（内科学专业论文）胃癌中survivin、caspase3的表达及其相关性分析.pdf

目录 一、摘要 中文论著摘要1 英文论著摘要4 二、英文缩略语8 三、论文 前言9 一日u 青 实验方法1 0 实验结果1 2 讨论1 7 结论1 9 四、本研究创新性的自我评价2 0 五、参考文献2 1 六、附录 综述2 3 在学期间科研成绩3 0 致谢3 1 个人简介3 2 收集中国医科大学附属第一医院2 0 0 7 年1 月6 月临床及病理资料完整的手术 切除并经病理证实的胃癌肿瘤外科标本7 2 例及距胃癌组织5 c m 以远的正常组织 5 4 例。所有患者在施行手术之前未接受任何放疗、化疗或其他针对胃癌的治疗。 采用免疫组织化学法( s p 法三步法) 检测上述胃癌及癌旁组织中s u r v n i n 和 c a s p a s e - 3 的表达。用s p s s11 5 软件包统计分析结果。 实验结果 一、s u r v i v i n 在胃癌及癌旁组织中的表达 胃癌和癌旁组织中s u r v i v i n 蛋白的表达率差异显著( p 0 0 1 ) ，s u r v i v i n 的表 达与淋巴结转移和临床分期明显相关，有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者 ( p 0 0 5 ) ；临床分期i i i m v 期者明显高于i i i 期者( p 0 0 5 ) 。 二、c a s p a s e - 3 在胃癌及癌旁组织中的表达 c a s p a s c 3 蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率有显著性差异( p o 0 1 ) ， 与组织分化程度和临床分期有相关性，分化较好组明显高于分化较差组( p o 0 5 ) ， 临床分期为i i i 期的表达水平明显高于i i i i v 期者( p 0 0 5 ) 。 三、s u r v i v i n 、c a s p a s e - 3 表达的相关性 胃癌组织中s u r v i v i n 和c a s p 嬲e 3 的表达呈负相关。 讨论 s u r v i v i n 基因是于1 9 9 7 年由耶鲁大学的a l t i e r i 等【3 】用效应细胞蛋白酶受体 1 ( e f f e c t e rc e l lp r o t e a s er e c e p t o r - 1 ，e p r - 1 ) e d n a 作探针，从人类基因组p l 文库中通 过杂交筛选获得，是l a p 家族中最小的成员。与i a p s 家族其他成员不同，s u r v i v i n 在人体内几乎所有的恶性肿瘤中均有表达1 4 ，而在正常分化的成人组织中( 除子宫 内膜、胎盘和胸腺组织外) 无表达【6 】。研究发现，s u r v i n i n 与恶性肿瘤的发生发展关 系密切，s u r v i v i n 不仅通过与微管蛋白形成复合物来直接抑制末端c 硒p a s e 3 、 c a s p a s e 7 等凋亡蛋白酶的活性，从而抑制凋亡，同时具有抑制凋亡效应蛋白酶 c a s p a s e 活性、参与细胞周期调控及调节细胞有丝分裂等多种生物学作用。【4 6 】 本研究结果显示，s u r v i v i n 在胃癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织中的 阳性表达率。研究表明，s u r v i v i n 的表达与多种肿瘤的生物学特性和( 或) 疾病分期 有关【8 】。本实验发现，s u r v i v i n 的表达与淋巴结转移、t n m 分期相关，检测胃癌 组织中s u r v i v i n 的表达可能对判断胃癌的恶性程度、病情进展及预后有一定的价 值。 c a s p a s e 家族( c y s t e i n y la s p e a n t a t e s p e c i f i cp r o t e i n a s ef a m i l y ) 是指一群含有半胱 氨酸的蛋白酶，介导即将死亡的细胞高效而特异的蛋白水解作用，在细胞凋亡的 启动和完成中起重要作用，是细胞凋亡的执行者，决定了细胞凋亡的形态改变和 生物化学改变。c 唧器e 3 是该家族的重要成员之一，是细胞凋亡的关键执行者。 c a s p a s e 3 在肿瘤中的表达不仅存在组织特异性，在不同肿瘤组织演迸过程中所起 的作用也不相同。z a p aj m 等【14 】发现c a s p a s e 3 参与了乳腺癌的浸润。 本实验结果表明，c a s p a s e - 3 蛋白表达与组织分化程度相关，c a s p a s e 3 在癌 旁组织中有极高的阳性表达率，而在胃癌组织中表达率明显下降，表明c 嬲p a s e 3 的表达缺失在胃癌的发生过程中起重要作用。