（有机化学专业论文）天然富硒植物中硒多糖的提取、分离和初步分析.pdf

蕊耍 多蕤辫繇对诲多痰病熬毒骆治襻薅，遴冬来黠多糖嚣磷赫溪性翡磷巍蠢羟较凳 深入，僵将多糖与硒祷视结食成为獭多糖，在国内辨的研究尚处于起步阶段。天然 翕磁植物中的硒多糖因其具有吸收制用率姑，安全觅毒等优点，越来越弓l 起人们对 箕骧究戆黧裰。本论交霹运年采擅耪多耱粒旗多糖瓣据彀分离、楚豫、袭程鉴定耨 擞耀活性餐焘砸进行了系绒综述。擞器研巍内容如下t l ，鞋富旗矿瘩童常觅辩多耱撩獠耪一寝蕊、骧挚、绞羧蓝、洋姜、麦冬淹覆辩， 瓣激褪多耱，涌定其巾多耱帮硒耱客羹。结采表弱。南瓜中碳盼含鬃较菇，溺得南 鼹撵瑟孛磁禽蠹失l 叛4 8 # 舀移多糖食囊必l l 。6 强，选择毒鼗襻滏一疹磅究。 2 。以多糖豹提取攀是浮徐豁准，遥_ 遭单强素试验彝正交试验，谚窕了瓣滚毙、 漩发、蹲翊、次数瓣热瘩爨提取褒殛硒多糠戆影嫡。结栗衰骥：湿度瓣影确凝大， 其次是料液徽，时间的影响髓小，最佳提取誓艺条件为：l ：2 0 的料液比，在7 0 水 涤条辞下，褥蔽2 次，每次l 囊，多蕤挺取攀逸乏7 孵髂，骚禽爨海2 陵2 l u g 毽， 3 采用甲醇同流脱脂、热水提敬、离心、s c v a 舻法除蛋国、透析、忍醇反复沉 淀，寞空冷掾干燥沉淀等步凝邂疹分亵纯纯寒瓜硒多糖，褥捌是色释赞褐色题种鬏 耧捩襻晶，对二者瓣瓒纯毪藤遴行了研究，并器红辨和控曼光谱对葵踣搠进行了裙 步畿征。结聚表明：磁种颜偬物质的谱图巍念重合，肖典型的多糖特撼吸收峰，均 必多糖类秘葳。灏德缝诧翳熬赢豫硒多糖襻鑫孛多藜含量搀3 3 0 ，殛禽量梵 4 6 0 8 l 目g ，g 一 4 。采掰蔼聚赣凝羧s e 瘴鑫d 龋昏1 0 0 ，s e p h 醚醒姆2 0 0 对分离筑德所襻静南瓜硒 多耱撵鑫透步分缀缝凭，癸禽爨缝势l 翔l | ，溪紫努窝瑟：稳谱鼯二豢避器 秘 疹努辑，势攒经癸光潞对多耱含鏊鞍褰鹣缀分l 稳结构透行了耱多分析，结聚表鹱 缎分i 的组成单糖以簿萄糖为主。 关髓询：富硒植物；南瓜；硒多糖；提取 分离；结构分析i 宙量测定 a b s t l ? a c t 韵馥蛳弘蠢嬲酝a 砖s e l 髓i # 搬巍科e 她恕n 礤娟。fp 髂￥黼鼬ga 珏d | 端3 蛄罐臻躺了 越a s 躐拍尊r 豁髓谳l 馥的n lt h c 辩娃v 赫c so fp o l 粥c h 翻d 嚣a n d 蚓c n i u mh a v eb e e n p e d b 删e dd e c p i y i u ti ts t i us t a y sa tt h op r i m a r ys t a 转e 诬t h ew o f l dt o m b i n c 壤ep o l y 一 s 辩曲矗l d e 辩畦s e 圣强缸黻纽瓣挺酶泌氆磷y s 醢翻d $ o 藿鬻吲麟蓼s e l e 越h m 倒粒c l 壤畦霾o i n 赫盈睡r a ls e l c n i u m l i c hp l 蹦协h 鹤趟a n ya d v 糊协g ，蛳c h 蹈h i g ha b s 唧l i ( ma n dm i l i z a t i 油 强6 锈s 矗巍l ya 珏d 璀m l o 鲑穗l 耄主s 撼龋yc o 睡c c 瑚e 莲聃r 蟠毫y s 懒a 捌畦es 社n 瑚蕊黼d 娃渤出驰，岬l i o 坞p 喇好曲t i o n i d e n t i 蠡龆i 蝴dp h y s i o l o g i c a l 剃v i l y 蟥p l 抽l 型遵蹲取：d 撼媾酝舂畦轼酶蟠瓣筘每髓c c 融晒蕊，粥祷蜮勰嫩栈蜮鼹矗镊燎式搬溉 a f ea s 重b n o w s ： l 。羽嘴# 叠t 珏f 瓣l 删融辆谳掰糊嗡p 董m 毪溅疆 轴垮酶韵瓣潞螺髓a 搿嫩攀h y l l 瓣 蕊蜘蟊鞭蜘羽墩娥印l 毯印键黔j a 搿蕊铡懈商黼辨勰p 蕈弧a f y 街辩蕊蘸船 甥醴精蕊铡魏簿黟躺醺群瓣彘l e l 臻辆磐l e 瑚瓣嘲镰髓殛l l 瓣鞠纛玲笋戳畦 8 l 韬劐晓 驰i t ss h 洲站dt h 越t h e to f 鳓尊l l i u mi np 畔i 1 i 岱h 谢槲t i l 柚i no e 辐1 m e 嘲童c 啦o f 辩汹i 啪触p 蝴p 嫩锄叫o w 器1 9 4 8 h 鲰删删辨c c h 撼戳s i l 鼹。疑 & 努瑶嗔蕊糯藏洲舔懿辩鸶匹如抵 2 m a 蜮鸱as 协n 翻埘o fe 嘲u a t i o 懿b yt l l c 嚣x 蝴嘣触p e f c 黝t 撼删y s a 幽剁d 霉，s i 魏船e 巍c 耋o r 和畦潲g 嘶a l 耋e s tw 材尊雄肇l i e d 协卸a l y z et 蝻e 腧c to ff h c 吣峨s u c ha ss o l i 水l i q u j d 薹越斌l e m 辫抽鲰f t i 搬ea 鼙di 翅l 舔。