素标准品，在选定操作条件下进行含量测定，计算回 收率。 2 2 5 分析方法精密度测定 在色谱操作条件不变的前提下，对同样品中的两种有效成分的含量进行5 次平行测定，测定结果进行标准偏差和变异系数分析。 2 3 热冷贮稳定性的测定 2 3 1 热贮稳定性的测定 将样品在室温下装入洁净的安瓿瓶中，置此安瓿瓶于冰盐浴中制冷，用高温火 焰迅速封口( 避免溶剂挥发) 。至少三瓶，分别称量，将封好的安瓿瓶置于金属容 器内，再将金属容器放入5 4 2 的恒温箱中，放置1 4 天后取出，冷却至室温， 将安瓿瓶外面擦拭干净并分别称量，质量未发生变化的试样，于2 4 小时内分别测 定其中的有效成分含量，计算分解率。 分解率( ) = l o o x ( x 1 x 2 ) x l 公式中x i 试样贮存前有效成分含量( ) x r 试样贮存后有效成分含量( ) 2 3 2 冷贮稳定性的测定 两南人学硕f j 学化论文 将样品在室温下装入安瓿瓶中( 3 0 克瓶) ，然后用酒精灯封口，放置入低温 冰箱中，在( o 2 ) 贮存7 天后，取出后缓缓摇动，观察其外观情况是否有固 体颗粒或油状物嵋9 l 。 2 4 乳液稳定性的测定 参照联合国粮农组织( f a 0 ) 规定的方法咖1 ，在3 0 条件下，在1 0 0 m l 量筒中 加入9 5 m l _ 3 4 2 m g 1 标准硬水，用移液管取5 m l 水乳剂样品，慢慢加入量筒中，观 察初乳情况，然后将量筒颠倒数次，静止到规定时间，观察有无乳析出物( 包括 乳油及沉淀物) 生成，如有生成，记录其体积。结果评价标准如表5 - 1 。 表5 - 1 稀释后累计时间和合格乳状液稳定性要求的关系 里尘! 篁主：! 垦曼! 塾i 旦翌q ! 塑坠! ! i q 旦塾生i ! 堑z 垫堕! 堕曼! i 翌曼塑堕垒i ! 坐! 旦g 稀释后累计时间( 小时)乳状液稳定性要求 o o 5 2 o 2 4 0 2 4 5 初乳完全，呈均匀乳状液 乳析物不大于2 r n l 乳析物不大于4 m l ，无原油析出 重新乳化完全，呈均匀乳状液 乳析物不大于4 m l ，析出原油不大于0 5 m l 2 5p h 值的测定 称取l g 样品于1 0 0 m l 烧杯中，加入1 0 0 m l 水，剧烈搅拌l m i n ，静置l m i n ， 将冲洗干净的玻璃电极和饱和甘汞电极插入试样溶液中，测其p h 值，至少平行测 定三次，测定结果的绝对差值应小于0 1 ，取其算术平均值即为该试样的p h 值。 2 6 持久起泡性的测定 将量筒加标准硬水至1 8 0 m l 刻度线处，置量筒于天平上，称入试样1 0 9 ( 精 确至0 1 曲，加硬水至距量筒底部9 c m 的刻度线处，盖上塞，以量筒底部为中心， 上下颠倒3 0 次( 每次2 s ) 。放在试验台上静置l m i n ，记录泡沫体积。 2 7 粒径的测定 将样品用蒸馏水稀释1 0 0 倍，用激光粒度测定仪进行粒度测定。 2 8 倾倒性试验 置于容器中的水乳剂试样放置一定时间后，按照规定程序倾倒，测定滞留在 容器内试样的量；将容器用水洗涤后，再测定容器内的试样量。混合好足量样品， 及时将其中的一部分置于已称量的量筒中( 包括塞子) ，将到量筒体积的8 1 0 处， 第五章2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的质是检洲与分析方法 塞紧磨口塞，称量，放置确定的时间( 如2 4 h ) 。打开塞子，将量筒倾斜4 5 度，倾 倒6 0 s 。再倒置6 0 s ，重新称量筒和塞子。将相当于8 0 量筒体积的水( 2 0 ) 倒 入量简中，塞紧磨口塞，将量筒颠倒1 0 次后，按上述操作倾倒内容物，第三次称 量量筒和塞子。计算公式如下： 倾倒后的残余物x z l ( ) 和沈涤后的残余物x 2 2 ( ) 分别按式( 2 1 ) 和式( 2 2 ) 计算； x 2 1 = 等等1 o o ( 2 一1 ) x 2 2 = 赣1 0 0 ( 2 2 ) 式中：m l 为量筒，磨口塞和试样的质量，g ； m 2 为倾倒后，量筒，磨口塞和残余物的质量，g ； m 3 为洗涤后，量筒，磨口塞和残余物的质量，g ； m o 为量筒，磨口塞恒重后的质量，g ； 倾倒后残余率s 8 、洗涤后残余率5 1 即为合格。 3 结果与讨论 3 1 外观 配制的2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂为均匀乳白色粘稠状液体，外观符合水乳 剂的要求。 3 22 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂中有效成份分析 3 2 1 伊维菌素的仪器分析 在2 2 1 分析方法下，伊维菌素标样和2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂样品色谱 图见下图。保留时间为2 9 5 m i n 。 