c a s p a s e 3 的阳性表达也与胃癌的去 分化密切相关，胃癌中c 嬲p 嬲e 3 阳性表达率在分化较好组明显高于分化较差组。 c 嬲p a s e 3 的阳性表达与临床分期相关，临床分期为i i i 期的表达水平明显高于 i i i 期者，但与肿瘤浸润深度、淋巴结转移等影响肿瘤恶性程度及发展趋势的 指标无明显相关性，说明其在判断肿瘤恶性进展及预后方面有一定的意义。 2 以往的研究证实，s u r v i v i n 可通过直接抑制凋亡通路下游蛋白酶c a s p a s e 3 和 c a s p a s e - 7 发挥抗凋亡作用，s u r v i v i n 还通过与纺锤体纤维结合，间接抑制c a s p a s e 对纺锤体的水解作用。本研究的相关性分析发现，胃癌组织中c a s p a s e 3 表达与 s u r v i v i n 呈负相关，说明胃癌组织中s u r v i v i n 在抑制c a s p a s e 3 的活性方面起着一 定的作用。 结论 1 、s u r v i v i n 在胃癌中为高表达，c a s p a s e 3 在癌旁组织中为高表达，在胃癌 的发生中起着重要作用。 2 、s u r v i v i n 蛋白在胃癌中的异常表达与淋巴结转移和临床分期明显相关。 3 、c a s p a s e 3 蛋白在胃癌中的异常表达与组织分化程度和临床分期明显相关 4 、胃癌组织中s u r v i v i n 和c a s p a s e 3 的表达呈负相关。 关键词 胃癌；s u r v i v i n ；c a s p a s e 3 ；免疫组化。 3 英文论著摘要 e x p r e s s i o na n d t h e i rc o r r e l a t i o no f s u r v i v i n ，c a s p a s e - 3i ng a s t r i cc a r c i n o m a s i n t r o d u c t i o n g a s t r i cc a n c e ri sac o m m o nd i g e s t i v et u m o ri nc h i n a i ts e r i o u s l yt h r e a t st oh u m a n h e a l t h t h ea v e r a g ea n n u a lm o r t a l i t yr a t eo fg a s t r i cc a n c e ri si nt h et o p si nc h i n a w i t h t h ei n - d e p t hs t u d yo ft h ep a t h o g e n e s i so fs t o m a c hc a n c e r ，w eh a v eb e e nf o u n dt h e o c c u r r e n c ea n dd e v e l o p m e n to fs t o m a c hc a n c e ri sc l o s e l yr e l a t e dt og a s t r i cc a r c i n o m a a p o p t o s i s a tp r e s e n t ，t h er e s e a r c ha b o u tt h eg a s t r i cc a r c i n o m ac e l la p o p t o s i sa n di t s r e g u l a t i o nm e c h a n i s mh a sb e c o m eah o tt o p i c i nt h i ss t u d y ，i m m t m o c h i s t o c h e m i c a ls p m e t h o dd e t e c t e de x p r e s s i o no fs u r v i v i na n dc a s p a s e 一3i n7 2c a s e so fs t o m a c hc a n c e r a n da d j a c e n tn o r m a lt i s s u eo f5 4c a s e so fs t o m a c hc a n c e r , p r e l i m i n a r yt os t u d yt h er o l e o fs u r v i v i na n dc a s p a s e 一3i ns t o m a c hc a n c e ro c c u r r e n c ea n dd