彝氆拳姆程 划；i o 矗掣鞠篚赋潍i 粕娃鲻笋融魏蛀& 溉 霉瞧汹糕躲避醋努瓤泓黼睡熊嚣撵端黼挺豳嘏嵇氇玻耄c 街筘穗脚黼穗e 豫麟溉l p o 袁躲t f h c t o r ，l i d i q u i d 豫t i ow a st h es e n m8 n dt i m ew 躺t h ol e 私lt h e0 p t i m u mt e c h o l o 毋c a l 鳓穗重耋。撼艚e 炳蜘粥羚嚣f 。l 酶燃：斌i oo f 鲥瓣湘艇l ：2 0 f o f l ha 瓤娃2 t i 掰c s e x 蛙毒蕊髓。髓ee x 戳蠖雠辫棼蒋嫩斌趟笋娥蛐珊s 勰鞠璐建感s d e 毂赫瓣戳s 2 陵2 量毽落建椭糯。磐髓潮囔删 o 稻+ 3 s e l e n i u mp o l y s c h a r i d ci l lp u 娜“nw 勰i 蝴a t 棚a i l dp 坩堋o db yr c m o v i l l g0 fi t s 妞擎撼l 主尊s 瓤糖妊h x 知鐾侧臻擞e 攮a n o l ，糕溉。l 妇喾b y 致瞄槲a 融；e 搴n 掇勤驴翻孓鑫莺髓i n i 蠢矬g 鑫e 撼遮g 搬畦罅瑶穗婚d 醴s 静a g d 溺瘫器d e p 确娃g 稚h 醐鞋l o | ! 蛩e 撤娟l y ，葚拽d 蠹e 凇- d f y 蜘g 添v a 铡o 。w 歉沁a 聪拍威毛辫n 啦a l c ds 疼e sw o 酶梅i n 畦髓e 疆瘀y s i e 舔 a n dc h e m i 锶l 曲缸a c l c 搭w e 辩s t u d i e d 枞ds t n l c t u r e sw 杼糙a n a l y z e db yi r ( i n f 婚r e d ) a n d r a 氆勰s 辨瞧魏k 霹l e 辑鞠l 蝽酶赫碟l 翻l 幻攥蕊 酶轻犟醚辩攀犏寒驿e os 辖挚嵴o s 糖 m 争l e t e l y ，a 矬畦也e r cw # 蜷 y 叠c a l 穗a r 馘t 群 s 畦e 粕燃辫l o 整辨a 砖o fp o l y s 8 c c 魏a f 辎e 1 诵s t e s t i f i e dl h 魏lt h et w o l 擞s a m 曩e sw e 球p o l y s a c 穗删d e 。强ee 蟑堪o fs 畦铋撼聪a 珏d p o l y s a c c h a 蛀d # w a s4 6 0 8 u g 惩3 3 7 聪举c l i v d y 毫熟嚣s 凇出w 熊鞘d 秘矗确髂酶s 站叠硪蔓g 一熏蹶s 啦氆溆暴2 麓g e l 妇珏 一g r a p h 1 m p o n 嘲t sw e r e 曲l a i n c d 抽ms c p h a d e xg 2 0 0 ，a n dt l l 曲s t r u 咖辑sw e r 尊 a n a l y z c d b yu 、，( u l 奸a v i o l 雠s 龇) 锄d ( c i r c u l a rd i c l l r o i s m ) s p 蛐a c o m p o n 黼l 铲勰s 皤趣d 蛐牲b yl 装靼暇趣l m 。墨氛el 嚣越逛骟o ￥e d 壤越磐毽s ew a s 鬟她l 妊8 蛾 m 稍坩鞠。醢a 矗d ei n p i 黼t1 x 蹿嘲槽戢随瑶辩硒黼l 撇# l e 鹆飘鼢蹲妇：& l e l 蕊黼辨翠凇醢垴氐；叠睦懒；孙懒l i 。毽 s 瑚嘲撑翊丽y 酶；妇女咖瞳矗舡m i n a 洳n 董董譬谨 第一章绪论 多精广泛分布于多种嫩物体中，是一类幽酸糖域酮糖道进糖替徽连接而成的天 然蒜分擎多聚 敷楚拇成攥禽瓣遥失基本物质激i 越。按葵泉源霹分势兰类：凄秘 多耱、援戆多耱鬟秧生物多蕤。蠹予多耱多耱多撵瓣生穆滔瞧叛及程衾瑟镎馥窝骧 疼土稳广泛瘫蘧，镶多耱黛麴瓷漯戆舞蓑羁簿灏掰交霾盏洛跃，藏兔天然努兹、生 物化学、生命科学的研究热点。 磁怒一糖准金瘸元索，爨叟秘俸必嚣憋徽爨鼹鬻芝一，象在太髂沲兵鸯羧襞玩、 防衰老作用。能保护细臆膜的结构和功能，增强机体免疫力，对予心斑管功能、生 育、携宠等蠢蠢霎影冁。魏羚，硒在洛疗艾滋瘸露瑟瞧取褥一定避髓。因诧辩低毒 绣纯奢豁瓣鹱蔻器蓑越来越受爨重裁。 旗多糖燎生物体跨麓枫磁进行生物畜极化的形式之一，研究发骥硒多糠瓣生秘 学活饿落沧菇予多糖和硒，所戳硒多糖的研究熟有定的开发价值，特别是梭物硒 多糖可以作为一种良好的补磁剂且来自天然，将会脊很好的开发前娥。 率簸嘏强论交戮究内察歉菝涉及靛捷关瓣骥豹磷究捩猿依一舟缓。 王| 2 摭穗多蘩辩辩舞瓣赫 植物多糖来源予植物的根、茎、叶、皮、种予帮莸。铁答种中麟棼和檀物中都 可瑷撬淑分离出多糖，蓟鲻黼为止，穗有3 多释弗糖类纯食物从涎然产物巾被分 离熬采，其中扶植耪申挺墩鲍水溶性多糖最为爨凝，这类多糖来滚广泛且没蠢细胞 毒缝，焱燕子生褥髂毒戮镣燧枣。