图5 - 2 伊维菌素标样色谱图 f i g u r e 5 - 2c h r o m a t o g r a mo fi v e r m e c t i ns t a n d a r d 2 7 两南大学硕 j 学位论文 5 32 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂样品中伊维菌素的液相色谱图 f i g u r e 5 - 3c h r o m a t o g r a mo fi v e r m e c t i ni n2 0 i v e r m e c t i n c h o r t y r i f o se ws a m p l e 3 2 2 毒死蜱的仪器分析 在2 2 2 分析方法下，毒死蜱标样和2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂样品色谱图 见下图。保留时间为7 8 8 m i n 。 5 - - 4 毒死蜱标样色谱图 f i g u r e 5 - 4c h r o m a t o g r a mo fc h o r t y r i f o ss t a n d a r d 5 52 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂样品中毒死蜱液相色谱图 f i g u r e 5 5c h r o m a t o g r a mo fc h r o t y r i f o si n2 0 i v e r m e c t i n - c h o r t y r i f o se w s a m p l e 第五章2 0 伊维荫素毒死蜱水g l 齐 j 的质节检测与分析方法 3 2 3 分析方法的线性范围测定结果 从图5 - 6 和图5 - 7 可以看出，伊维菌素浓度在0 1 m 朗l o m g 1 范围内，毒死 蜱浓度在o 1 m t 酣 1 0 m g l ( 单位规范) 之间，药剂浓度与出峰面积间呈良好的线 性关系，其关系式分别为：y = 1 3 2 0 2 3 x 一1 3 1 6 2 和y = 2 2 0 5 2 x + 1 6 9 3 7 两条直线方程的 相关系数分别为0 9 9 9 2 和0 9 9 9 5 。 5 - 6 伊维菌素的线形相关图 f i g u r e 5 - 6c a l i b r a t i o nc u r v eo fi v e r m e e t i n 图5 - 7 毒死蜱的线形相关图 f i g u r e 5 7c a l i b r a t i o nc u i v go fc h o r t y r i f o s 3 2 4 回收率的测定结果 通过测定，伊维菌素和毒死蜱的回收率结果平均为9 8 5 5 和9 8 2 6 ，见表5 8 。 此结果表示本方法的准确度是可信的。 两南人学硕f j 学位论丈 表5 - 8 毒死蜱、伊维菌素质量分析方法的同收率 t a b l e 5 8f o r t i f i e dr e c o v e r i e so fc h o r t y r i l o sa n di v e r m e c t i n 药剂 已知量( m g )加入量( r a g )总量( r a g )测定( m g ) 回收率( ) 3 2 5 分析方法精密度测定结果 分析方法的精密度测定结果( 表5 - 9 ) 表明，在所选定的操作条件下，毒死蜱 和伊维菌素5 次平行测定的平均值分别为1 9 7 4 9 和0 2 4 9 4 ，标准偏差分别为 0 0 0 2 4 和0 0 0 3 1 ，变异系数分别为0 0 1 2 2 和1 2 2 2 。表明所选择的分析条件稳定， 具有较高的可重复性。 表5 - 9 毒死蜱、伊维菌素质量分析方法精密度测定 ! 垒! ! 旦i ：2 坐呈仑! 旦i j l 2 旦2 11 垒2 墨匹韭垒! 竺垒垒! 垒巴曼鲤翌 药剂 五次测定结果( )平均值( )标准偏差变异系数( ) 3 3 热冷贮稳定性 3 3 1 热贮稳定性 将配制的水乳剂在恒温箱5 4 2 储存1 4 天后仍为均匀乳白色粘稠状液体， 并在储存前后采用液相色谱测定2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的含量，毒死蜱的分 解率为1 2 5 ，伊维菌素的分解率为1 1 9 ，符合要求。 第五章2 0 伊维菌素毒死蜱水乳剂的质帚检测与分析方法 表5 1 0 伊维菌素和毒死蜱的热贮稳定性 旦坠! 堕：! q 墨堂业y 殳兰q 堑i 呈婴皇曼! i 坚：竺垒q 塑z ! i 堕垦型坐笪! 垒婴! ! q 璺娅堡 含量( ) 药剂常温2 0 熟贮5 4 2 分解率( ) 123 平均 12 3平均 3 3 2 冷贮稳定性 样品置于0 2 c 贮存7 天后，仍为均匀稳定的乳白色粘稠状液体，无结晶析 出，无分层现象，能与水任意比例混合。说