e v e l o p m e n ta n dt h e c o r r e l a t i o no ft h ee x p r e s s i o no f b o t ha p o p t o s i s m a t e r i a l sa n dm e t h o d s b e f o r ec o l l e c t i n gg a s t r i cc a r c i n o m as p e c i m e nw h i c ht h ec h i n am e d i c a lc o l l e g e a t t a c h e df i r s th o s p i t a lt u m o rs u r g e r ye x c i s e s7 2c a s e si nj a n u a r yt oj u n e , 2 0 0 7a n d 、析t h t h e c o m p l e t e dc l i n i c a la n dp a t h o l o g i c a li n f o r m a t i o na n dp a t h o l o g i c a l c o n f i r m e d s t o m a c hc a n c e r a n dt h ea d j a c e n tn o r m a lt i s s u ei n5 4c a s e so fg a s t r i cc a r c i n o m a p r i o rt o t h eo p e r a t i o n so fa l lp a t i e n t sd i dn o tr e c e i v ea n yr a d i o t h e r a p y , c h e m o t h e r a p yo ro t h e r t r e a t m e n tf o rs t o m a c hc a n c e r s pi m m u n o h i s t o c h e m i s t r yw a su s e d t om e a s u r et h es u r v i v i na n dc a s p a s e - 3i n g a s t r i cc a n c e ra n dn o r m a lg a s t r i ct i s s u e s ( s pm e t h o dt h r e e - s t e pm e t h o d ) t h ed a t aw a s s t a t i s t i c a la n a l y z e db ys p s s11 5 r e s u l t s 一 。 一一一 。 l 、s u r v i v i ne x p r e s si ns t o m a c hc a n c e ra n da d i a c e n tt i s s u e s t h ed i f f e r e n c eo fs u r v i v i np r o t e i ne x p r e s s i o nw a ss i g n i f i c a n ta m o n gg a s t r i c c a r c i n o m aa n dn o r m a lg a s t r i cm u c o s a ( p o 01 ) t h ep o s i t i v ee x p r e s s i o nr a t eo fs u r v i v i n 4 p r o t e i nw a sr e l a t e dt oc l i n i c a l p a t h o l o g i cc h a r a c t e r i s t i c s o ft h eg a s t r i cc a r c i n o m a ( i n c l u d i n gl y m p hn o d em e t a s t a s i sa n dc l i n i c a ls t a g e s ) 2 、c a s o a s e - 3：d r e s s s t o m a c hc a n c e ra n da d j a c e n ttissuesasoase-3 e xr e s si ns t o m a c l lc a n c e ra na a j a c e n tt l s s u e s z 、 t h e r ew a so b v i o u sd i f f e r e n c ea b o u tc a s p a s e - 3p r o t e i ne x p r e s s i o ni ng a s t r i c c a r c i