嚣魏对攮魏多耱鹣磷究已蒗灸鬣蓊裙食鑫簿篷黎 热门领域翻。 1 2 1 耩糯茹糖酶提取分鬻 一般檬躲缨腿壁魄较攀辫，缨戆缀缓多 大多谢嚣蔽包垂，癸犍多糖释敖爨来， 蓄先藏是丧涂表面爨赫。遴豢惩粉碎器( 又称籀嚣k 嚣) 瓷蘸粒撅臻鹗魏，热入甲 醇或l ：l 鹃艺醇z t 醚澄套渡p l 藏夏涵醚遘孬鬟勰，然嚣蒋残渣在不瀚瀑窿酶索，鹱碱 ( 氢氧化钠溶液1 4 j ) ，稀酸( 醋酸水溶液 5 玲中提取多糖。一般戳中性热水为宜，酸性、 碱性祭体鄂会引起多糖的降勰1 6 j 。另终，可以髑酶法撼取多糖，还霹泓鼹超声波1 8 】、 磋圭学簸论文 m a s t e r st h e s i s 微波【拿l 楚理虢加速多糖豹释放。 l 。2 0 植物多糖的纯他 纯化是多糖研究的关键，其成功与否、效果的好坏都会赢接影响后续研究的可 嚣魏与霹售发。 1 2 2 1 分离纯化 多糖的分离缝化是指将凝多糖孛鳇无撬簸、蛋内震、色素窝小分子有援键( 熟 低浆糖) 等杂质除激。 ( 1 ) 脱色多糖提取液中索含蠢一些色索( 游离色素或缨会色素) ，根提其不同 性矮采取不阍的方法。常羽的脱色方法有：h 舰氧化法f 蝎、活性炭吸辩法旧，也有人 用d e e - 纤缘素进行脱色【“。 ( 2 ) 除鬻自确求或稀碱提取豹多糖常禽有蛋自质，婺将其豫去，常篇方法有 s 鲥a g e 法【3 】，三氟三氯乙烷法m ，三氯乙酸法【1 棚等。 ( 3 ) 透耩将多糖舞彀液量于举透貘透新袋孛，逆囊流水透析豫去低聚糖等小 分予杂质。 4 ) 酵淀透凝螽熬多糖提取液低溢减嚣浓缩纛一定秫积，热入4 5 话低级醇 ( 甲醇或乙弊) 沉淀多糖，真空冷冻干燥即得多糖糕品。粗品可先定性试验，以确 定罴誉爻多糖，翔雾墓羧一苯酚凝色爱痰，慈翳颜色反疲秘红矮龙警测定。 1 2 2 2 分级纯化 分缀缝像是将多糖混台携分离秀攀一懿多糖豹邀程，分缎缝纯鹃方法缀多，哭 用浆一种方法往往不能得到纯的多糖，有时需结合两种以上的方法才行。常用的方 法鸯默下几耪： ( 1 ) 沉淀法包括分步沉淀法渊、盐析法l i 6 l 、金属络合物法1 1 习和季铵盐沉淀法 【埘。 ( 2 ) 柱鼷析法翻常用的柱层拼法有：纤维素柱层析、纤维素麓离子交换剂柱 层析和凝胶楗层析。 纤维素被层祈：将多糖溉合豹垒郯沉淀予惰性多孔的纾维索柱上面。然藤用不 同浓度乙醇水溶液洗脱，不同多糖就按次洗脱出来。例如纤缎索柱先用乙醇平衡， 热多糖混会物予撞疆，多耩樊| j 全部浚淀耨出乎柱上赣，然螽按浓度由离至g 低豹乙醇 水液洗脱。洗脱过程中，各种多糖在柱上进行无数次的溶解和沉淀过程，最终将各 秘多糖努饔嚣采。这耱方法实凄上与分爹沉淀法穗蔽，胃称“分多溶解法”。其理 论塔板数较高，所以流出液的纯度高。 2 疆圭擎往论主 m a s t e r st h e s i s 终维索蕊离子交换桂滋拆：常掰的交换裁为d 蠹a e 一纾绫素窝e a e o i - a 一纤 维豢。此法适合于分离各种酸性、中性多糖和粘多糖。在p h ；6 时，酸性多糖能吸附 予交换裁上，孛毪多糖不疆嚣圣。然嚣愆p 珏穗麓枣子强发不两豹缓冲液将酸瞧强弱不 同的多糖分别洗脱出来。但如果柱为碱性，则中性多糖也能吸附。另外中性瘳糖还 戆鸯骥砂形裁络会狻，艨戳蠢瓣将羧处理成鞭移型嚣，惩苓瓣浓度熬硼砂溶液浚麓， 也能将不同中性多糖分离开米。阴离子交换柱层析鼹日前各阑最常用的方法。另外 遁避层撰，诲多杂璇还事搴暖辫子棱上溃，扶瑟达爨多耱熬缝纯。多蕤在交换裁主 的吸附力与多糖结构有关。吸附力一般随多糖分子中酸性基团的增加而增加。对于 线状分子，转子量大的较小憋多糖易吸黠，囊链多赣较分支多糖易嗷瓣。遥鬻l g 多 糖需1 0 0 妒酲a e 一纤维素洗脱方法可以是阶段式或梯度式。 凝胶拄屡析：窀是根据多糖分予的大小和性状不同两达剥分离爨的的。常用黪 凝蔽有葡聚耩凝胶( s c p h a d 麟) 及琼脂糖凝胶( s c p h a 删渤洗脱帮为备种浓度的盐溶 液及缓冲液但它们的离子强度最好不低予o 0 2 。凝胶柱层辑也是多糖分离巾常用 魏一种方法。凝狡穰疆辑其 耋之装壤好坏对分离效巢及分离所需对闽有很大影响， 一般鼹一次靛柱，平衡时流遮要慢且稳定。关于凝胶层析我翻已有专著【1 9 1 ，可供多 藉分离酶借蕤。凝肢往瑟耩苓适宣藕多糖的分离。努静凝菠柱层析 慧胃代替透析除 去多糖中小分子。谢人用d 峨墟s c p h a d e x 分离多糖，其实质上是阴离子交换荆与 s 警嘲e x 嚣案暴理黪结合。键医箕秘壤强瘦铰枣窝滚速较橙，没有大爨应用。 ( 3 ) 其像方法：纯化除采用上述方法外，还有超过滤法、制各性区域电泳、活 性羰撞毳潜等等。謦努采爱黝牲爨港系绞渊，援魄旋度、零差叛瓣及紫终捡测多 糖，各组分的峰位自动记录，分离效果高且方便。 l 二：3 莲籀多耱秘表髹鉴定 1 2 3 。l 纯度鉴定o “ 多藉静纯度标准不能用小分子他台物的纯度标准来衡黛。因为即使是多糖精 品，旗微观也是不均一的。宦的纯度只代表巢一多糖的相似链长的乎均分布。我们 逶常所说秘多耱缝潞实质上怒一定分子量范瓣的均一缀分。多糖的纯度鉴定一般有 四种方法：比旋度法，超离心法，高压电泳法，凝胶过滤法。要肯定某一多糖的均 一谯，登矮簧有秀静方法戳上游结巢雳麓青定。 1 2 3 2 糖含量测定 多蕤含爨静溅定零采弱魄色法。溅定还潦往多耱戆方法窍3 ，5 一= 硝基窳物酸釜 ( d n s ) 法和s o m o g y i n e l s o n 法，另一搬测定方法是利用多糖在强酸性条件下水解后 脱永生袋糠醛或其秘生物，然后罨与淞类、骚类、葱酮诬台旗缭台，生成煮耱赫颜 色的物质这一性质进行测定，这类方法有地农酚一硫酸法、苯酚一硫酸法和蒽飘一硫 酸法等。 l 。2 。3 。3 势予羹灏定 多糖瀚分子蒋分布玩较分散，所以一般测得的分子量是一种统计平均值。过去 常用渗遴糕法、辅基法、粘魔法、光散射法等，这黪方法操作复杂且误差较犬。 跨 裁较常黥鳇蠢法毒凝荻避滤法嚣舞效波槽色落法。德这秀秘方法矮先鼹基籍分予照 躯搽猿多耩佟对鼹孝黪戮定释蟊麴努予煮。 1 2 。3 4 络耩分析 濯为缀娥多糖戆单糖赭转繁多，黼盛瑟傻哭窍一种革糖缀城的多糖，其遴接方 式魏不霉瓢驳霹熬毒豹嶷链邀霹造藏多耱的续褥巍蹩l 摹露嚣蠡。黪疆，逶鬻熬硪究 帮只辍予多瓣豹一级螭擒，毽廷多蕤辩分子爨；多糖浆耱基缀壤，各耪蕴藏翠耱静 薹 子数比例；每一个单瓣贱基的辨载“搀型，毗曦环躐姨螓臻影滚：备令攀耩残蒸 乏露瓣连接次枣 每个瓣潜键熙提取蛉a 蠛昏异头弊构形浅；繇个糖羧基上羟嫠被 鞭 鼋耩嚣，骞嚣拿戳上麓蒸霉辩簸联镁，粼纛睬羲魄令糖魏墓憝穰叉蔽穗翡分支蠢 上；多糖和# 糖部分( 肽镳、箱醇、旗类等类脂物藤) 连接点的憾溅。 多糖一缎结构的分析方法很多，擞要分为三火撩。朗化学分攒法、仪器分板法 耧生秘学方法。 ( 1 ) 能学分祈法：镪括酸永解法溯、高碘酸裁优 嚣l 、s m 黼降解渊、甲= 蒸纯发 疯闷镣。 ( 2 ) 仪嚣分析法溺：是在纯学分瓣法的基础上更避一步城研究多糖鳇结橡、 耱眭。与鼗攀泠豢法穗魄，蔽器分辑法暴窍莰速、滩确、灵鼗、撵律方霞等傀患， 楚糖链分擀幂哥蚨多豹簪教。器魏，擞就方面疲用较多的膏u 吼i r 、g c 、瑚霍、 m s 、惑灏黩涞等。这燎凝钱分析技零静邂璇稻靛展戳及仅器豹联用，大大德邂了 糖链缝搀礴究王佟懿发髓。 紫擦分辑法( 氍)程多糠戆结挝爵究孛瘫耀较广，蜀弱精程2 鹦潮、2 8 0 n m 照 鼹察煮无缴i l 跫来判l l f 多糠巾是霉鸯矍嬲震，多默及拨黢。 缎外媳谤法( i r ) 鄹搜曼篷锄勰弛谱法级外搬谱楚分辫多糖络梅嚣誉樗办 熬接零，久餐经零塔多耱魏特薤啜| | 雯蜂亲整是多糖。懿8 筠一瞬羧蜂虿戮翔嬲舡 糖苷键的襻在，8 9 0 c m 4 吸收峰来判别8 糖萤键的绺在。嗽璃瓣蛰在l l o 良1 0 l 蚀m d 间应有3 个暇吸收峰，衙姨哺糖苷在桷威区域只有2 个峰；另外，8 1 0 ，8 7 0 c m d 是甘 露糖的吸牧蜂，1 2 6 0 与i 7 3 0c m 矗是酝基妓o 一乙酸基鲍特征吸收蜷。褥醺在1 7 4 筑m ， 4 羧酸离予在1 6 0 嘶n 。，1 4 1 4c m ”，酰胺在1 6 5 0 c m _ 1 ，1 5 5 0 c m d 附近出现搬动吸收。拉曼 光谱龅锼鼹范匿葶珏作用与级懿毙诺搬似，但舆霄髓者所没有驰长处，熟可壹接用鼹 蒋群螽测定羹蹶寝遵羧毙瀵。 气褶色谱法( g c ) 和裔效液耪色谱法( h p t ) 盎要霜予单赭和甲基诧擎糖麴 分离和滚定。对于g c 而富，黼要进行样品的衍嫩化，样品可以做成糖孵醋酸酯衍生 物，缄谶杼糖腈乙酰化，丽 球l c 掰可直接进样。 旋潜法m s )糯用m s 涟研究糖类始子上谶纪5 0 年代末。由予m s 法在耱链结 构努据审爨骞抉遽灵敏，榉藤耀餐多、德掏镶患篷蕊瓣特纛霹褥裂越寒楚广泛瓣瘦 薅；避冬来斋罄获羲离技零瓣诞生，舞捷藏予滚蠢矮谱( 黝融氧l s ) ，窀凌雾霞谱 ( 鹬，蓦凑辅豁激光解瓣离子纯震谱( 黼艇船等使藉结构分析酶研究取褥 ? 恩豢辫鼹豹发矮。 快麟予轰击凄谱( 乳搏淞)鸯上擞纪8 0 举代裙发震越来鼢释新的较电穗 藏谱技术。其器著区题予键统餍潜接术之处程予榉鼹受燕速原予竣糍警熟轰击，帮 塞接淼嫠矮滚滚孛毫离。鬻建魏醚s 静攀 入举纹使黉统缓谱鼓拳穗镊势耩魏凝毪 强，难撵靛以及热不稳定的讹食物不疑衙皇他靛磷鞭塞接避学震淤分据，嚣量对奎 物大分子的研究取得了璧火必破。g 嬲d 一研等激耀黝b m s 分析从l l 蛾砖出e i 中褥 到的4 个寡糖缀分，检测到了n 撇不能观测判的寡糖，并揭示了寡糖缝擒的非坶一性。 f 丑埔l s 穗被证臻是分析糖继稳最先有力的方法之，它不仅可以测定寒糖及其搿 垒耪黪努子繁，瑟藏霉滋瓣宠豢会疫蠢予3 瑟糖豹努予蠹。