n o m aa n dn o r m a lg a s t r i cm u c o s a ( p 0 01 ) t h ep o s i t i v er a t e so fc a s p a s e - 3p r o t e i n e x p r e s s i o nw e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e ri nt h ec a s e so fb e t t e rh i s t o l o g i c a ld i f f e r e n t i a t i o n t h a nt h ec a s e so fw o r s eh i s t o l o g i c a ld i f f e r e n t i a t i o na n di nt h ec a s e so fc l i n i c a ls t a g eh i t h a nt h ec a s e so fc l i n i c a ls t a g ei i i m v ( p 7 5 分别计0 、1 、2 、3 、4 分。两积分相乘，o 为阴性( ) ，1 4 分为 弱阳性( + ) ，5 8 分为中等阳性( 抖) ，9 1 2 分为强阳性。本文在进行数据处理 时把弱阳性( + ) 、中等阳性( + + ) 、强阳性( 卅) 合并为阳性( + ) 作统计分析。 六、统计分析方法 以s p s s1 1 5 软件包进行统计分析，采用四格表x 2 检验，并计算p e a r s o n 列联 系数( c p ) 和f i s h e r 精确计算概率法，以p o 0 5 ) ：而与淋巴结转移和临床分期明显相 关。有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者( p o 0 5 ) ；临床分期i i i 期者明 显高于i i i 期者( p 0 0 5 ) ；c a s p a s e - 3 蛋白表达与组织分化程度相关，分化较好组的表 达水平明显高于分化较差组( p o 0 5 ) ；与临床分期有相关关系，临床分期为i i i 期的表达水平明显高于i i i - i v 期者( p o 0 5 ) 。 1 4 表3 ，c a s p a s e 3 蛋白表达与胃癌临床病理指标的关系 性别 男 4 2 女 3 0 肿瘤部位 贲门 2 2 胃体 3 0 胃窦 2 0 肿瘤大小 5 c m2 7 分化程度 分化较好 4 8 分化较差 2 4 浸润深度 浆膜层及浆膜内层4 0 浆膜层外 3 2 淋巴结转移 有 5 0 无 2 2 t n m 分期 i i i 期 2 3 i i i i v 期 4 9 2 0 1 7 1 5 1 2 8 8 1 5 1 3 2 8 8 1 7 1 8 2 2 1 4 1 6 2 0 4 7 6 20 5 7 30 4 4 9 5 6 6 7 6 8 1 84 8 5 70 0 8 8 4 0 o o 4 0 0 0 4 0 0 01 8 3 7 0 3 9 9 6 0 0 0 4 8 1 5 5 8 3 34 0 0 0 0 0 4 6 3 3 3 3 4 2 5 01 3 4 50 2 4 6 5 6 2 5 4 4 0 0 2 3 5 60 1 2 5 6 3 6 4 6 9 5 75 1 7 50 0 2 3 4 0 8 2 1 5 挖 b 7 体 屹 他 m h 加 m 3 4 8 8 7 凹 2 1 2 ： 图片3 ，癌旁的正常组织c a s p a s e - 3 的阳性表达( x2 0 0 ) 图片4 ，癌组织c a s p a s e 一3 的阴性表达( 2 0 0 ) 三、胃癌中s u r v i v i n 、c a s p a s e 3 表达的相关性 7 2 例胃癌组织中3 4 例呈c a s p a s e 3 阳性表达，其中1 2 例s u r v i v i n 蛋白表达 阳性，占3 5 2 9 ，另3 8 例c a s p a s c 3 阴性表达的胃癌组织中，2 6 例s u r v m n 蛋白 表达阳性，占6 8 4 2 ，两者之间差异有显著性( x 2 = 7 9 0 1 ，p - - o 0 0 5 ，p o 0 5 ；p e a r s o n 列联系数c p = o 31 4 ，c p 0 0 0 5 ) ，但在有淋巴结转移组的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组( 0 0 0 5 ) ， 且i i i 期阳性表达率明显高于i i i 期( 0 0 0 5 ) ，提示s u r v i v i n 的表达与淋巴结转 移、t n m 分期相关。