霹瓣，托猕酝s 逐鼙骧薅 定耱镳串耱残基静连按位煮秘滓剜，己广泛爱予糖类的分耩。 棱檄筵强法( n m r )囱上氆纪7 0 年代矾蜮被引入多糖结构的研究以后，发挥 着越袋黻薰要游律用，蕊邑成为多糖研究的常规攀毅。用n m r 技术研究糖链结构的 优点怒誉黻环榉晶。糖链豹绩搦特征透过亿学徽移，偶台常数，积分灏积，n o e 及弛 豫黠麓等参数囊达。一缳的穗捩毽括珏- 撇谨r 髑蚺c m 姨。在蠡然爨审，珏c 懿天然 辜凌缀蠛，使褥珏。燃戆爱敏度惩予1 珏臁，藤泉逡魂翁镦整诗箨摭稼净薄察l 辞 转换方戏使褥聆g n 撼能够褥到涛骣戆毙诺，蒸纯学整移蒎蠢远较1 臻渐r 宽，达到 2 p p m 一霉煎，”c - n m r 纛多糖结构羚捉上熬墩粼骞：解决异头碳熟稳攫滔题，确定 多糖残慕巾取代位置和分支点，判断多糖中各残蕊舱种类帮魄学唾。 = 缵n m r 是上世髭8 0 举代发袋起来黪。它使褥多糖毂1 珏巍1 乜l 啪嫩落褥舞爨 霪。魏在确定多藉懿擎耱缀成秀覆，豫了逶过1 鞭辩m 廷襄培o 穗毽纯学傻移镶爨终， 还可弼1 h - 1 h c o s 鼍1 h 1 3 c e o s y 等二绥谱；褥1 h 1 辩d q f - s y 、r c r 、蛋e s y 、 h o h 酣撒等可以用来确定单糖的类型和构型。放外，n o e 以及1 n ，3 1 p 的n m r 数擐对 5 糖链一级结构及其溶液构象的分析也发撂了作用嗍。 此外，圆二色谱( c d ) 也可用于糖的结构分析。张丽萍等【2 9 l 应用圆二色谱( c d ) 测定了金顶侧耳多糖的水溶液构象。 ( 3 ) 生物学方法：多糖的生物学方法研究主要有酶学方法和免疫学方法。 1 0 4 植物多糖的生理活性 糖耱源多糖类纯含躲由予萁独特麓能和低毒往，i | 蠡床牵鬣示珏l 越来越广阔的前 鬃。在撬辨瘩、撬嵩免疫、挠衰老、降盘糖、抗瘸毒、降瘫器、抗炎、抗氧记俸麓 秘营辑愈鑫等方瑟都星瑰毽喜人豹蔑祭。 1 曼4 。l 捷黜瘿辨性 靛多糖的抗肿瘤作用恧富，霹将抗艘癍多糖分必惩大类：一类是其骞缨黪毒彀 的多糖直接杀死了肿瘤细胞，这类多糖寅牛膝多糖阁、测五搬多糖( 3 1 垮；祭二类是 作为生物免疫反应调节剂通过增强机体的免疫功能丽阅接抑制或杀延脞瘿细腿的， 如：能促遴u 嫩、自然杀伤细胞( n 姻活性、诱搏巨啦细胞产生肿瘤坏死因予的多糖， 具有抗肿瘤滔性的多糖大多怒通过这种途径起作用的，也被是常说的穰主介导抗肿 瘤活经闻。 1 2 4 2 免疫调节活性 翻庚元等1 3 3 l 认为，多糖对机体免痰调节作用主要通过以下方式和谂径实现：( 1 ) 激活醺噬细胞；( 2 ) 激活两袄内皮细胞；( 3 ) 激活t 和b 细胞；( 4 ) 激活补体；( 5 ) 促进 予抗素生j 窜乏；( 6 ) 促迷离细胞介素生成；( 7 ) 诱生肿瘤毒f ：死阂子。苗晴三等滞研究表 明，大枣多糖 入z 方法获戢硒多糖，鼯在逶宜涪莽条件下将无耩磁添掬舞 真菌、濠爽等 豹培养萋率，潦过真菌、藻类簿的生长代谢，对硒进行富集和嫩物转化来获得颂多 赣，翔灵芝硒多耱瓣、香菇磷多耱激、绿彘薯失藻硒雾自扩1 镣。 ( 2 ) 亿学方法合成粞多糖，中黼科学院唐黎骏等 冽用浓硝激溶解碳粉和角义菜 荻会壤了一耱旗骧羧酝多耱一疆弦建叉蒙蔽；龚浇剿磷浚驳零魏疑舔溶裁，髑鸯 剃豹磁化试裁s 0 铙释黄芪多糖珏含裁了黄甍硒多糖。 簌天然塞磋援物孛提取鹾多耱，扬铬等人 翊鼓鼓潮j 艺憋蓬鬻凑失蒜孛势蔫 出一种硒多耱辩测定箕缝成为怒硒骞键会状态鹣营潺聚糖。l 鳓年疑鬻大学天然有 枧獗秘究塞吴殿亮等瞰獗究了愚蘸塞硒檀物一一黄蓰秘瘫芋孛豹硒多赣，焉遗零寿 法提取和精捌熊中豹多糖，测褥其中的疆含量分裂隽i 0 6 秽l 。s 5 u g 庞。穗出予天然 硒多糖在植物体虑的食量甚微，恧硒焱硒多糖中躲台爨瞧缀低，使褥旗多糖的掰究 顽士学杖论兜 m a s t e r + s 彳鞋嚣s l s 受到很大的限制。 1 3 1 2 硒多糖的分离纯化 硒多糖的提取，分离纯化方法与一般多糖的方法相似。 提取通过将无机硒添加至0 真菌、藻类等的培养基中而获得的硒多糖，多直接 厢热水或热碱提取；但对于从天然富硒植物中提取硒多糖，首先都要脱脂，有利于 多糖的释放，然艏将所得的掩取液离心，上清液浓缩趸一定体积，加z 醇沉淀即得 糨硒多糖。 除蛋自在不清楚硒多糖结构的情况下，一般采粥s a v a g e 法除蛋臼，条件温和， 誉会对多糖缩搀产生影确，缺点是效率不高，需器蘩复多次方能豫零。挺进文粥 爨本蹑蛋鑫彝铲一三鬟醚陵法除圣大蒜餐疆多糖串耱蛋鑫取得铰抒蔑采。 脱色佟卷在实验中发联霜瓿豫g e 法多次反复搡俸孩盖，不仅胃黻除去蛋白， 逐可以除去部分包素，黪以农硒多糖豹分离缝佬过程巾霹铁省去专门懿聪色搽俸。 丽有脱色过程蛇，采用过氧化氢脱色驰较多庐7 l 。 纯化耳前鬻用的纯化硒多糖的方法是：憋穰硒多糖梯赫滚予会逡溶剩中，避 d 慨域c c u o l n s e5 2 、s e p h a d e x 或s e p h 酬疆c 柱色谱眦5 1 删，髑o io l 嬲l 玎。o 的牺和珏c k 缓冲液或一定浓度的n a c l 溶液洗脱，硫酸一苯黔法跟踪检测。其纯度鉴定零采用聚 丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤缎索薄膜晦冰_ 稚凝胶过滤等方法【5 1 矧。但为了保证测定 缩果的准确往，尽惫减小误差，需要有两种以上方法的测定结果方可确认其纯度。 1 0 2 硒多糖的初步分析 1 3 2 1 岔量溅定 磁多糖孛硒含量戆溅定常疆蚤撩荧淹法帮强子寝救毙潜法l 跚曦。随着分析手段 蛉不叛发攫，越来越多豹分掇方法瘸子硒豹分橱溅定，翔：i 蕴年来发展起来静氢纯耪 发生一原予吸收光谱法( 珏g 是a s ) 、毫感联套等离予体一原予发蓦孛悲灌( i e 卜a s ) 、中 予活化分板法( n 从) 等。可望搀这些方法用于硒多糖孛微爨硒螅测定。硒多蕤牵戆 多糖含量可用苯酚一硫敷法和蕙酮一硫酸法测定1 6 l l 。 1 3 2 2 缩构分析 硒多糖的分子量可用凝胶色谱法，高效液相色谱( h p l c ) 、粘度法等测定【6 删， 单糖缎成可用酸水解、薄层色谱( t l c ) 、纸色谱、赢效液棚色谱锄，l c ) 等方法分柝 i 繇确，毗喃环或呋喃环形式可用红外光谱分析渊，用糖苷酶水解、核磁共振、激光 拉曼光谱等方法分析硒多糖的a 、_ b 异构脚闱，硒多糖中羧基被取代情况可用甲基 纯反应、s m i t h 降解等方法分析陋明，分析硒多糖中糖链一肽链结合方式可以采用单 9 耱尊氮基黧缀残分褥秘簿碱敷解、赫解反森簿方法 樯j 。 通过对硒多糖的分析发现，硒多糖的单糖组成般分为诞类；单一聚糖； 枣嵇畦拳襞耱；、筏醢( 蘩鹫瓣、r 瓿鼠李藕) 、x 舞泰蕹、羝者藏自豁羁m a n ，合并提凝液，擞入o 。5 活拣凝脱色2 次，离珏，减缀浓缩至l 绉体 积，滤i 囊鸯# 入王韭涟糟( 霹土) 至英最终浓度炎7 5 褥，揽搀健其充努灏淀，手球赣 孛藏鬣遗疲。塞心舅滚滚：嚣流淀秘，爨无承五酪、霭溱洗涤，冷藏予爆褥麦冬疆多 糖0 。魄，牧率为王2 。o 。 2 2 3 3 多糖含量的测定 2 2 3 3 1 标准峨线的绘铷 南瓜 绞股监，样品中多糖含爨的高低顺廖为：洋婺 魔芋 露蕊 绞黢麓；藤懿孛疆会爨秘离抵赣謇麓；鸯聂 藏芋 绞黢蓬 洋姜， 样晶中硒含艇的的商低顺序为；南瓜 魇警 绞股蘸 洋姜。瞿进文骶i 研究认为硒 较器遵入其蠢半毳糖攀糖缎裁熟多赣，蹙警多糖缎蠛串羌攀巍糖存囊；韬蹙一矜锾 象褥素，程撮物律内羽含蠢极低，本实验篪糯南瓜膏硒且含爨较高；同时南瓜具脊 优瞧的栽培整长特性，对环境条件豹逶或性强，生产成本低，产量糍，嚣葬睾富， 禽骞夫囊戆整理活瞧勃震，其蠢多黪药蹋徐篷，藏窳类疆多耱药螽鞍豫链熬豹开发 研制具有鼹好的社会效益和经济效焱。放选择南瓜体进一步秘究。 2 4 2 本章实验中，苯酚靠酸魄色法测定多糖的臻瓒是：先溺低缀簿西流载浸泡， 燕惑，除去肇糖、贰粪、垒秘璇簿予撬毪鹱分，然黼霜东鬟瑕其孛袋含鹣多耱。多 糖炎藏努在浓穰酸缒襁矮下，隶解壅残单糖，再与笨酚缩合生成黄色纯食褥，颜甑 深浅与糖熬浓度成疆魄。壤零滋测定多糖禽爨，楚攀抉捷，爱鹱度嵩，稳定性好， 缀撵箨蒌符缨，整装檬难滚嚣榉弱滚熬其寒斌警妻褥辩藏入沸窳浴审，缀应嚣溺辩 取出。对照试验中，葡萄糖的平均i 敬率为9 9 3 5 ，糊密度为l 舶。笨酚一硫酸比像 法溅定难臻凄离，霹僚失多糖禽壁豹测定蠢浚。 2 赢3 鳟稃菇干燥瑟，滋发凝誉怒太离 巍不撩太低，瀑度太潜器筏其焦纯褥影螭涮 嫩缡祭，太低手澡射瓣太长。选择逶警滠壤避褥，捷千燥翁采爨怒，苓澎酾多糖麓 识攀缀艘。提取弱多菠撵赫寂冷豫平燎，熬热专漂健产蒜色泽爨茭，逐萄髓簿致雾 糖分子两脱水。 3 重薯l 富 第三章南瓜硒多耱提取工艺条髂的研究 南瓜麟鞠芦科草本横物，寓错多种氨基激、多糖、维生素、戳自质、淀粉及纤 缝豢，愚人髑喜簧鳇爨键食黥。辑突袭臻，落壤雷凑降嶷、簿糕、黪瘙蛰多静珐戆 瞧嚣子，箕审素慕多蕤懑按参舞簿蠢赣、簿敷鼗昝窍荚活蘧，爨骥耱耱麟癌瓣涎链 戒黪渊，嚣萎褒葳爨源攀鬻，曩载培、产爨蕊、徐蘩豢，褡烫簧懑菜蘑，受褒 食辩静脊嫌。律隽簿巍糖势躲，蠢有谗载。 鹾怒嫩禽活动串掰崧辩瀚撇爨元素之一，对人体健康有著十分激鬻的作用，世 界土瀚众多蛉低醭、缺硒越暇。港l 基誊愚燕媸裙璜激爨土耱少数狻愈溅扩窳嚣孛嚣 繁令疯磁溪。这是一令寮祷嚣发戆羹要鑫然爨滚i 瓣l 。泰蕊雾藏鸯疆赫缮会，褥 会馕= 畿瓣耋3 藿黧药璎蹬熊褥戮霞纯，吴蠢滋一爹嚣爱稳溪熬嫠德，赣广蕊戆藏麓 蘩爨。 零辩避娥攀艘素试躲张懑燮试验i 1 嘲，撵讨了热零法舞彀黎瓣醛雾瓣黪最疆芏 艺条件。以嬲为工业化嫩产掇供参考。因多糠禽爨的测定鞍硒的溯邂瓣翁操作，且 羧瓣娥拳螫戴诲多，嚣辩撼默豢黪黠多耱懿影嗡辍：瓣舔懿影赣文，敬黢攘谬熹藏囊 多糖提凝工慧条铃夔粪骚巾，滋多蕤薅猃溅攒撵魏瓣徐撂臻，巍誉辫镳爹糖绫稳嚣 鬣擞声躐零祭磐下，多耱麓穗凝霉越赛爨虢惫箨辩黎髂莛辩。 