王举等 9 1 发现肝癌中s u r v i v i n 蛋白表达与原发性肝细胞癌的 与肿瘤组织学分级和转移有密切关联。闫春梅掣1o 】发现s u r v i v i n 蛋白在宫颈鳞癌 中的阳性表达率与临床分期和肿瘤分化程度有关。提示检测胃癌组织中s u v r i v i n 的表达可能对判断胃癌的恶性程度、病情进展及预后有一定的价值。 二、c a s p a s e - 3 与胃癌的关系 c a s p a s e 家族( c y s t e i n y la s p e a n t a t e s p e c i f i cp r o t e i n a s ef a m i l y ) 是指一群含有半胱 1 7 氨酸的蛋白酶，介导即将死亡的细胞高效而特异的蛋白水解作用，在细胞凋亡的 启动和完成中起重要作用，是细胞凋亡的执行者，决定了细胞凋亡的形态改变和 生物化学改变。c a s p a s e 3 是该家族的重要成员之一。细胞凋亡发生和发展概括为 3 个阶段：信号传递阶段、中央调控阶段、结构改变阶段。c a s p a s e - 3 是细胞凋亡 的关键执行者。在正常活细胞中c a s p a s e 以前体p r o c a s p a s e - 3 酶原( 3 2 k d ) 形式 存在于胞质中，在细胞凋亡早期阶段，p r o c a s p a s e 3 被快速活化为c a s p a s e - 3 ，活 化的c a s p a s e - 3 由两个大亚基( 1 7k d ) 和两个小亚基( 1 2k d ) 组成，再聚合成有 活性的c a s p a s e 3 四聚体【l l 】，裂解相应的胞质胞核底物，最终导致细胞凋亡。 c a s p a s e 3 活化后可激活凋亡特异性核酸酶，即c a s p a s e 3 活化d n a 酶( c a d ) ， 从而水解d n a 导致细胞凋亡。 本实验结果表明，c a s p a s e 3 在癌旁组织中有极高的阳性表达率( 8 7 0 4 ) ， 而在胃癌组织中表达率明显下降( 4 7 2 2 ) 。表明c a s p a s e 3 的表达缺失在肿瘤的 发生过程中起重要作用，与h o s h i 等【1 2 1 3 】的研究结果一致。c a s p a s e 3 在肿瘤中的 表达不仅存在组织特异性，在不同肿瘤组织演进过程中所起的作用也不相同，z a p a j m 等【1 4 】则发现c a s p a s e 3 参与了乳腺癌的浸润。本研究结果显示，c a s p a s e 3 的 阳性表达与胃癌的去分化密切相关，胃癌中c a s p a s e - 3 阳性表达率在分化较好组 ( 5 8 3 3 ) 明显高于分化较差组( 3 3 3 3 ) ，有时在同一癌灶中相邻高、低分化成 分可以见到明显不同的表达状况，提示c a s p a s e 3 表达降低可能参与了胃癌的去分 化过程。c a s p a s e 3 的阳性表达与临床分期相关，临床分期为i i i 期的表达水平明 显高于i i i 期者，但与肿瘤浸润深度、淋巴结转移等影响肿瘤恶性程度及发展 趋势的指标无明显相关性，说明其在判断肿瘤恶性进展及预后方面有一定的意义。 三、胃癌中c a s p a s e - 3 、s u r v i v i n 蛋白之间的相互关系 过去的研究证实，s u r v i v i n 可通过直接抑制凋亡通路下游蛋白酶c a s p a s e 3 和 c a s p a s e 7 而发挥抗凋亡作用，s u r v i v i n 还可通过与纺锤体纤维结合，间接抑制 c a s p a s e 对纺锤体的水解作用，保护有丝分裂细胞器的完整性，抑制细胞凋亡【4 】。 此外，s u r v i v i n 还可通过p 2 1 间接抑制c a s p a s e ，其机制是s u r v i v i n 与细胞周期调 控因子c d k 4 p 1 6 ( i n k 4 a ) 复合体相互作用，使p 2 1 从c d k 4 的复合体中释放出 来，阻止细胞凋亡【1 5 16 1 。本研究相关分析发现，胃癌组织中c a s p a s e 3 与s u r v i v i n 1 8 的表达呈负相关( c p = o 3 1 4 ，c p 1 ) ，说明胃癌组织中s u r v i v i n 在抑制c a s p a s e 3 的活性方面起着一定的作用。 s u r v i v i n 和c a s p a s e 3 细胞周期及凋亡相关蛋白表达失常是胃癌发生、发展的 普遍事件，而且与胃癌的发展及预后相关。因此c a s p a s e 3 和s u r v i v i n 蛋白的联合 检测更能反映胃癌的生物学行为，优于单项检测，多基因蛋白联合检测可提高预 测胃癌恶性程度及发展的可靠性，指导临床治疗。