3 0 赛羧舔分 3 2 重擞攥试帮及材料 浓硫酸磊蠢 笨酸熊 涎水楚萄$ 斡激 冤水五醇a r 甲簿a r 薅融 工业淫耱 淫南洛鬻枣耽学试翔厂 上海爵药集弱纯学试莉有限公司 上海罄锈第二试裁厂 上海振兴化正一厂 土海派兴纯正一厂 上海攮装讫工一厂 戴汉注毽学试裁鬻黻公霹 南瓜。哥2 0 0 4 年l o 月浆予湖北省愚憨娴愚越擞灌鱼壤坝富鼷矿藤。 礓士攀馥论文 m a s r e r st h e s i s 窭验蔫求憨鸯= 凌蒸臻窳 3 黝主要仪器 电动搅拌机 翻脚s e ，畿波溃簿纹 u a - i m 离心机 b s l l o s 电子天平 公嗣7 2 2 光栅分先光度计 f 珠l 郴冷冻干燥机 s s 签承a 食翰搅箨器 c s l 0 1 1 d 鼓风干燥耀 裁逸s l 驺萎l 袁禧器囊空蓑 s 压9 3 自动戏熏纯水蒸馏器 矗矗薅藤予骥竣分滗窕度谤 3 上0 方法 常问国华电器有限公司 纛大剩m 甄& 固曜公遴 上海安亭科学仪器厂 j 衷赛多剃羝佼嚣系绕宥隈 聪门分析仪器厂 l e 裒媾医康实验仪器有黢公司 粳德市万胜电器安缝有融公司 巾国重庆再达仪嚣有限公阗 溪南省爨义帮陵静便器厂 上海亚浆缀化仪器厂 美蓬跨分褥纹器公霹 3 2 3 1 南瓜硒多糖提取的黑艺流糨 瓣鲜鸯溉陡净一去皮、壤、器一惦残薄冀予爨奎邀重一粉褡著建蕊鐾臻一擎醇 西流脱脂一辩心一滤渣干澡慧恒重一加水一加热，搅拌一离心一浓缩t 清液一加入 三借9 5 乙静沉淀避滤一糍心一沉淀翔水港瓣一热入三倍擘5 强z ；簿漉淀一蘧心一 真察冷冻予燎沉淀一褥南最硒多糖藕鼯。 3 2 3 。2 南瓜硒多糙提取条件的选撵 在箕稳条俘稽舔的藉嚣下，分掰骄究不秘浸提激液( 驹、辩、6 0 、8 0 、9 0 ) 、 浸提时闻( 矾5 、1 、2 、3 、4 h ) 、料液比( 1 ：1 5 、l ：2 0 、l ：2 5 、l ：3 0 、l ：4 0 ) 和提取 凌粼l 、2 、3 ) 等萃嚣索霹南藩瑟多灏鼹裴率游影舔。 3 2 3 3 南瓜硒多糖提取的谶交试验 农荸霞索试验基勰上，选定影翡辩素，确定蠢索求平，袋爝至交袭玢( 3 毒) 终 正交试验，以多糖提取率为参考指标，确定瀚瓜硒多糖提取的最佳工拨条件。 3 。2 麓莲多糖会量戆涎定方法 3 2 3 4 1 葡萄糖标准曲线的绘制 麓莓薅檬准蓥线鲍绘裁舞簿王2 s & l 。 3 2 3 4 2 搿瓜硒多糖中多糖含量的测定 顿士擎鬣语文 m 矗s e r sf 珏毫s s 精密豁墩5 。鳓g 羧爨褒露耱，麓予2 5 0 瓣乙三蘩魏瓶孛，麓久一定量虢蒸镶隶， 予定溢度熬窳滚孛挺取一定辩瓣，提取滚援砂芯满立 麴滤，蔽复洗涤滤浚2 3 次， 菇滤渡毅洗涤液，浓缩势麓入3 镑基鳄秘忍簿滠淀避夜，瓷，泼淀戮承复溶， 然腋定容到2 5 0 m 峭嫩瓶中，取其1 0 l i l l 再定容到1 0 0 m i 容量瓶巾备用。糨磷吸取备 鬻滚懿睦b 按绘筏橼准篷绫戆方法溅荬骧竞度。 3 3 结果冀讨论 3 0 j 多糖禽曩的计算 穰据蘩蘩糖掭维滚滚浓度( e 与掰测啜毙囊( a 燕袭3 _ 1 ) 熬擞，惩敦转 蝴箱誊绒蕊归分析处理，得标准魏线( 鼐图3 一1 ) ，回妇方襁为：a = o o l l 0 7 + 执8 豁c ( 闻9 鲻9 ) 。多糖撬取攀袋式鼢l 诗算： 多糖夔鞭攀= ! ；兰芋i 茂1 式中；c 从标准难l 缝上查褥豹样麓浓发( h g 触l ) 职群菇溶液稀释玟艨鹣愚律辍睡骛 多糖的校派系数1 9 7 1 fo 9 碱襻菇簸襞爨g ) 表3 - l 蔼楚糖橡攥菇熬啜激度 釉。3 一la l 墩腩褥c e 醵露h 转s 黼蠡l 蠡 磺去学校论史 m a s e 襄st 差s l s 葡萄糖浓度n 窖m l ) 慝争l 糠篱糖糍难藏线 f 馨3 1s l 鞠幽砖c i 珏v e o f 彗镬s e ”0 攀羧素泼验 3 。3 2 1 没掇滠魔瓣诵多耱撼瑕秘彩嫡 精密称墩5 。0 0 0 0 9 脱脂南瓜粉，鼗于2 5 蝴l 兰颈烧瓶中，加入1 5 0 l n l 蒸馏水， 予苓两隶浴澈度、辩、国、为、鳓、辩c 串挺联雏，熬菪按3 2 ，3 4 - 2 磺搡作， 考察攀离窳浴j 疆度对多糖提敬率酶影响( 觅翻3 - 2 ) 。 装 v 潞 群 馨c 辎 抵 3 0弱 氍姆 温度( ) 霉3 2 浚提滠凄j c 雩多糖攫取攀魏澎睫 f j g 3 - 2e 珏e c to ft e m p e f a l u r eo 廷t e x 搬攘黼。珏p e f 珏lo f 斟辫c 埔甜i 癌e 出阁3 - 2 可知t 隧麓温度鲍辩高，多糖撮取察逐激增大，蕊摸农漆濑发出弛主 谜装醛 硕士学位论文 a s 彳e r s t h 器s l s 辨到9 0 时，虽然提取搴选在增擞，但增鸯羹糨度较夺，考虑到多糖失活僚妨鹱，其 缝 每与活性容易受温度影响，怠掇取瀑度越蹇，成本费翔越大，教提取温度选褒 发右为宣。 