如前所述c a s p a s e 3 、 s u r v i v i n 单基因蛋白表达异常与胃癌的关系，目前已有较多报道，但结论不很一致，甚至 有完全相反的报道。如果同时检测胃癌中两个或两个以上细胞周期及凋亡相关蛋 白的表达，并比较其与胃癌临床病理特征的关系，得到的结论则更具说服力。但 在胃癌的发生、发展中，到底是一个或几个细胞周期及凋亡相关蛋白起主导作用， 或是多个基因蛋白异常，才足以使胃癌发生、怎样发生，并进一步发展，以及如 何作为胃癌的诊断和治疗手段，都值得进一步深入探讨和研究。 结论= 日l 1 、s u r v i v i n 在胃癌中为高表达，c a s p a s e 3 在癌旁组织中为高表达，在胃癌 的发生中起着重要作用。 2 、s u r v i v i n 蛋白在胃癌中的异常表达与淋巴结转移和临床分期明显相关。 3 、c a s p a s e 3 蛋白在胃癌中的异常表达与组织分化程度和临床分期明显相关 4 、胃癌组织中s u r v i v i n 和c a s p a s e 3 的表达呈负相关。 1 9 本研究创新性的自我评价 l 、胃癌发病率高，是最常见的恶性肿瘤之一。胃癌组织中c a s p a s e 3 、s u r v i v i n 表达与胃癌临床病理行为之间的关系及两者表达相关性的研究较少，本研究对于 胃癌病人的预后及放疗方案的制定具有提示作用。 2 、c a s p a s e 3 、s u r v i v i n 蛋白的联合检测更能反映胃癌的生物学行为，优于 单项检测。多基因蛋白联合检测可提高预测胃癌恶性程度及发展的可靠性，指导 临床治疗。 参考文献 1k a w a s a k ih ，a l t i e r id c ，l uc d ，e ta 1 i n h i b i t i o no fa p o p t o s i sb ys u r v i v i np r e d i c t ss h o r t e r s u r v i v a lr a t si nc o l o r e c t a lc a d _ o c t c a n c e rr e s ，1 9 9 8 ；5 8 ( 2 2 ) ：5 0 7 l 5 0 7 4 2赵久达，李豪，曹成珠，贺菊香，耿派力。1 9 6 2 例胃癌流行病学分析 j 】，现代预防医学， 2 0 0 8 ：3 5 ( 3 ) ：4 3 9 , - 4 4 0 。 3a m b r o s i n ig a d i d ac ，a l t i e r id c an o v e la n t i - a p o p t o s i sg e n e ，s u r v i v i n , e x p r e s s e di nc a n c e ra n d l y m p b o m a ( j ) n a tm e d 1 9 9 7 ；3 ：9 1 7 9 2 1 4 s h i ns ，s u n gb j ，c h oy se ta 1 a n t i - a p o p t o t i cp r o t e i nh u m a ni sad i r e c t o ri n h i b i t o ro fc a s p a s e - 3a n d 7 ( j ) b i o c h e m i s t r y , 2 0 0 1 ；4 0 ( 4 ) ：1 1 1 7 - 1 1 2 3 5 n o u r a e en ，m o w l as j ，o z h a n da ，e ta 1 e x p r e s s i o no fs u r v i v i na n di t ss p l i c e dv a r i a n t si nb l a d d e r t u m o r sa sa p o t e n t i a lp r o g n o s t i cm a r k e r 【j 】u r o lj , 2 0 0 9 ；6 ( 2 ) ：1 0 1 1 0 8 6 r o h a y e mj , d i e s t e l k o e t t e re w e i g l eb ，e ta 1 a n t i b o d yr e s p o n s et ot h et u m o r - a s s o c i a t e di n h i b i t o r o f a p o p t o s i sp r o t e i ns u r v i v i ni nc a n c e rp a t i e n t s 【j 】c a n c e rr e s ，2 0 0 0 ；6 0 ( 7 ) ：1 8 1 5 1 8 1 7 7s a r e l aa l ，m a c a d a mr c ，f a r m a e r ys m ，e ta 1 e x p r e s s i o no fa na n t i a p o p t o s i s g e n e ，s u r v i v i n , p r e d i c t sd e a t hf r o mr e c u r r e n tc o l o r e c t a lc a r c i n o m a g t i t2 0 0 0 ；4 6 ( 5 ) ：6 4 5 - - 6 5 0 8a l t i e r id c ，m a r e c h i s i op c s u r v i v i na p o p t o s i s ：a ni n t e r l o p e rb e t w e e nc e l l d e a t ha n dc e l l p r o l i f e r a t i o ni nc a n c e r l a bi n v e s t1 9 9 9 ；7 9 ( 11 ) ：1 3 2 7 1 3 3 3 9王举，窦忠霞，王会春，张文梁，王有德。s u r v i v i n 和c a s p a s e 一9 在原发性肝细胞癌组织 中的表达及意义 j 】，吉林大学学报( 医学版) 。2 0 0 9 ：3 5 ( 6 ) ：1 1 1 9 1 1 2 2 。 1 0闰春梅，杨永秀。宫颈鳞癌组织中s u r v i v i n 和s m a c 蛋白的表达【j 】，中国妇幼保健，2 0 0 9 ： 2 4 ( 2 8 ) ：4 0 1 2 - 4 0 1 4 。 1 1 a d r a l nc m a r t i ns j t h em i t o c h o n d r i a la p o p t o s o m e ：ak i l l e ru n l e a s h e db yt h ec y t o c h r o m e s e a s t r e n dp h a r m a c o ls c i ，2 0 01 ；2 6 ( 6 ) ：3 9 0 3 9 7 12h o s h it , s a s a n oh ，k a t ok e ta 1 i m m u n o h i s t o c h e m i s t r yo fc a s p a s e 一3 c p p 3 2i nh u m a ns t o m a c h c a n c e l a n di t s c o r r e l a t i o nw i t hc e l l p r o l i f e r a t i o n a n d a p o p t o s i s a n t i c a n c e r r e s ，1 9 9 9 ；1 8 ( 6 ) ：4 3 4 7 4 3 5 3 13 z a p a t aj m ，k r a j e w s k am ，k r a j e w s k is , e ta 1 e x p r e s s i o no fm u l t i p l ea p o p t o s i s r e g u l a t o r yg e n e s i nh u m a nb r e a s tc a n n e rc e l ll i n e sa n dp r i m a r yt u m o r b r e a s tc a n n e rr e s i r e 乩1 9 9 8 ；4 7 ：1 2 9 1 4 0 1 4s c h r a n t zn ，b l a n c h a r dd a ，a u f f r e d o um t , e ta 1 r o l eo fc a s p a s e sa n dp o s s i b l ei n v o l v e m e n to f r e t i n o b l a s t o m ap r o t e i nd u r i n gt g fb e t a - m e d i a t e da p o p t o s i so fh u m a nbl y m p h o c y t e s j o n c o g e n e ，1 9 9 9 ；1 8 ：3 5 1 1 3 5 1 9 15s u z u k ia ，h a y a s h i d am ，i t o t , e ta 1 s u r v i v i ni ni n i t i a t e sc e l lc y c l ee n t r yb yt h ec o m p e t i t i v e i n t e r a c t i o nw i t hc d k 4 p 1 6 ( i n k 4 a ) a n dc d k 2 c y c l i nec o m p l e xa c t i v a t i o n o n c o g e n e ，2 0 0 0 ；1 9 ： 3 2 2 5 - 3 2 3 4 16 c o n w a ye m ，p o l l e f e y ts ，s t e i n e r - m o s o n y im ，e ta 1 d e f i c i e n c yo fs u r v i v i ni nt r a n s g e n i cm i c e 2 l e x a c e r b a t e s f a s - i n d u c e d a p o p t o s i s v i a m i t o c h o n d f i a l p a t h w a y s g a s t r o e n t e r o l o g y , 2 0 0 2 ；1 2 3 ：6 1 9 - - 6 3 1 综述 c a s p a s e 3 、s u r v i v i n 与胃癌关系的研究进展 细胞凋亡是一个主动的由基因决定的自动结束生命的过程，是人类发育过 程中细胞清除的正常途径。细胞调亡是一个复杂的病理生理过程，受多种基因的 控制。这一过程的紊乱将导致发育异常，并给人类造成许多严重的疾病。许多证 据表明肿瘤的发生与细胞凋亡的调节紊乱有着密切的关系，直到最近人们才认识 到细胞凋亡的减少在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。细胞凋亡参与了癌症的 起始过程，并对癌症的发生起负调控作用。有关学者认为，可望改变重要的执行 死亡基因的表达改变细胞的存活能力，以达到治疗疾病的目的【l 】。由此看来恶性 肿瘤的细胞凋亡的研究对认识肿瘤的发病机制有着非常重要的意义，而且在肿瘤 治疗及预后评价方面都有重要意义。 胱冬肽酶( c a s p a s e ) 家族是凋亡发生和调控机制重要组成部分，研究胱冬肽 酶( c a s p a s e ) 家族与胃癌的关系将推动肿瘤细胞信号转导机制的深人研究，可以为 胃癌的预后判断提供新的线索，也将给新药的设计及细胞靶分子的选择带来诸多 启示。 细胞凋亡受凋亡促进因子和凋亡抑制因子的共同调节，而s u r v i v i n 是一种 新近发现的结构独特的凋亡抑制蛋白( i n h i b i t o ro f a p o p t o s i sp r o t e i n s ，i a p s ) 成员【2 】， 是g a p s 家族中相对分子质量最小的成员，具有抑制细胞凋亡和调节细胞周期和细 胞分裂的双重功能。特异地表达于人和鼠的胚胎发育组织，同时高表达于绝大多 数肿瘤组织和转化细胞，而在终末分化成熟的正常成人组织中无表达。s u r v i v i n 可能是一种癌基因，参与肿瘤的发生、发展过程，提示它是一个有潜在价值的肿 瘤标志物，与肿瘤诊断、预后均密切相关【3 】。 一、对c a s p a s e - 3 的研究 ( - - ) c a s p a s e 3 的分子生物学特点 c a s p a s e - 3 又称半胱氨酸蛋白3 2 ( c y s t e i n ep r o t e a s ep 3 2 ，c p p 3 2 ) 或 y a m a a p o p a i n 。c a s p a s e 3 基因是1 9 9 4 年f e m a n d e s a l n e i l l r i 【4 】等利用p t - p c r 技术 从t 淋巴细胞文库中筛选到的，分为c p p 3 2q 和c p p 3 21 3 ，它们的可读框均由8 3 1 个核苷酸组成，编码2 7 7 个氨基酸，分子量3 2 k d 。人c a s p a s e - 3 基因定位于 4 q 3 2 - 4 q 3 5 1 处1 5 。正常状态下，胞质中的c a s p a s e 3 无活性，以p r o c a s p a s e 3 形式存在于细胞中【7 引。当细胞接受到凋亡刺激时，p r o c a s p a s e 一3 被系列反应激活， 从无活性的二聚体形式水解为2 0 k d 和1 0 k d 亚单位；前者为活性单位，参与切 割多种死亡底物；后者无活性，参与细胞构象改变，有助于切割死亡底物。 ( 二) 、c a s p a s e - 3 的功能和作用 c a s p a s e 3 家族是直接导致凋亡细胞解体的蛋白酶系统，在细胞凋亡机制网络 中居中一t 5 地位。迄今大量研究认为c a s p a s e 3 是哺乳动物细胞凋亡中的关键蛋白 酶。 c a s p a s e - 3 活化后大致通过三种机制使细胞解体： 1 、酶解灭活凋亡抑制物，如核酸内切酶抑制剂( i c