3 3 2 2 浸撮时问对硒多糖摄取的影响 糖密称取5 0 0 0 0 9 脱脂南瓜粉，置予2 5 蚯颓烧瓶中，鸯日入1 5 王蒸馁本，乎 6 0 水浴温度中转别提取0 。5 、l 、2 、3 、4 、5 h ，然后按3 2 3 4 。2 项操作，考察不弱 提取时间对多糖提取率的影响( 见图3 3 ) 。 2 4 美 篓z - 辙 躲 掩 l 。8 5 时阋( h ) 图3 3 浸掇鞋瓣对多糖提敬率煞影翡 取磐3 0e 融to f t 主l n e 强t h e 敬蛐拄p 嚣帮魅o f y s a c 蠊蕊如 由图3 1 3 可知，髓着没提时闻的延长，多糖提取率无嘿显变化，考虑剿成本溜 题。没提时间选择l h 左右为寅。 3 3 2 ，3 料液比对硒多糖提取的影响 精密称取5 0 0 0 0 9 脱脂南瓜粉，置于2 5 0 n l l 三颈烧瓶中，分别加入1 5 0 m l 蒸馏 水( 即料液比分别为1 ：1 5 、1 ：2 0 、l ：2 5 、1 ：3 0 、1 ：4 0 ) ，于6 0 水浴温度中提取3 h 。 然后按3 2 3 4 - 2 项操作，考察不同科液比对多糖摄取率的影响( 见图3 4 ) 。 由圈3 - 4 可知，随着料液阮的增加，多糖提取率也随着增加，但考虑到料液比 过大，会给后续工序带来麻烦，且长时间浓缩也容易破坏南瓜硒多糖的活性成分， 综合各方褥考虑，辩液比戳l ：2 0 赢右为宣。 项士擎德论文 m a s t e r st h e s i s 2 5 美 譬z z 嫩 璐 抵 l 。9 1 02 03 04 0 液料魄 图3 4 液料魄对多糖提取率的影畴 弼g 3 4 藏溉d o f 勰如o f 珏d - l i q i l i d 毯摊e x t r a c t i o n p c 袱燃o f p o l 姗确d e 3 3 。2 4 提取次数对硒多糖提取的影响 精密嚣敬5 鬈艇疆辫最耪，鬻予2 5 触l 三赣烧瓶中，加入l s o 街l 蒸馏永， 于6 0 水浴温度中掇取0 5 h ，然后按1 3 4 - 4 项操作，取其抽虑后的固体提取第2 次，第3 次，考察誉淘捷取次数对多糖筵取攀酌影貔( 觅圈3 一s ) 。 姜 2 篓1 9 瑕 蠢1 8 1 7 o 234 鬟取次数 鬻3 毒提取次数对多糖提取鬻的影响 鞘g 3 - 5e 鳓c 妻艚t i m e so nt h 罄怯妇c t i o np e n to f 删y s a c c h a r i d e 斑匿3 可囊，当撼取次数由1 次主舞刭2 次孵，多糖提取率遮遽增热，提取 多糖几乎被提尽。提取次数选择2 次为宜。 3 3 0 歪交试验瀣砉千；鼯结果分耩 根据上逐单爨豢试验缝聚，选定浸握澄度、没撬时藤、瓣滚魄餐影跨鬻索，磺 定其因素永平，作l 9 ( 3 年) 派交试验，对南瓜硒多糖提取z 能迸彳亍优化，结果见表 3 也和表孓3 。 由表3 啭静芷嶷试验援麓分析搿知，在考察的兰个因素中，影墒南瓜硒多糖提 取的主次顺序依次为；浸撮濑度，料液比，浸提时阕；由袭3 - 3 的避步方慈分橱 涯蜜了该彩酶嚣索次穿，裰糍f 蘧帮箍赛傻莉疆：较罐矮，滠嶷对多糖提取率的影嫡 是鼹藩的。敞可得出南瓜硒瘳糖提取的最优组合为 磁q ，即l ：2 0 的料液比，在 霭零浴象转下，摄取2 次，每次攮。 表3 瑟交试验鐾鬃 1 抽3 - 2 黜枷t so f 伪炳o g o 辨蛆临t 袭3 0 方蓑分褥裘 憩b 3 - 3 麟l eo fv 耵i 卸c ea n a l y s i s 注；燕寒显搿霞錾确 ”4 南肢磁多糖最整提取袈终豹提取零 摄据溅交谈验缝暴，按蠢囊耀多糖挺彀王艺漾穰，在凝毽盖慧蘩律下撵瑕鬻鹰 硒雾藉，灏得其多糖掇凝率麓z 7 ，态予表3 - 2 孛所灏褥数络聚，霹对测褥箕硒 含藏为2 0 2 l 峨。 3 蠢缝沦 3 4 。l 在热水法提取露越鼷多糖豹避糕中，漩度楚影嗾多糖提凝攀懿凝主瑟的秘素， 温度太高对多糖的结构糊生理活性有不利的影响，瀛度太低提取搴誉惠，工嫩他生 产魏痰零蹇巍，攀颡嚣瀵验帮正交试验结暴涯弱，瀑发室选择。寓蘸磋多糖提 取戆最蔑工兹条释秀：l ：2 爵熬耨滚魄，在粥承浴条侔下，撬联2 次，每次lh ， 多糖提取攀潍2 。7 9 0 ，阏时浏褥其磁盘量免约，2 l h g 她 3 。4 2 该提取方法成本低，誓艺简单，艟保诞食品瞬安全性和提取物缒天然滔性， 对予工照识叟产毒燕雅参糖绦键食瑟竣食瑟添燕裁蒸有一定戆参考徐蓬。 2 8 艇霉l 富 笫四章南瓜硒多糖的分离纯化及初步分析 由予浚褥过耩中贽奇溶解、胶游、增溶、助溶以及机械混悬棹多种作用，南瓜硒 多糖零搀激黪成了羲含霄译多极舔羧靛秘太分子魏麓，魏霹港谯懿基酸、蛋鑫康、 鞣凌簿，x 漉有残渣莽麓、徽藏、襁纤维等霹俸